¿I. ¿ qué significa radioinmunidad?

La radioinmunidad es La combinación de "etiquetado de radionucleidos" y "respuesta inmune".

²Inmunidad:Se refiere al uso de antígenos y anticuerpos entreRespuesta de unión altamente específica. Al igual que una llave solo puede abrir una cerradura, un anticuerpo generalmente solo reconoce y se une a un antígeno específico (por probar).

²Radiación:Se refiere al uso放射性同位素(como el yodo que mencionó- 125) como "marca" o "etiqueta", proporciona una señal para la respuesta inmune que puede ser detectada por una alta sensibilidad.

En pocas palabras,El radioinmunoanálisis es usar materiales radiactivos cuando"Marcador luminoso" para rastrear y medir cantidades extremadamente pequeñas de sustancias objetivo en la respuesta inmune.

Sus dos principales ramas son:

1. radioinmunoanálisis: se marca el antígeno.

2. inmunoanálisis: los anticuerpos están marcados.

(el texto posterior explicará en detalle la diferencia)

II. principios básicos de trabajo: análisis de la combinación competitiva

En el caso del radioinmunoanálisis clásico, su idea central es "Competencia".

Imagina una escena:

²Número fijo"Asiento": añadir un número limitado de anticuerpos específicos de la aguja al sistema de reacción (fijados a la pared del tubo de ensayo o partículas).

²dos"Competidor":

²Cantidad conocida"Competidor etiquetado": antígeno marcado con radioisótopos (como I - 125) con la misma estructura que el objeto a medir. Es radiactivo.

²Cantidad desconocida"Competidor sin etiqueta": el antígeno real a probar en la muestra (como una hormona en la sangre del paciente). No es radiactivo.

²Reglas de la competencia: los antígenos marcados y los antígenos a detectar se unen competitivamente a esa cantidad limitada de anticuerpos"Asiento".

Lógica clave (relación de retroceso):

²Si la concentración de antígenos a detectar en la muestra es alta, lo hará."Robar" la mayoría de los asientos de anticuerpos.

²Resultado: menos antígenos marcados que pueden unirse a los anticuerpos.

²Finalmente, al medir la intensidad de la radiactividad unida a los anticuerpos, se puede calcular la concentración del antígeno a detectar en la muestra en sentido inverso.

²Cuanto más fuerte sea la radiactividad medida, más antígenos marcados se unen, lo que significa que menos antígenos están pendientes en la muestra. Y viceversa.

Este proceso se puede mostrar intuitivamente con la siguiente imagen:

III. pasos clave y papel del equipo

1. incubación y competencia:Las muestras, los antígenos marcados y los anticuerpos se mezclan y se incuban en ciertas condiciones para que la respuesta competitiva se lleve a cabo plenamente.

2. separación:Este es el paso más crítico. Después de la reacción, es necesarioParte y no ligada a anticuerpos(libre)ParteSeparados. Los métodos comunes de separación son: centrifugación (utilizando partículas magnéticas o anticuerpos secundarios envueltos en anticuerpos), adsorción, filtración, etc.

3. medición:Poner la parte combinada (o la parte libre, generalmente la parte combinada de medición) enContador inmunológico gammaMedio.

²Los instrumentos detectan isótopos marcados (por ejemploI - 125) emite rayos gamma y da una tasa de conteo.

²Existe una relación inversa entre la intensidad de la radiactividad y la concentración del antígeno a medir en la muestra.

4. cuantificación:Mediante la medición simultánea de una serie de concentraciones conocidasProductos estándarSe puede dibujar una barraCurva estándar(con intensidad radiactivaEje y, la concentración estándar es el eje x). La concentración precisa de muestras desconocidas se puede calcular sustituyendo la intensidad radiactiva medida por la curva.

4,La diferencia entre Ria e Irma

²La RIA:Como se mencionó anteriormente, el antígeno marcado adopta la Ley de competencia. Adecuado para la detección de antígenos de moléculas pequeñas (como hormonas, medicamentos).

²IRMA:Anticuerpos marcados, con Ley no competitiva (o"Método sándwich").

²Uso excesivo de anticuerpos marcados, directo"Capturar" los antígenos de la muestra y formar un complejo de "anticuerpos - antígenos - anticuerpos marcados".

²MediciónLa intensidad de la radiactividad medida es proporcional a la concentración del antígeno a medir.(cuanto más antígenos, más complejos se forman, más fuerte es la radiactividad).

²La sensibilidad suele ser mayor y es adecuada para proteínas macromoleculares.

Resumen y significado

La esencia del principio del radioinmunoanálisis es:

Uso de radionucleidos para proporcionar señales de detección de sensibilidad súper alta, uso de antígenos- la Unión específica de los anticuerpos permite un reconocimiento preciso y, a través de diseños competitivos o sándwich, convierte concentraciones biomoleculares difíciles de medir en señales físicas radiactivas que se pueden contar con precisión.

EnA mediados y finales del siglo xx, midió la sangre y los fluidos corporales.Sustancias extremadamente trazas(por ejemplo, hormonas, marcadores tumorales, antígenos virales)Estándar de oroCon una sensibilidad de hastaNivel Piqué. El contador inmunológico gamma al que se refiere es el equipo de medición central que nació para ello.

Aunque muchas pruebas se han vuelto más seguras y rápidas hoy en díaMétodos inmunológicos no radiactivos(como la quimioluminiscencia, la inmunidad fluorescente) se reemplaza, pero el principio de la radioinmunidad es la piedra angular de todas las técnicas modernas de análisis cuantitativo inmunológico, y sus ideas de diseño todavía tienen un profundo impacto.En el campo del diagnóstico in vitro.

Para preguntas técnicas sobre el técnico de rayos gamma, consulte Genesys China agent: Beijing Dongfang Yuantong Technology Development co., Ltd. asesor técnico