El efecto de muestreo del muestreador de microorganismos de aire se ve afectado por muchos factores, que deben controlarse de manera integral desde muchos aspectos, como el rendimiento del instrumento, las especificaciones de operación, las condiciones ambientales y el tratamiento de muestras. Los siguientes son los factores clave de influencia y análisis:

I. rendimiento del propio instrumento

Precisión del flujo de muestreo

Efectos: el caudal demasiado alto o demasiado bajo puede causar una desviación del volumen de muestreo, lo que afecta directamente al cálculo de la concentración microbiana (por ejemplo, la unidad formadora de colonias CFU / m3).

Ejemplo: si el caudal nominal es de 28,3 L / min, pero el caudal real es bajo, se puede omitir la detección de microorganismos en entornos de baja concentración.

Contramedida: calibrar regularmente el flujo con un medidor de flujo de película de jabón para garantizar un error ≤ ± 5%.

Diseño de la cabeza de muestreo y apertura

Principio: el tamaño del agujero de la cabeza de muestreo determina el rango de tamaño de las partículas que pueden capturar microorganismos (por ejemplo, el muestreador de impacto depende del impacto inercial, cuanto menor sea el tamaño del agujero, menor será el tamaño de las partículas capturadas).

Riesgo: obstrucción del tamaño del agujero o diseño irrazonable puede causar una disminución de la eficiencia de la deposición microbiana de partículas grandes o la fuga de partículas pequeñas con el flujo de aire.

Mantenimiento: limpiar la cabeza de muestreo después de cada muestreo para evitar que las partículas residuales afecten el muestreo posterior.

Medio de recolección (medio de cultivo / membrana filtrante)

Selección del tipo: los diferentes microorganismos deben coincidir con medios específicos (como el Agar nutritivo para bacterias y el Agar de extracto de Malta para hongos), y la falla del medio o la desviación de la composición pueden causar omisiones.

Control de la humedad: el exceso de secado del medio de cultivo puede reducir la tasa de supervivencia microbiana, y el exceso de humedad puede conducir fácilmente a la difusión del líquido bacteriano y afectar el recuento de colonias.

Condiciones de almacenamiento: el medio de cultivo debe refrigerarse (2 a 8 ° c) para evitar la luz y el deterioro.

II. normas de funcionamiento y factores humanos

Altura y posición de muestreo

Diferencia ambiental: 0,5 a 1,5 metros del suelo es el cinturón respiratorio humano, que es la altura de muestreo convencional; Sin embargo, la Sala limpia debe tomar muestras por encima del plano de trabajo de acuerdo con las normas (como iso14644).

Evitar interferencias: mantenerse alejado de puertas, ventanas, respiraderos o áreas de movimiento frecuente de personas para evitar que las perturbaciones del flujo de aire provoquen muestras desiguales.

Tiempo y frecuencia de muestreo

Control de la duración: un tiempo de muestreo único demasiado largo puede causar secado del medio de cultivo o crecimiento excesivo del microorganismo (especialmente en ambientes de alta concentración), que debe ajustarse en función de la concentración estimada (por ejemplo, la baja concentración se puede extender a 30 minutos y la alta concentración se reduce a 10 minutos).

Repetibilidad: se deben tomar ≥ 3 muestras paralelas en la misma zona para reducir los errores accidentales.

Operación estéril

Riesgo de contaminación: la superficie del instrumento (como la cabeza de muestreo, la placa de petri) no se Desinfecta antes del muestreo, o la mano entra en contacto con el área de muestreo durante la operación, introduciendo microorganismos exógenos.

Proceso estandarizado: limpie la cabeza de muestreo con un 75% de alcohol, use guantes estériles y cambie rápidamente el medio de cultivo para evitar la exposición prolongada.

III. condiciones ambientales

Temperatura y humedad

Temperatura: las altas temperaturas (> 30 ° c) pueden acelerar el secado del medio de cultivo, y las bajas temperaturas ( < 10 ° c) pueden inhibir la actividad microbiana. se recomienda controlar la temperatura ambiente de muestreo en 15 a 25 ° c.

Humedad: la alta humedad (> 80% rh) puede causar fácilmente la propagación de colonias, y la baja humedad (> 30% rh) deshidrata y inactiva los microorganismos, con una humedad ideal del 40% al 60% rh.

Flujo de aire y presión atmosférica

Efectos turbulentos: las corrientes de aire fuertes (como los ventiladores y las salidas de aire acondicionado) pueden cambiar la distribución microbiana, lo que resulta en un muestreo desigual; El entorno de presión negativa (como el Gabinete de bioseguridad) debe ajustar el flujo de muestreo para compensar la diferencia de presión.

Corrección de la presión atmosférica: en zonas de alta altitud, es necesario convertir el volumen real de muestreo en función de la presión atmosférica (fórmula: volumen real = volumen nominal × (presión atmosférica local / presión atmosférica estándar).

Contaminación de fondo

Limpieza antes del muestreo: si el ambiente acaba de completar la desinfección (como la irradiación ultravioleta, la fumigación química), hay que esperar al menos 30 minutos para evitar que los residuos de desinfectante inhiban el crecimiento microbiano.

Contaminación cruzada: cuando se utilizan varios muestreadores al mismo tiempo, es necesario mantener una distancia de ≥ 1 metro para evitar que el flujo de aire de muestreo interfiera entre sí.

IV. transporte y tratamiento de muestras

Condiciones de transporte

Puntualidad: después del muestreo, se debe enviar para su inspección dentro de las 2 horas, si se retrasa, se debe refrigerar (2 a 8 ° c), pero las muestras de hongos deben conservarse a temperatura ambiente (para evitar la inhibición del crecimiento a baja temperatura).

Protección antisísmica: evitar vibraciones violentas durante el transporte y evitar el desplazamiento de colonias debido a la colisión entre el medio de cultivo y la cabeza de muestreo.

Condiciones de cultivo

Temperatura y tiempo: las bacterias generalmente se cultivan a 35 a 37 ° C durante 48 horas, y los hongos se cultivan a 25 a 28 ° C durante 5 a 7 días. la falta de tiempo puede conducir a la formación incompleta de colonias.

Ambiente aeróbico / anaeróbico: Algunos microorganismos requieren un ambiente gaseoso específico (como una incubadora de co2), y el incumplimiento de las condiciones puede causar omisiones.

V. otros factores

Características microbianas

Distribución del tamaño de las partículas: la mayoría de los microorganismos del aire existen en forma de aerosoles (tamaño de las partículas de 0,1 a 10 micras), y la eficiencia de captura de diferentes tamaños de partículas por diferentes muestreadores es diferente (por ejemplo, los muestreadores de impacto de agujeros de tamiz de seis etapas pueden separar microorganismos de diferentes tamaños de partículas).

Viabilidad: ciertos microorganismos (como virus, esporas) requieren un tratamiento especial (como la inactivación inmediata después del muestreo o el uso de medios mejorados nutricionalmente).

Ciclo de calibración y mantenimiento

Verificación periódica: calibrar completamente el instrumento (flujo, eficiencia de la cabeza de muestreo, rendimiento del medio de cultivo) al menos cada seis meses, y comprobar la estanqueidad del camino de gas después de un uso a largo plazo.

Al controlar sistemáticamente los factores anteriores, se puede mejorar significativamente la precisión y fiabilidad del muestreo de microorganismos del aire y proporcionar un soporte de datos eficaz para el monitoreo ambiental (como hospitales, fábricas de alimentos, laboratorios).