La columna de extracción en fase sólida es una herramienta clave para el preprocesamiento de muestras de laboratorio, pero a menudo se enfrenta a muchos desafíos de falla durante su operación. Las siguientes son las clasificaciones de fallas comunes y las soluciones específicas:
I. el problema de la baja tasa de recuperación
Reserva insuficiente de objetos objetivo
Fenómeno: el experimento de etiquetado en blanco muestra que los residuos de objetos objetivo en la muestra / elución superior al 5%.
Causas: selección inadecuada de la columna SPE (por ejemplo, desajuste de polar), llenado desigual o envejecimiento del relleno, pH no ajustado de la solución de la muestra, lo que resulta en una disociación anormal del objetivo.
Solución: reemplazar adsorbentes más selectivos; Optimizar el pH de la muestra; Asegúrese de que el proceso de activación esté estandarizado.
Elución incompleta
Fenómeno: la concentración objetivo en el eluyente es inferior al valor teórico, y no ha mejorado después de aumentar el volumen de elución.
Causas: resistencia insuficiente del disolvente de elución, volumen de elución demasiado pequeño o adsorción irreversible entre el objeto objetivo y el relleno.
Solución: cambiar a un eluyente más polar; La elución por etapas mejora la eficiencia; Reemplazar el relleno hidrofóbico débil.
2. mala reproducibilidad y disminución de la precisión
Factores operativos
El caudal está fuera de control: el caudal superior a 1 ml / MIN puede causar una transferencia de masa insuficiente, por lo que es necesario controlar estrictamente la activación y el caudal en la etapa de muestra ≤ 2 ml / min.
Secado de la columna: después del pretratamiento, el relleno no se muestra a tiempo para exponer el aire, se debe reactivar y evitar el secado.
Interferencia matricial
Fluctuación de la intensidad iónica / ph: las muestras complejas deben agregar sal tampón para mantener la estabilidad del sistema e inhibir la absorción competitiva de impurezas.
Interferencia de salida común: se utiliza la elución de gradiente para establecer una curva de elución para separar con precisión el objetivo y las impurezas.
3. el efecto de purificación no es bueno
Baja tasa de eliminación de impurezas
Selección incorrecta del modo: se da prioridad al modo de purificación que conserva el objeto objetivo, y su selectividad exclusiva es mejor que el modo que conserva las impurezas.
Inactivación del relleno: la columna se activa sin un agente de elución fuerte, lo que resulta en residuos de impurezas. Al activar, es necesario lavar la columna de fase inversa con metanol puro.
Efecto alcohólico hidrofílico de silicio
Manifestación: la Unión de compuestos alcalinos con grupos hidroxi de silicio residual causa arrastre de cola.
Respuesta: ajustar el pH del eluyente al ácido o agregar reactivos de Amina competitivos para bloquear la Unión al hidrógeno.
IV. anomalías de la velocidad de flujo y bloqueo de la columna
Bloqueo físico
Contaminación por partículas: las muestras contienen partículas solubles y requieren pretratamiento por centrifugación o filtración.
Viscosidad demasiado alta: la muestra diluida reduce la resistencia al flujo.
Defectos de llenado
Burbujas / grietas: la altura de la cama de relleno es anormal y el relleno debe reinstalarse.
V. fallos en el funcionamiento del equipo
Presión anormal
Alarma de alta presión: debido a la obstrucción de la tubería o la suciedad del filtro de salida, se debe detener la máquina para limpiar.
Fugas de baja presión: compruebe el desgaste del anillo de sellado y reemplace el componente de sellado a tiempo.
Fallo del sistema de control
Error del software: reiniciar el dispositivo y actualizar el firmware; Si no es válido, Póngase en contacto con el fabricante para reparar la placa de circuito.
El diagnóstico de fallas de la columna de extracción en fase sólida debe combinarse con fenómenos experimentales e investigación sistemática. El mantenimiento regular (como el reemplazo de almohadillas y la limpieza de tuberías de revestimiento) puede reducir significativamente la tasa de falla. Para problemas complejos, se recomienda consultar la Guía de código de error del Manual del equipo o utilizar una estrategia de serie de dos columnas para verificar la eficiencia de la separación.