Nistmab es un Anticuerpo monoclonal ampliamente caracterizado diseñado para ser utilizado como muestra estándar en el desarrollo de nuevas tecnologías para la caracterización de proteínas. En esta literatura aplicada, utilizamos supr - DSF para obtener la enseñanza del método de fluorescencia de escaneo diferencial DSE de nistmab, y los resultados de kailuo se comparan con el método de escaneo térmico de shoushi dso. El supr - DSE resuelve todos los dos dominios de nstab: ch2 (690c.ch3 (830 +) y FAB (94oc) con alto grado de vapor especial de solución [1]. Además, los valores de Tm medidos fueron consistentes con los reportados en la literatura. Estos resultados demuestran que la aplicación de supr - DSF puede obtener fácilmente información de alta calidad sobre la estabilidad de las proteínas.

Conclusiones:

El supr - DSF de Protein Table puede medir la temperatura de la cadena de resolución de manera rápida y precisa detectando el desplazamiento del pico de la fluorescencia endógena de la proteína. Los resultados muestran que supr - DSF puede obtener una temperatura precisa de desbloqueo, incluida una temperatura de desbloqueo súper alta como el dominio FAB (94 0c). Esto también verifica que el supr - DSF basado en el método de fluorescencia endógena puede obtener resultados consistentes con el dsc. La ventaja del uso de 384 placas de agujero para la prueba es aumentar el flujo, aumentar la conveniencia y reducir el consumo de muestras.

Método:

Nistmab, con una concentración de 1 mg / ml, se preparó en una solución intermedia lenta de l - Histidina de pH 6 y se agregó a una placa microporosa lpcr de 384 agujeros, con una dosis de 104l por agujero. después del empaquetado, la placa microporosa se centrifuga durante 60 segundos y se sella con una película de pegamento transparente. El programa de mezcla ascendente continua en el supr - DSF se configura para medir los canales de fluorescencia de 150c a 105oc a una tasa de calentamiento de 10c por minuto, y los datos obtenidos por el espectro de fluorescencia se procesan mediante el método BCM y se cuantifica el desplazamiento espectral. Los datos del BCM se procesan en función de la temperatura y se convierten en derivados de primer orden para su análisis. La temperatura de la cadena de solución se calcula de acuerdo con el pico de la derivada. Los métodos y resultados de todas las muestras están disponibles.