En el proceso de muestreo de microorganismos, la contaminación cruzada puede deberse a la contaminación mutua entre residuos de equipos, operaciones de personal, microorganismos ambientales o muestras, y se deben implementar estrictas medidas de prevención de la contaminación desde todo el proceso. Las siguientes son las guías de operación estandarizadas y los puntos técnicos de los escenarios:
I. esterilización de equipos y consumibles antes del muestreo
1. especificaciones de esterilización de hardware
Dispositivos reutilizables:
Cabeza de muestreo de metal (como muestreador de impacto): esterilización a vapor a alta presión a 121 ° C durante 20 minutos (gb / t38512 - 2020), o uso de 70% de etanol + quema de llama (adecuado para el tratamiento de emergencia in situ).
Componentes plásticos (como tuberías de bomba de muestreo): remojar en ácido peracético al 0,1% durante 30 minutos, enjuagar con agua estéril tres veces y secar para irradiar ultravioleta (254 nm, ≥ 30 minutos).
Consumibles desechables:
Las placas de petri, las bolsas de muestreo, etc., deben seleccionar productos esterilizados por irradiación (irradiación de cobalto - 60, dosis ≥ 25 kgy), y comprobar la integridad del embalaje antes de abrir el sello (estándar iso11607 - 1).
2. verificación del efecto de esterilización
Después de cada esterilización, se realiza un monitoreo biológico: se colocan tiras de esporas de bacillus stearotófila atcc7953, se cultivan después de la esterilización (56 ° c, 48 horas) y el número de colonias debe ser 0 (gb8599 - 2021).
II. sistema operativo de prevención de la contaminación en el sitio de muestreo
1. directrices de operación aséptica para el personal
Requisitos de protección de tercer nivel:
Ambiente general: Use ropa experimental desechable + guantes médicos (como guantes de nitrilo) y limpie la superficie de los guantes con un 75% de etanol antes de tomar muestras.
Entornos de alto riesgo (como muestras clínicas): es necesario usar ropa de aislamiento estéril + gafas + guantes dobles y reemplazar los guantes exteriores cada vez que se toma una muestra.
Código de acción:
Al tomar muestras, evite que el brazo cruce por encima de la boca de muestreo, mantenga la cabeza de muestreo a ≥ 30 cm del cuerpo y la dirección de succión en un ángulo de 90 ° con la boca de muestreo.
Está prohibido ordenar el cabello y tocar la cara en el área de muestreo. si es necesario ajustar el equipo, primero debe cambiar los guantes o desinfectar las manos.
2. zonificación espacial y control del flujo de aire
División del área de muestreo:
Se establece una zona de operación estéril de 50 cm x 50 cm, Se pulveriza la Mesa con etanol al 75% para formar una zona de desinfección, y el muestreador se coloca en el Centro de la Zona.
Los escenarios de alta limpieza (como las salas limpias de nivel iso5) deben operar en una mesa de trabajo laminar (velocidad del viento de 0,36 - 0,54 M / s) o en un Gabinete de bioseguridad (nivel BSC - ii).
Control de interferencia de flujo de aire:
Cierre las puertas y ventanas antes de tomar muestras, detenga el sistema de aire acondicionado durante 10 minutos (evite que el flujo de aire lleve microorganismos exógenos) y controle el Movimiento de las personas a 1 metro de distancia.
III. medidas de aislamiento en el proceso de recolección de muestras
1. esquema de prevención de cruces de muestreo por lotes
Desinfección del intervalo de lotes:
Después de completar cada muestra, limpie la carcasa del muestreador, el puerto de muestreo y la Mesa de operación con un 75% de etanol, y luego realice la siguiente muestra después de 5 minutos de Acción.
Si se toman diferentes tipos de muestras (como muestras ambientales y muestras clínicas), es necesario reemplazar todo el conjunto de cabezas y tuberías de muestreo para evitar la confusión de microorganismos residuales.
2. técnicas de aislamiento para muestras especiales
Tratamiento de muestras de alta concentración:
Al tratar muestras de alta carga, como aguas residuales y heces, se utiliza un muestreador con filtro de presión negativa (como miliparez - pak), y el filtro se sella inmediatamente después del muestreo para evitar la difusión de aerosoles.
Muestreo de bacterias patógenas:
Se utiliza una cabeza de muestreo de bioseguridad (como un muestreador cerrado con filtración hepa), y después del muestreo se coloca en un tanque metálico a prueba de fugas (la capa Interior está cubierta con papel absorbente de agua + solución de hipoclorito de sodio al 0,5%).