Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)

Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)

Este Kit es solo para investigación.

Alcance de la prueba:96T

20 ng / L -480 ng / L

Propósito de uso:

Este kit se utiliza para la determinaciónContenido de Microcistina LR (mc - lr) en la muestra.

Principios experimentales

Este Kit utiliza el método de sándwich de doble anticuerpo para determinar la muestra.Microcistina LR (mc - lr)Nivel. Con purificadoMicrocistina LR (mc - lr)El paquete de anticuerpos se envuelve en microporos para hacer anticuerpos sólidos, que se añaden a los microporos del paquete de anticuerpos monoclonales a su vez.Microcistina LR (mc - lr),Marcado de nuevo con HRPMicrocistina LR (mc - lr)Los anticuerpos se unen para formar un complejo de anticuerpos marcado por anticuerpos - antígenos - enzimas, y después de * lavado, se añade un sustrato tmb para colorear. El tmb se convierte en azul catalizado por la enzima HRP y en amarillo final bajo la acción del ácido. Color claro y en la muestraMicrocistina LR (mc - lr)Correlación positiva. Determinación de la Absorbancia (valor de do) a una longitud de onda de 450 nm con un medidor estándar enzimático y cálculo de la muestra a través de la curva estándarMicrocistina LR (mc - lr)Concentración.

Composición del kit

Requisitos para especímenes

1. después de la recolección de la muestra, la extracción se realiza lo antes posible, la extracción se realiza de acuerdo con la literatura relevante, y después de la extracción, el experimento debe llevarse a cabo lo antes posible. Si no se puede realizar el ensayo de inmediato, se puede conservar el espécimen a - 20 ° c, pero se debe evitar la congelación y descongelación repetidas.

2. no se pueden detectar muestras que contengan nan3, ya que nan3 inhibe la actividad de la peroxidasa de rábano picante (hrp).

Kit Elisa de Microcistina LR (mc - lr)Pasos de operación

• Dilución del estándar: este Kit proporciona un estándar original, y el usuario puede diluirlo en un tubo de ensayo pequeño de acuerdo con el siguiente gráfico.

• Añadir muestra: se establecen agujeros en blanco (los agujeros de control en blanco no agregan muestras y reactivos estándar enzimáticos, y el resto de los pasos funcionan de la misma manera), agujeros estándar y agujeros de muestra a medir. Añadir con precisión 50 μl de muestra al estándar en la placa de cubierta del paquete estándar enzimático, primero añadir 40 μl de dilución de muestra al agujero de la muestra a medir, y luego agregar 10 μl de muestra a medir (la dilución final de la muestra es 5 veces). Añadir la muestra a la parte inferior del agujero de la placa estándar de la enzima, tratar de no tocar la pared del agujero, sacudir suavemente y mezclar bien.
• Wen yu: sellar la placa con película de sellado y colocarla a 37 ° C durante 30 minutos.
• Distribución de líquidos: diluir 30 veces el detergente concentrado con agua destilada 30 veces y reservarlo
• Lavado: quitar cuidadosamente la película de sellado, descartar el líquido, secar, llenar cada agujero con líquido de lavado, Dejar reposar durante 30 segundos y descartarlo, repetir esto 5 veces, palmaditas secas.
• Adición de enzima: añadir 50 μl de reactivo estándar de enzima a cada agujero, excepto el agujero en blanco.
• Wen yu: la operación es la misma que 3.
• Lavado: operación 5.
• Color: añadir el agente de color A50 μl por agujero, luego añadir el agente de color b50 μl, sacudir suavemente y mezclar bien, y evitar la luz y el color a 37 ℃ durante 10 minutos.
• Terminación: 50 μl de líquido de terminación por agujero para detener la reacción (en este momento, el azul se convierte en amarillo).
• Determinación: la Absorbancia (valor de od) de cada agujero se mide secuencialmente con una longitud de onda de 450 nm ajustada a cero por un agujero en blanco. La determinación debe realizarse dentro de los 15 minutos posteriores a la adición del líquido de terminación.

Resumen del procedimiento operativo:

cálculo

Tomando la concentración del estándar como Coordenadas horizontales y el valor de od como coordenadas longitudinales, se dibuja la curva estándar en el papel de coordenadas, y la concentración correspondiente se detecta a partir de la curva estándar de acuerdo con el valor de od de la muestra; Multiplicar por el múltiplo de dilución; O calcular la ecuación de regresión lineal de la curva estándar con la concentración del estándar y el valor de od, reemplazar el valor de od de la muestra en la ecuación, calcular la concentración de la muestra y multiplicarlo por el múltiplo de dilución, es decir, la concentración real de la muestra.

Precauciones

1. el kit debe extraerse del ambiente refrigerado y debe equilibrarse a temperatura ambiente durante 15 - 30 minutos antes de que pueda usarse. si el paquete estándar enzimático no se agota después de la apertura de la placa, la placa debe cargarse en una bolsa sellada para su conservación.

2. el detergente concentrado puede tener precipitación cristalina, que se puede calentar y ayudar a la disolución en un baño de agua cuando se diluye, sin afectar el resultado cuando se lava.

3. el muestreador debe utilizarse en cada paso de la muestra y su precisión debe corregirse con frecuencia para evitar errores de prueba. El tiempo de muestra única se controla en 5 minutos, si el número de especímenes es grande, se recomienda usar la pistola de pelotón para agregar muestras.

• Por favor, haga la curva estándar y el agujero complejo al mismo tiempo cada vez que se determine. Si el contenido de la sustancia a medir en la muestra es demasiado alto (el valor de od de la muestra es mayor que el valor de od del agujero di del producto estándar), primero diluya un cierto múltiplo (n veces) con la dilución de la muestra antes de determinarlo, y luego multiplique por el múltiplo de dilución total (× n × 5) al calcular.
• La película de sellado se limita al uso único para evitar la contaminación cruzada.

6. el sustrato debe conservarse protegido de la luz.

7. siga estrictamente el funcionamiento de las instrucciones, y los resultados de la prueba deben basarse en la lectura del medidor de enzima.

8. todas las muestras, detergentes y diversos residuos deben tratarse como contagios.

9. los diferentes componentes del número de lote de este reactivo no se pueden mezclar.

Condiciones de conservación y período de validez

1. conservación del kit:; 2 - 8 ° c.

2. validez: 6 meses