En el mundo microscópico de los códigos de vida, un equipo de precisión llamado electrocardiógrafo de nivel de agarosa del 1 de junio, con su capacidad de separación estable y confiable, está ayudando a los investigadores científicos a interpretar la información molecular del ADN y el arn. Como uno de los equipos básicos del laboratorio de biología molecular, el electrocardiógrafo de nivel de agarosa asume la importante tarea de aislar e identificar moléculas de ácido nucleico.

01 cómo funciona: la danza molecular en un campo eléctrico

El principio central del electrocardiógrafo de nivel de agarosa se basa en la sinergia entre el efecto de carga y el efecto de tamiz molecular. Las moléculas de ácido nucleico (adn / arn) llevan cargas negativas en soluciones por encima de sus puntos isoeléctricos, que se mueven hacia el ánodo cuando se colocan en un campo eléctrico.

La estructura de malla tridimensional formada por gel de agarosa actúa como un "tamiz molecular". Bajo la acción de un campo eléctrico, las tasas de migración de moléculas de ácido nucleico de diferentes tamaños en los poros del gel son diferentes: las moléculas más pequeñas se mueven más rápido y las moléculas más grandes se mueven más lentamente.

Este efecto de separación permite a los investigadores juzgar el tamaño molecular de los fragmentos de ácido nucleico en función de su posición sobre el gel y determinar el peso molecular de la muestra a medir comparando con estándares conocidos, y la velocidad de migración es inversamente proporcional al peso molecular relativo.

02 diseño del instrumento:

El medidor de CE de nivel de agarosa del 1 de junio incorpora una serie de innovaciones prácticas en el diseño. Su diseño de puente ahorra efectivamente la cantidad de amortiguador y, al mismo tiempo, garantiza una distribución uniforme del campo eléctrico. El diseño de agujero abierto de la cubierta superior transparente no sólo facilita la disipación de calor, sino que también facilita la observación en tiempo real de la situación de la electrorregulación durante el experimento.

El sistema de electrodos es el componente central del electrocardiógrafo. el producto 61 utiliza alambre de electrodo de platino con una pureza ≥ 99,95%, lo que garantiza una excelente conductividad eléctrica y durabilidad. El estante de electrodos está diseñado para ser desmontable, lo que facilita la limpieza y el mantenimiento y prolonga la vida útil del equipo.

En términos de rendimiento de seguridad, el electrocardiógrafo 61 está equipado con un cable de alta flexibilidad y tenacidad y un diseño de Seguridad de corte de energía con tapa abierta para garantizar la seguridad de la operación. La bandeja de gel tiene una regla fluorescente para facilitar la observación y el registro de los resultados. La carcasa está moldeada por inyección de policarbonato, resistente a altas temperaturas y sin deformación, sin riesgo de fuga.

03 serie de productos y parámetros técnicos

Se proporcionan una variedad de modelos de electrocardiógrafos de nivel de agarosa para satisfacer diferentes necesidades experimentales. El tamaño exterior del tipo dycp - 31cn es de 260 × 116 × 76mm, el tamaño de la placa de gel es de 100 × 70mm o 50 × 70mm, y la capacidad total del amortiguador es de aproximadamente 260ml.

El tipo dycp - 31dn es más rico en funciones y puede hacer cuatro geles de diferentes tamaños: 120 × 120mm (pegamento grande), 120 × 60mm (pegamento ancho), 60 × 120mm (pegamento largo) y 60 × 60mm (pegamento pequeño). Esta selección de múltiples dimensiones le permite adaptarse a diversas necesidades de muestra.

El tipo dycp - 32a es un electrocardiógrafo de tamaño medio, con una dimensión exterior de 300 × 162 × 110mm, una especificación de placa de gel de 160 × 100 mm y una capacidad total de amortiguación de 650ml. este modelo utiliza electrodos de platino y electrodos simétricos, con una distancia entre los electrodos fija de 10cm, que puede producir una tensión de corriente continua estable de 0 - 150v, y un error de uniformidad de la intensidad del campo eléctrico ≤ 5%, lo que garantiza una separación clara de las tiras.

04 proceso de operación: de la fabricación de pegamento a la imagen

El proceso de operación del analizador de nivel de agarosa comienza con la preparación de gel. En primer lugar, se llama tomar una cantidad adecuada de polvo de agarosa y añadir el amortiguador de fluorescencia (generalmente Tae o tbe), calentarlo y disolverlo y enfriarlo a 50 - 60 grados celsius, verterlo en el molde de fabricación de pegamento e introducirlo en el peine.

Después de la coagulación del gel, se retira el peine para formar un agujero de muestra. Al sacar el peine, se debe prestar atención a inclinarse suavemente y sacar un lado, y luego sacarlo en su conjunto para evitar destruir el agujero de muestra. Coloque el gel en la ranura de gel, agregue un amortiguador para sumergirlo, y la superficie del líquido debe ser 1 - 2 mm más alta que la superficie del gel.

A continuación, la preparación y adición de muestras. Después de mezclar la muestra de ácido nucleico con el amortiguador de la muestra superior, se agrega el agujero de muestra con un micropipeta. La glicerina o la sacarosa en el amortiguador de la muestra anterior aumentan la densidad de la muestra, de modo que la muestra se hunde en el Fondo del agujero de la muestra; Los tintes trazadores, como el azul bromofenólico, se utilizan para indicar el proceso de digestión.

La configuración de los parámetros de CE debe ajustarse de acuerdo con las necesidades experimentales. Por lo general, el voltaje se establece en 5 - 10v / CM (longitud del gel) y el tiempo de inmersión es de 30 - 120 minutos. Al conectar la fuente de alimentación, se debe prestar atención a la Polar del electrodo: el extremo del agujero de muestra está conectado al polo negativo y el otro extremo está conectado al Polo positivo.

Por último, la observación y el análisis de los resultados. Una vez finalizada la electrolisis, el gel debe ser teñido con tintes de ácido nucleico, como EB o sybrgreen, y luego observado y fotografiado bajo el sistema de imágenes de gel ultravioleta. Al comparar con el marcador de ADN / arn, se puede determinar el tamaño y el contenido del fragmento de ácido nucleico de la muestra.

05 escenarios de aplicación: herramientas básicas en múltiples campos

En la investigación genómica, el analizador de nivel de agarosa 611 se utiliza para aislar e identificar fragmentos de adn, revelando la estructura y función del genoma. El campo del diagnóstico clínico también es inseparable de esta herramienta. A través de la espectrometría de agarosa en muestras de suero y orina, se pueden detectar marcadores de enfermedad de manera rápida y precisa y mejorar la tasa de diagnóstico temprano de la enfermedad. En los experimentos de clonación genética y construcción de vectores, modelos como dycp - 32a pueden verificar la eficiencia de la enzima y la integridad del producto, garantizar la tasa de éxito de los experimentos de conexión y transformación posteriores, y son los "guardianes" de los experimentos de clonación genética. En el campo de la enseñanza, la conveniencia de la operación y la estabilidad de los resultados del electrocardiógrafo del 1 de junio lo convierten en una opción ideal para los cursos experimentales de biología molecular en colegios y universidades, ayudando a los estudiantes a dominar los principios y técnicas experimentales de electrocardiografía.