Usar objetos

BPLLa columna de afinidad a puede purificar específicamente el BPA y el BPS en las muestras. utiliza gel de agarosa en forma de columna como portador sólido. el gel de agarosa se acopla con anticuerpos de BPA para formar un inmunoadsorbente y se carga en la columna para formar una columna de afinidad inmune. Es capaz de purificar específicamente el BPA en muestras. la columna de afinidad BPA es ampliamente utilizada en la extracción de muestras como alimentos y bebidas. este método es rápido, fácil de operar y preciso, y desempeña un papel muy importante en la mejora de la calidad y seguridad de los alimentos.

El método de instrucciones aplica el método de columna de afinidad para detectar BPL en los alimentos.Método de detección de A.

GB 5009.305-2025 normas nacionales de seguridad alimentaria determinación de bpa, BPF y BPS en alimentos

Condiciones de almacenamiento

La columna de afinidad se conserva enEn condiciones de 2 - 8 ° c, no se puede congelar absolutamente, y la vida útil es de 18 meses. Se recomienda usar a temperatura ambiente (18 - 30 ° c).

Preparación de soluciones experimentales

lMetanol- solución acuosa (80 + 20):Tomar metanol80mL, Añadir 20 ml de agua y mezclar bien.

lMetanol- solución acuosa (40 + 60):Tomar metanol40mL, Añadir 60 ml de agua y mezclar bien.

l盐酸溶液(10+90):Tomar la cantidad10 ml de ácido clorhídrico fuerte, añadir 90 ml de agua y mezclar bien.

lSolución de pbs:PonerEl paquete de reactivos de tampón PBS (número de artículo: g3001) se disuelve con 1000ml de agua pura y se mezcla bien.

Pasos de análisis

GB 5009.305-2025 método

1.0 extracción de muestras

1.1 carne y productos cárnicos, productos acuáticos, productos lácteos sólidos y semisólidos (leche en polvo, leche fermentada, etc.), alimentos de fórmula infantil

PesajeLa muestra de 1G (precisa a 0,01 g), colocada en un tubo centrífuga de polipropileno de 50 ml, se agregó 50 μl de líquido de uso mixto estándar interno isotópico y se dejó reposar durante 30 minutos después de la mezcla oscilante. Añadir 2 ml de agua, oscilar el vórtice durante 30 segundos y luego agregar 5 ml de mezcla del vórtice de nitrilo. Extracción ultrasónica de la mezcla durante 15 minutos y centrifugación a 10.000 R / MIN a 4 ℃ durante 10 minutos. Tomar el líquido claro y colocarlo en un tubo de soplado de nitrógeno de vidrio, soplar lentamente con nitrógeno a unos 2 ML a 40 ° c, añadir 8 ml de lpbs y mezclar bien, a purificar.

1.2 huevos, leche y productos lácteos líquidos

PesajeLa muestra de 1G (precisa a 0,01 g), colocada en un tubo centrífuga de polipropileno de 50 ml, se agregó 50 μl de líquido de uso mixto estándar interno isotópico y se dejó reposar durante 30 minutos después de la mezcla oscilante. Añadir 5 ml de nitrilo, mezclar el vórtice y extraer por ultrasonido durante 15 minutos, y centrifugar a 10.000 R / MIN a 4 ℃ durante 10 minutos. Tomar el líquido claro y colocarlo en un tubo de soplado de nitrógeno de vidrio, soplar lentamente con nitrógeno a unos 2 ML a 40 ° c, añadir 8 ml de lpbs y mezclar bien, a purificar.

1.3 cereales y alimentos complementarios para cereales infantiles

PesajeLa muestra de 1G (precisa a 0,01 g), colocada en un tubo centrífuga de polipropileno de 50 ml, se agregó 50 μl de líquido de uso mixto estándar interno isotópico y se dejó reposar durante 30 minutos después de la mezcla oscilante. Añadir 10 ml de solución de metanol - agua (80 + 20), oscilar el vórtice durante 30 segundos, extraer por ultrasonido durante 15 minutos y centrifugar a 10.000 R / MIN a 4 ℃ durante 10 minutos. Tomar el líquido claro y colocarlo en un tubo de soplado de nitrógeno de vidrio, soplar lentamente con nitrógeno a unos 2 ML a 40 ° c, añadir 8 ml de lpbs y mezclar bien, a purificar.

