La formulación de anticuerpos biológicos es la base para garantizar la estabilización de la producción, almacenamiento y transporte de productos. El proceso de desarrollo de la fórmula requiere el uso de métodos de alto rendimiento para seleccionar de manera confiable y rápida un gran número de condiciones de fórmula para determinar * buenas preparaciones y "buenas condiciones". Un método ampliamente utilizado es hacer pruebas de desnaturalización térmica y deducir parámetros relacionados, como Tm y tonset, para clasificar las condiciones de la fórmula y el efecto estable de los accesorios.

Las técnicas tradicionales de desnaturalización térmica sin etiqueta están limitadas por el flujo, como la concentración de muestras, el volumen, el costo de los consumibles y la velocidad de medición, lo que hace que el proceso de selección final de fórmulas con cientos de condiciones potenciales se convierta en un desafío.

En este informe mostraremos el uso del instrumento supr - DSF para analizar y seleccionar la fórmula de trazozumab en 96 condiciones diferentes basadas en el parámetro de desnaturalización térmica, y al seleccionar el estabilizador, los resultados obtenidos son consistentes con los obtenidos por el método dsc, que también se ha comercializado para el fármaco dirigido al herceptin. El cribado de la fórmula se realizó en una placa microporosa de 384 agujeros y se obtuvieron todos los resultados en menos de 1,5 horas. Este cribado de flujo de sonido se puede integrar en un sistema de automatización de laboratorio, logrando la selección de miles de muestras al día.

Resultados:

Las curvas de desnaturalización medidas (las figuras 1 y 2 son ejemplos) muestran dos procesos de desnaturalización independientes. Los datos de desnaturalización se ajustaron mediante el modelo estándar de tres Estados [1] mediante el ajuste de multiplicación de dos pequeños, y se determinaron los valores de tm, van beehoff (△ h) y tonset, que se yuxtaponieron en la tabla 1.

La tabla también enumera los accesorios seleccionados para mejorar la estabilidad de los anticuerpos. Los resultados experimentales obtenidos a partir del modelo de tres Estados son consistentes con los datos DSC de Trastuzumab [2] y se reportaron dos valores de TMN cerca de 700c y 82oc. Teniendo en cuenta los cambios en la muestra y el disolvente, el valor de Tm es consistente con el valor reportado por la base [2].

Además de valores similares de tm, los datos de supr - DSF confirman que la Histidina y los dihidratos de Trehalosa no obstaculizan ni mejoran la estabilidad conformacional de los anticuerpos monoclonales de quyaozumab, que son los componentes de fórmula contenidos en * hehanting [3]. Estos dos puntos ayudan a demostrar la consistencia de las mediciones de supr - DSF y la capacidad de las pruebas de alto rendimiento.