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Dirección
Shanghai qifa experimental reactive co., ltd., 6619 chuansha road, chuansha town, pudong, Shanghai
Categorías de producto
Shanghai qifa experimental reactive co., Ltd.
Enzima de secuenciación klentaq - S
NegociableActualización en05/06
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Descripción general
La enzima de secuenciación klentaq - S es una versión modificada de la polimerasa de ADN taq, que es un gran fragmento de la polimerasa de ADN Taq y ha hecho mutaciones genéticas. Esta enzima tiene una actividad de polimerasa de 5 '→ 3', sin actividad de enzima de extracción de 5 '→ 3' y actividad de enzima de extracción de 3 '→ 5'.
Detalles del producto
La empresa KlenTaq-SLa enzima de secuenciación es una proteína recombinante expresada y purificada en varios pasos.
Definición de actividadLa unidad activa se refiere a 72℃Abajo, Tampón PCR de 1 x AM1,30 mínimoInterior 10 nmole de dNTPLa cantidad de enzima necesaria para mezclar sustancias solubles en ácido.característica
1. especialmente adecuado ddNTP Reacción de incorporación de nucleótidos tan modificados
2. en comparación con la longitud total Taq ADN Polimerasa, menor actividad específica de esta enzima
Ámbito de aplicación
ddNTP Ley de terminaciónADN SecuenciaciónSecuenciación generacional(...)
Método de extensión de la reacción de pirofosforilación SNP Análisis
Control de calidad
Después de estrictas pruebas de control de calidad, se garantiza que el producto tenga la mayor actividad y pureza.
Tampón de almacenamiento enzimático
Tris-HCl 20 mM (pH 8,0), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, Nonidet P40 al 0,5%, Tween20 al 0,5% y glicerol al 50%.
Ejemplos de aplicaciones
Las siguientes reacciones son ejemplos. 50 μlestándar PCREl sistema es solo para referencia. Real PCRLas condiciones deben optimizarse de acuerdo con el tamaño de la plantilla, el primer y el fragmento de destino para determinar las mejores condiciones de reacción.
1)Siga la tabla para preparar el sistema de reacción.
Composición |
volumenpor μl |
Concentración final |
Tampón de PCR 10×AM 1 |
5 |
1 × |
dNTP()2,0 mM(...) |
5 |
0,2 mM |
Primer F()10 μM(...) |
1.5 |
0,3 μM |
PrimerR()10 μM(...) |
1.5 |
0,3 μM |
Plantilla |
Variable* |
/. |
KlenTaq-SEnzima de secuenciación5U / μl(...) |
0.5 |
2.5U |
ddH2O |
Varable |
/. |
Volumen total |
50 |
/. |
* parámetros de dosis de ADN de plantilla (sistema de reacción de 50 μl):
Genoma HumanoDNA100-1000 ng ; ADN genómico microbiano 10 - 100 ng;Los productos PCR molestaron a kanyan de manera característica; 1ng - 10%V; ADN de plásmido 5-30 ng; ADNc de la reacción RT 1-5 μl.
2)Reaccionar en las siguientes condiciones,
95℃ |
2-5 minutos |
|
95℃ |
15 segundos |
25-35 ciclos |
55 a 72℃ |
20 segundos |
|
72℃ |
1 kb/min |
|
72℃ |
5 minutos |
3)Detección por gel de agarosaPCR Productos, o realizar operaciones posteriores con fines experimentales.
Precauciones1.PCR Condiciones y tipo salvaje Taq ADN La polimerasa es similar, específica ADN La respuesta de secuenciación puede necesitar ser optimizada.2. la capacidad de amplificación de esta enzima es mayor que la del tipo salvaje. Taq DNA La polimerasa ha disminuido,PCR La producción ha disminuido y no se recomienda para uso rutinario PCR.3. no disponible Taqman Método de sonda q-PCR.
