Lo compartí con todos hace algún tiempo.PCRControl del proceso de reacciónVen a hablar hoy.PCRTécnicas de operación. Se puede decir que la práctica es todoPCREl eslabón más fácil de ignorar pero crucial del proceso experimental.
A continuación, XiaoBian compartirá algunas de sus experiencias originales, que solo representan opiniones personales.
Primero hablemos de la configuración del sistema (los componentes están separados, no premezclados). Antes de la configuración, se calcula el volumen de cada componente necesario, y después de la configuración unificada, se realiza el embalaje. Algunos estudiantes pueden sentirse angustiados por los reactivos y amar solo el método de configuración de un solo agujero....... Pero para los experimentos, obtener resultados efectivos sin problemas a la vez es el mayor ahorro. Al configurar el sistema, preste atención al orden de adición de cada componente: primero agregue DdH2O,El resto de los componentes se añaden en orden de tamaño. Al descargar el líquido, la cabeza de succión se inserta por debajo de la superficie del líquido para descargar el líquido.Después de descargar el líquido, está estrictamente prohibido absorber y lavar repetidamente la cabeza de la pistola (los primeros, las enzimas y las plantillas deben prestar especial atención). la cabeza de succión tiene cierta adsorción. después de que el líquido se expulsa, si la rama del equipo de lavado húmedo original es atraída de nuevo a la cabeza de succión, después de tres o cinco lavado húmedo, puede causar una grave pérdida del componente objetivo. Si desea transferir completamente los componentes de la cabeza de succión, cambie de posición para humedecer la cabeza de succión. También hay que tener cuidado con la mezcla del sistema, que se puede soplar lentamente con un pipeta de rango adecuado.5-10Dos veces, también se puede invertir lentamente hacia arriba y hacia abajo para mezclar bien; Si es necesario mezclar con un Oscilador de vórtice, la velocidad se controla en la medida de lo posible.600rpmA continuación, si la velocidad de rotación es demasiado rápida, el daño a la enzima es mayor, y la diferencia entre si la curva de la plantilla de baja copia despegará será más obvia. El sistema se empaqueta enpcrEn el tubo de reacción, el pipeta se mantieneLa operación de "aspirar una docena" no es fácil de generar burbujas de aire.
Además del entorno experimental. Es común configurar el sistema de reacción en la Mesa de trabajo súper limpia y agregar plantillas en el Gabinete de bioseguridad. En la plataforma súper limpia, no habrá muchos problemas de acuerdo con la operación convencional; El Gabinete de bioseguridad es la zona más afectada por la contaminación por aerosoles. Los aerosoles en el Gabinete de bioseguridad provienen principalmente de la cabeza de desecho después de agregar muestras. en el Gabinete de bioseguridad, el aire circulante es el principal. la plantilla residual en la cabeza de desecho puede impregnar fácilmente el entorno interno de todo el Gabinete de Seguridad con el aire circulante, por lo que es necesario empacar la cabeza de desecho a tiempo para sacar el Gabinete de Seguridad después de cada experimento. Especialmente en caso de que no se complete todo el experimento al mediodía y se continúe explotando el hígado por la tarde, asegúrese de limpiar la cabeza de la pistola abandonada en el bote de basura y limpiar después de la radiación ultravioleta si nadie la usa. La limpieza de la encimera y la eliminación ultravioleta después del experimento son operaciones básicas, pero deben implementarse efectivamente.
Finalmente, comparta cómo funciona el experimento de agujeros compuestos para mejorar la formación de haces de la curva. Al configurar los agujeros de reacción, se puede mezclar la plantilla y el sistema de todos los agujeros de reacción con referencia al funcionamiento del sistema de configuración unificado, y luego empacarlos uno por uno. Esto puede reducir efectivamente el riesgo de saltos. Si se trata de una amplificación de copia baja..Ctvalor33En el futuro, cuando la curva despegue, no se recomienda mezclar la plantilla en el sistema de reacción y luego empacarla. en este momento, es más seguro agregar la plantilla agujero por agujero (el impacto de la distribución de amarre es obvio).
¿¿ se siente terrible en este momento y no puede esperar para experimentar? No te preocupes, si quieres hacer bien tus cosas, primero debes beneficiar tus armas. Baiheng Technology se centraPCRMedidor16Año, puede proporcionarle todo tipo de gradientesPCRInstrumento yQPCR¡Yi, ¡ ayuda a su investigación!
