Células de cáncer de mama humano sum159pt + Luc + GFP (tres negativas)

Células de cáncer de mama humano sum159pt + Luc + GFP (tres negativas)

Características celulares

Especies y géneros:Fuente humana..Homo sapiens(...)

Fuentes organizativas:乳腺（mama(...)

Enfermedad:Cáncer..Carcinoma(...)

edad: 71Años71 años(...)

Género:Mujeres..Mujer(...)

Tipo de célula:Células epidérmicasEpitelial(...)

Características de crecimiento:Crecimiento pegado a la pared..Adherente(...)

Contenido:>1x10^6Número de células

Especificaciones:T25Botellas o1 mlEmbalaje de tubo de almacenamiento congelado

Uso: solo para investigación científica.

Transporte y conservación

Transporte de hielo seco y reanimación de células vivas

（1(...)1 mlEmbalaje de almacenamiento congelado y transporte de hielo seco, después de la recepción-80Después de conservar durante la noche, el refrigerador se transfiere al nitrógeno líquido o se recupera directamente. si se encuentra que el hielo seco se ha volatilizado y limpio, la tapa del congelador se ha desprendido, se ha roto y las células están contaminadas, Póngase en contacto con nosotros de inmediato.

（2(...)T25Las células sobrevivientes de la reanimación de la botella se envían a temperatura ambiente y se operan de acuerdo con el método de tratamiento después de la recepción celular después de la recepción.

Tratamiento después de la recepción celular

1) después de recibir la célula,75%La pared de la botella desinfectante con alcoholT25Colocación de la botella37℃ la incubadora se coloca aproximadamente2-3hSi se encuentra que la botella de cultivo está rota, hay un derrame de líquido y las células están contaminadas, Póngase en contacto con nosotros a tiempo después de tomar una foto.

2) por favor, en4O5XConfirmar el Estado de la célula bajo el microscopio y tomar fotos de la célula recién recibida..10×,20×) cada uno2 - 3Se conservan una foto de la apariencia del frasco de cultivo como base para el Estado de la célula cuando se recibe después de la venta.

3) células adherentes: las células están en37Colocar en la incubadora2-3hBajo el microscopio, se observa el crecimiento y la adherencia de las células, y algunas células adheridas se desprenden y se agrupan debido a la vibración durante el transporte expreso. Si se observa la densidad de crecimiento celular bajo el espejo, si60%A continuación, se puede eliminar el medio de cultivo de infusión en el frasco de cultivo (si hay células no adheridas que necesitan ser recicladas por centrifugación, la suspensión pesada se introduce en el frasco de cultivo original),Añadir un medio de cultivo especial recién preparado6-8 ml, en una caja de cultivo celular para continuar el cultivo. Si la densidad de crecimiento celular alcanza70% - 80%Lo anterior permite el tratamiento de paso de las células. Durante el proceso de transmisión, si las células que se desprenden debido al transporte de vibraciones necesitan ser recicladas por centrifugación.

4Nota: el medio de cultivo utilizado para el transporte (medio de cultivo de infusión) ya no se puede utilizar para cultivar células, por favor, cambie por un medio de cultivo especial recién preparado de acuerdo con las condiciones de cultivo celular de las instrucciones para cultivar células. Recomendación para la primera transmisión después de recibir la célulaT25Botella de cultivo1:2De generación en generación.

I. preparación de los medios de cultivo y las condiciones de congelación del cultivo:

1(...)RPMI-1640Medio de cultivo+10% FBSSuero bovino fetal de alta calidad+1% P/SDoble resistencia

2(...) Condiciones de cultivo: fase gaseosa: aire,95%; dióxido de carbono,5%. temperatura:37Grados centígrados, la humedad de la incubadora es70% - 80%.

3(...) Liofilizado:90%Suero,10% de DMSOEstá disponible.

