Columna de tskgel Protein a - 5pw

Columna de tskgel Protein a - 5pw

La columna de tskgel Protein a - 5pw está diseñada para la separación rápida y la cuantificación precisa de una variedad de anticuerpos. Los anticuerpos monoclonales fueron capturados y precisos del medio de cultivo celular cosechado, y cada análisis de muestra se puede completar en menos de 2 minutos. La columna puede realizar más de 2000 análisis de inyección de muestras sin regeneración o limpieza.

La columna de tskgel Protein a - 5pw está rellena con cuentas de polímero de metacrilato hidroxiado de alto grado de intersección, lo que permite el uso de altos caudales en análisis cromatográficos, manteniendo al mismo tiempo la eficiencia, el ancho de pico y la separación de la cromatografía. Su ligando a de proteína recombinante es un hexamer de dominio C modificado por el codón. Este ligando a de proteína recombinante mejorada se une a las microesferas de matriz tskgel 5pw a través de la adhesión multipunto, lo que tiene una excelente estabilidad en una solución de NaOH de 0,1 MOL / L.

La columna de tskgel Protein a - 5pw tiene un amplio rango de dosis de muestra superior, que puede determinar con precisión el título de los anticuerpos monoclonales en diferentes etapas del tratamiento del medio de cultivo celular. Su bajo nivel de tasa de desprendimiento de proteína a lo convierte en una opción ideal para la purificación de anticuerpos monoclonales a pequeña escala para la caracterización preliminar.

Tskgel Protein a - 5pw es una columna de afinidad (afc) que introduce el grupo funcional recombinante Protein a en la superficie del relleno tskgel g5000pw de una matriz de polímero hidrofílico poroso y lo llena en el tubo de columna peek.

Debido a que Protein a puede unirse específicamente a la región FC de igg, Protein a puede adsorber y separar específicamente IgG de muestras como el caldo de cultivo celular que contiene IgG e impurezas. Además, la calibración se realiza con concentraciones conocidas de IgG

Curva que permite cuantificar la concentración de IgG en muestras desconocidas.

El método de Unión de matriz, grupo funcional y grupo funcional de la columna de tskgel Protein a - 5pw es el mismo que el relleno a granel toyopearl AF - rprotein a HC - 650f. Por lo tanto, esta columna tiene un rendimiento de selección de separación similar al toyopearl AF - rprotein a HC - 650f.

Debido al gran tamaño de las partículas y la alta resistencia mecánica de la matriz, la columna se puede utilizar en condiciones de alto flujo o para el análisis de alto rendimiento de igg. Además, debido a que el efecto de hinchazón del relleno causado por el cambio del disolvente es relativamente pequeño, se puede agregar a la fase móvil.

Añadir disolvente orgánico.

Además, la columna también utiliza grupos funcionales con alta estabilidad química y resistencia a los álcalis, por lo que se puede limpiar con solución de agua naoh. Al limpiar la columna con solución de agua naoh, inyecte 0,1 MOL / L de solución de agua NaOH 0,5 de la válvula de inyección.

de 2 ml.

2 - 2. Condiciones de separación estándar

La mayoría de los IgG son adsorbidos por Protein a en condiciones neutras (ph 7,0 a 7,5) y eluidos en condiciones ácidas (ph 2,5 a 3,5), por lo que cuando se utilizan tskgel Protein a - 5pw para separar anticuerpos, generalmente se utilizan dos órdenes de soluciones con pH diferente.

Método de elución de gradiente escalonado.

Las fases móviles adsorbidas y eluidas generalmente utilizan amortiguadores de ácido fosfórico, pero las fases móviles también pueden usar amortiguadores de citrato de bajo Ph. Después de equilibrar previamente la columna con un amortiguador de adsorción (equilibrar con un amortiguador de más de 5 veces el volumen de la columna), se introduce la muestra.

Después, solo IgG se adsorbió en la columna. Después de eso, se cambia a una fase móvil para la elución y se eluye la igg.

Se pueden agregar altas concentraciones de sal en la fase móvil (como 0,15 MOL / L de nacl, etc.), pero IgG altamente hidrofóbico es propenso a la adsorción no específica en la columna, por lo que se debe prestar más atención a esto. Además, al analizar IgG altamente hidrofóbico, en

La adición de disolventes orgánicos solubles en agua como etanol o ácido an refinado (0,2 MOL / l) a la solución de equilibrio y elución puede inhibir eficazmente la adsorción no específica. Sin embargo, la situación anterior puede causar fluctuaciones en la base de referencia debido al cambio de fase móvil, por lo que antes de la inyección, por favor, haga más

Cambio de fase móvil y confirmación.

Ejemplo de fase móvil

Caso 1

Fase móvil a: 20 mmol / L tampón de fosfato de sodio, pH 7.4

Fase móvil b: 20 mmol / L tampón de fosfato de sodio, pH 2.5

Caso 2

Fase móvil a: tampón de fosfato de sodio de 20 mmol / l, pH 7,4 / etanol = 90 / 10 (v / v)

Fase móvil b: tampón de fosfato de sodio de 20 mmol / l, pH 2,5 / etanol = 90 / 10 (v / v)

Caso 3

Fase móvil a: 20 mmol / L tampón de fosfato de sodio, pH 7.4

Fase móvil b: 50 mmol / L de tampón de citrato de sodio, pH 2.5

La columna de afinidad de alto rendimiento tskgel Protein a - 5pw tiene una buena durabilidad y se puede limpiar con soluciones alcalinas, lo que es adecuado para la cuantificación rápida y de alta precisión de IgG en medios de cultivo celular que contienen más impurezas. Además, el rango cuantitativo de IgG es amplio y se puede utilizar para analizar muestras de baja concentración y muestras de alta concentración en la etapa inicial del cultivo.

Especificaciones del producto e información de pedido de tskgel Protein a - 5pw

Especificaciones técnicas

proyectoparámetro

Aperturade 100 nm

Tamaño de las partículas20 µm

Estabilidad del pH2.5 - 12

Límite de exclusión1.000 kDa

Base de emparejamientoProteína recombinante a (hexamer del dominio c)

Densidad de base de emparejamientoGel 0,9 - 1,0 g / L

Información de pedido

Número de producto (p / n)descripcióntamaño

0023483Columna de tskgel Protein a - 5pw4,6 mm de diámetro interior x 3,5 cm de longitud

Columna de tskgel Protein a - 5pw

Nantong hairuo Chemical co., Ltd.