1.4 hortalizas y frutas

PesajeMuestra de 1G (precisa a 0,01 g), colocada en un tubo centrífuga de polipropileno de 50 ml, mezclada con 100 μl de solución de ácido clorhídrico (10 + 90) y añadida 50 μl en la misma posiciónLíquido de mezcla estándar interior vegetarianoSe deja reposar durante 30 minutos después de mezclar la oscilación. Se añadieron 5 ml de nitrilo, se osciló el vórtice durante 30 segundos, se extrajo por ultrasonido durante 15 minutos y se centrifuga a 4 ℃ 10000r / MIN durante 10 minutos. Tomar el líquido claro y colocarlo en un tubo de soplado de nitrógeno de vidrio, soplar lentamente con nitrógeno a unos 2 ML a 40 ° c, añadir 8 ml de lpbs y mezclar bien, a purificar.

1.5 bebidas

PesajeLa muestra de 1G (precisa a 0,01g) se colocó en un tubo centrífuga de polipropileno de 2 ml, se agregó 50 μl de líquido de uso mixto estándar interno isotópico y se dejó reposar durante 30 minutos después de la mezcla oscilante. 10.000 R / min de centrifugación durante 10 minutos. Retire el líquido claro a un tubo centrífuga de polipropileno de 50 ml, agregue una solución de 10 ml de lpbs y mezcle bien para purificarlo.

Nota: aclarar las muestras (como agua pura, agua mineral, etc.) no se puede centrifugar y agregar directamente PBS para mezclar.

2.0 purificación de muestras

2.1 activación de la columna de afinidad

Conectar columnas de inmunoafinidad aDebajo de la jeringa de 10,0 ML. Ajustar la presión para que la solución protectora de la columna pase lentamente por la columna de inmunoafinidad a un flujo de aproximadamente 2 ml / MIN (1 gota / segundo) hasta que una pequeña cantidad de aire pase por la columna. Medir con precisión 5 ml de líquido de activación de la columna de afinidad (estándar del producto de la columna de afinidad) para lavar la columna de afinidad, con una velocidad de flujo de 1 gota por segundo, hasta que una pequeña cantidad de aire pase por la columna. Lavar la columna una vez con 5,0 ml de agua pura, descartar todo el líquido de salida y luego lavar la columna con una solución de 10,0 ML pH 7,4 pbs, con un caudal de 1 gota por segundo. cuando la última solución de 2 - 3 ML llene la columna, deje de presurizar y bloquee la salida inferior con un tapón para su uso.

Nota: para aumentar aún más el BPLEfecto de purificación y adsorción de la columna de afinidad inmune a, que necesita ser activada antes de su uso. La columna de afinidad activada debe usarse dentro de una hora.

2.2 purificación de columnas de afinidad

取Todas las líquidos a purificar en el paso 1.0 pasan por la columna, la velocidad de flujo es de 1 gota por segundo, se abandona toda la salida de líquido, y luego se elude la columna de inmunoafinidad con 10 ml de agua, la velocidad de flujo es de 1 - 2 gotas por segundo, y después de la gota de agua, se seca La columna de inmunoafinidad con una bomba de vacío. Añadir 1 ml de metanol para eluir, el caudal es de 1 - 2 gotas por segundo, recoger el líquido de elución en el tubo de soplado de nitrógeno de vidrio y secarlo lentamente con nitrógeno a 40 ℃. Añadir 0,40 ml de metanol con precisión, mezclar 10 s con vórtice y luego agregar 0,60 ml de agua con precisión. después de mezclar el vórtice, se transfiere a un tubo centrífuga de polipropileno de 2 ml, centrifugar 5 min a 10.000 R / min y tomar el líquido claro para la determinación por Cromatografía líquida - espectrometría de masas en serie.

Precauciones

1)No cambie los pasos de operación en las instrucciones de operación casualmente. si necesita cambiar, Póngase en contacto con el Departamento Técnico de la empresa para confirmar si el cambio es razonable.

2)En los pasos de operación, las muestras pasan por la columna, se lavan y se eluyen, asegúrese de controlar el flujo de flujo, no demasiado rápido, de lo contrario los resultados de la prueba serán Bajos.

3) Este experimento minimiza el uso de envases de productos plásticos, especialmenteLos productos plásticos de pc, el agua experimental se utiliza en la medida de lo posible para colocar la cristalería para destilar.

Lista de configuración de la columna de afinidad

Equipos y reactivos que deben prepararse