II. Tratamiento celular:

1(...) Recuperación de células congeladas:

Contendrá1 mlEl criotubo de la suspensión celular está en37Sacudir rápidamente y descongelar en un baño de agua, añadir a contiene4 - 6 ML especialLa mezcla es uniforme en el tubo centrífuga del medio de cultivo. En1000RPMCentrifugación en condiciones3-5 minutosDescartar el sobrenadante y suspender las células con un medio de cultivo especial. A continuación, se añade la suspensión celular al6 - 8 ML dedicadoEn el frasco (o placa de petri) del medio de cultivo37℃ cultivo durante la noche. Al día siguiente, se observó el crecimiento celular y la densidad celular bajo el microscopio.

2(...) Transmisión celular: si la densidad celular alcanza80% - 90%Se puede llevar a cabo el cultivo de generación en generación.

Para la transmisión de células adherentes, se pueden consultar los siguientes métodos:

1. Abandonar el sobrenadante de cultivo y usar iones de calcio y magnesio libresPBSHumedecer las células1 - 2Veces.

2. unirse0.25%..W / V) TripsinaEDTA de 0,53 mMEn la botella de cultivo..T25botella1-2 ml,T75botella2-3 ml), colocado en37Digestión en incubadora1 - 2Minutos (las células difíciles de digerir pueden prolongar adecuadamente el tiempo de digestión) y luego observar la digestión celular bajo un microscopio. si la mayoría de las células se redondean y se caen, se recuperan rápidamente de la Mesa de operaciones y se añaden después de golpear el frasco de cultivo varias veces.3-4 mlIncluyendo10% FBSEl medio de cultivo para terminar la digestión.

3. Después de mezclar suavemente, aspirar, en1000RPMCentrifugación en condiciones3-5 minutosAbandonar el líquido superior y reponer1-2 mlSoplar bien después del medio de cultivo. Presione la suspensión celular1:2La proporción se divide en NuevaT25En la botella, añadir6-8 mlNuevos medios de cultivo especiales configurados de acuerdo con los requisitos de las instrucciones para mantener la vitalidad del crecimiento celular, y la transmisión posterior se basa en la situación real.1: 2 a 1: 5La proporción se lleva a cabo.

3) Criopreservación celular:Después de recibir la célula se recomienda antes del cultivo3Se congeló un lote de semillas celulares para su uso experimental posterior.

Shanghai Yuchun Biotechnology co., Ltd. es una empresa tecnológica fundada conjuntamente por personas con excelentes antecedentes en Ciencias de la vida y biotecnología. La compañía se centra en productos de reactivos relacionados con células primarias, células tumorales y cultivo celular, proporcionando soporte técnico y servicios relevantes para universidades, alimentos, medicina, investigación biológica y otros campos.

Desde su creación, a través de la innovación científica y tecnológica continua y la investigación y el desarrollo de productos, la compañía ha proporcionado a los clientes productos celulares personalizados y soluciones completas de cultivo celular. a través de la exploración activa, la investigación y el desarrollo, la profundización y el enriquecimiento de productos, actualmente hay más de 200 tipos de productos de medios básicos, más de 300 tipos de líneas celulares y casi 600 tipos de células primarias. Siempre hemos estado impulsados por "desarrollar la Ciencia y la tecnología y cuidar la vida y la salud públicas", a través de la innovación tecnológica, hemos absorbido ampliamente talentos de alta tecnología, hemos multiplicado constantemente el sistema de productos, enriquecido la cadena de productos, ampliado activamente el mercado y ampliado el campo de aplicación, y hemos establecido una marca "pura lengua" con competitividad en el mercado.

Precauciones

1. para su seguridad y salud, Use ropa experimental y guantes y máscaras desechables para operar;

2. para mantener el excelente efecto de uso de este producto, asegúrese de conservarlo de acuerdo con las condiciones de almacenamiento recomendadas;

3. este producto es solo para investigación científica o producción y uso adicionales, y no se puede utilizar para diagnóstico clínico o tratamiento.

Células de cáncer de mama humano sum159pt + Luc + GFP (tres negativas)