Kit de diagnóstico de anticuerpos AB de Leishmania por Elisa

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Kit de diagnóstico de anticuerpos AB de Leishmania por Elisa

Guangzhou jianlun Biotechnology co., Ltd.

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Kit de diagnóstico de anticuerpos AB de Leishmania por Elisa

Principios de la prueba

Prueba de inmunoadsorción enzimática indirecta (elisa). los estándares con concentraciones conocidas de lsm - AB y las muestras con concentraciones desconocidas se agregan a la placa estándar de enzima microporosa para la detección. Primero, el lsm - AB y los anticuerpos marcados se calentaron al mismo tiempo. Después del lavado, agregue el pro

HRP marcado por hesu. Después de la incubación y el lavado, se elimina el complejo enzimático no unido, y luego se añaden los sustratos a y b, que se combinan con el complejo enzimático.

Usa. Generar color. La profundidad del color es proporcional a la concentración de lsm - AB en la muestra.

Materiales propios

Agua destilada.

加样器： 5ul, 10ul, 50ul, 100ul, 200, 500ul, 1000ul.

Osciladores y agitadores magnéticos, etc.

seguridad

Evite el contacto directo con la solución de terminación y los sustratos a y B. Una vez en contacto con estos líquidos, Enjuague con agua lo antes posible.

No coma, beba, fume ni use cosméticos en el experimento.

No absorba ningún componente del kit con la Boca.

Precauciones operativas

Los reactivos deben almacenarse de acuerdo con las instrucciones de la etiqueta y volver a la temperatura ambiente antes de su uso. Los estándares después de la dilución deben descartarse y no conservarse.

Las tiras que no se utilizan en el experimento deben volver inmediatamente a la bolsa de embalaje y conservarse selladas para evitar el deterioro.

Otros reactivos no utilizados deben empaquetarse o cubrirse. No mezcle los reactivos con diferentes números de lote. Uso antes de la fecha de caducidad.

Utilice una cabeza de succión desechable para evitar la contaminación cruzada, y evite usar un muestreador con partes metálicas al absorber el líquido de terminación y el líquido de sustrato a y B.

Use un recipiente de plástico limpio para configurar el detergente. Mezcle completamente los diversos ingredientes y muestras en el kit antes de usarlo.

Al lavar la placa estándar de la enzima, se debe secar completamente, y no poner el papel absorbente de agua directamente en el agujero de reacción estándar de la enzima para absorber el agua.

El sustrato a debe volatilizarse para evitar abrir la tapa durante mucho tiempo. El sustrato B es sensible a la luz y evita la exposición a la luz durante mucho tiempo. Evitar el contacto con las manos, tóxico. Real

El valor de od debe leerse inmediatamente después de la finalización de la inspección.

El orden de incorporación de los reactivos debe ser consistente para garantizar el mismo tiempo de calentamiento de todos los agujeros de la placa de reacción.

La operación de calentamiento y crianza se realiza de acuerdo con el tiempo, la cantidad y el orden indicados en las instrucciones.

Métodos de recogida, tratamiento y conservación de muestras

Suero - evitar cualquier estímulo celular durante la operación. Se utilizan tubos de ensayo que no contienen pirógenos ni lps. Después de recoger la sangre, se centrifuga 1000 × G durante 10 minutos

Separar el suero y los glóbulos rojos de manera rápida y cuidadosa.

El plasma - edta, el Citrato y el plasma de Heparina se pueden utilizar para la detección. Centrifugación 1000 × G durante 30 minutos para eliminar partículas.

El líquido claro celular - "1000 × G centrifugación durante 10 minutos para eliminar partículas y polímeros.

Conservación - si la muestra no se utiliza de inmediato, se debe dividir en una pequeña parte - 70 ° C para conservarla y evitar la congelación repetida. En la medida de lo posible, no use Hemólisis ni hiperglucemia.

Sangre grasa. Si hay una gran cantidad de partículas en el suero, centrifugar o filtrar antes de la prueba. No calentar y descongelar a 37 ° c o más. Debe descongelarse a temperatura ambiente y

Asegúrese de que las muestras se carguen, descompongan y congelen uniformemente.

Preparación del reactivo

Estándar: la dilución en serie del estándar debe prepararse durante el experimento y no se puede almacenar. Mezclar bien los productos estándar por oscilación antes de diluir.

Dilución del tampón de lavado (50 ×): 50 veces la dilución del agua destilada.

Pasos de operación

Antes de usarlo, mezcle bien todos los reactivos. No permita que el líquido produzca una gran cantidad de espuma, para no agregar una gran cantidad de burbujas al agregar la muestra y producir errores en la adición de la muestra.

Pobre.

El número de tiras necesarias se determina de acuerdo con el número de muestras a probar más el número de productos estándar. Se recomienda hacer agujeros compuestos para cada estándar y agujero en blanco. Cada muestra se basa en

Dependiendo de su propia cantidad, puede usar agujeros compuestos para hacer agujeros compuestos tanto como sea posible.

Añadir 50 ul del estándar diluido en el agujero de reacción y 50 ul de la muestra a medir en el agujero de reacción. Añadir inmediatamente el anticuerpo marcado con 50ul.

Cubra la placa de membrana, agite suavemente y mezcle bien, y cultive a 37 ° C durante 1 hora.

Eliminar el líquido del agujero, llenar cada agujero con detergente, oscilar durante 30 segundos, eliminar el detergente y secarlo con papel absorbente. Repita esta operación 3 veces. Si se utiliza una lavadora de placas

Lavar, aumentar el número de lavados una vez.

Añadir 80 ul de enzima de cadena de afinidad - hrp a cada agujero, agitar suavemente y mezclar bien, y criar a 37 ° C durante 30 minutos.

Eliminar el líquido del agujero, llenar cada agujero con detergente, oscilar durante 30 segundos, eliminar el detergente y secarlo con papel absorbente. Repita esta operación 3 veces. Si se utiliza una lavadora de placas

Lavar, aumentar el número de lavados una vez.

Agregue 50 ul de sustratos a y B por agujero, agite suavemente y mezcle bien, y cultive a 37 ° C durante 10 minutos. Evite la luz.

Retire la placa estándar de la enzima y agregue rápidamente 50 ul de líquido de terminación, y los resultados deben determinarse inmediatamente después de agregar el líquido de terminación.

Los valores de od de cada agujero se determinan a una longitud de onda de 450 nm.

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