Kit de prueba ELISA para la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1)

I. información sobre el producto:

Nombre del producto:Kit de prueba ELISA para la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1)

Número de producto: yxr31104

Número de lote del producto: para más detalles, consulte la etiqueta del producto

Validez: 6 meses

Condiciones de conservación: 2 - 8 ° C

Uso del producto:

Este kit se utiliza para la detección cuantitativa in vitro del contenido de la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1) en muestras de suero, plasma, homogeneizado de tejidos y líquidos relacionados.

2. principio de detección:

El kit utilizó el método de sándwich de doble anticuerpo en un solo paso prueba de inmunoabsorción enzimática (elisa). En los microporos de la envoltura, que preenvasan los anticuerpos capturados por la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1), se añaden sucesivamente los anticuerpos de detección marcados con especímenes, estándares y hrp, que se crían a temperatura y se lavan a fondo. Con el sustrato tmb para colorear, el tmb se convierte en azul catalizado por la peróxido y en amarillo final bajo la acción del ácido. La oscuridad del color se relacionó positivamente con la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1) en la muestra. La Absorbancia (valor de do) se determina a una longitud de onda de 450 nm con un medidor estándar enzimático y se calcula la concentración de la muestra.

3. métodos de recogida, tratamiento y conservación de muestras:

Lo siguiente es solo una lista de guías generales para la recolección de muestras. Durante la recolección de todas las muestras, no se debe usar Azida de sodio como conservante.

1. suero: use un tubo de ensayo libre de pirógenos y lps, evite cualquier estimulación celular durante la operación, coloque el espécimen de sangre entera recogido en el tubo de separación de suero a temperatura ambiente durante 2 horas o 4 ° C durante la noche, y luego centrifugarlo 1000 × G durante 20 minutos, basta con sacarlo o o conservarlo a - 20 ° c o - 80 ° c, pero evite la congelación y descongelación repetidas.

2. plasma: recoger el espécimen con EDTA o Heparina como anticoagulante y centrifugarlo a 2 - 8 ° C 1000 × G durante 15 minutos dentro de los 30 minutos posteriores a la recolección, extraerlo para detectarlo o conservarlo a - 20 ° c o - 80 ° c, pero se debe evitar la congelación y descongelación repetidas.

3. sobrenadante de cultivo celular u otros especímenes biológicos: se debe centrifugar 1000 × G durante 20 minutos, tomar el sobrenadante para detectarlo, o conservarlo a - 20 ° c o - 80 ° c, pero se debe evitar la congelación y descongelación repetidas.

4. homogeneización de tejidos: lavar los tejidos con PBS preconfriados (0,01m, pH = 7,4), eliminar la sangre residual (los glóbulos rojos agrietados en el homogeneizado pueden afectar los resultados de la medición) y cortar el tejido después de pesarlo. El tejido cortado se compara con el volumen correspondiente de PBS (generalmente en una relación peso - volumen de 1: 9, como una muestra de tejido de 1G que corresponde a 9 ml de pbs, el volumen específico se puede ajustar adecuadamente de acuerdo con las necesidades experimentales y hacer un buen registro. Se recomienda agregar inhibidores de proteasa al pbs) en un homogeneizador de vidrio y moler completamente sobre Hielo. Para romper aún más los tejidos y las células, el homogeneizado se puede triturar por ultrasonido o congelar y descongelar repetidamente. Finalmente, el homogeneizado se centrifuga en 5000 × G durante 5 a 10 minutos y se extrae para su detección.

Nota: la Hemólisis de la muestra puede afectar el resultado final de la prueba, por lo que la Hemólisis de la muestra no es adecuada para esta prueba.

5. conservación: si la muestra no se detecta a tiempo después de la recolección, envuélvela de acuerdo con una dosis, congelarla a - 20 ° c, evitar la congelación y descongelación repetidas, descongelarla a temperatura ambiente y asegurarse de que la muestra se cargue, descomponga y congele uniformemente.

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Kit de prueba ELISA para la molécula de lesión renal de rata 1 (kim - 1)