Inducción del modelo de pancreatitis aguda con ceruletida

Rana de lluvia()Ceruletida) Modelo animal de enfermedad de pancreatitis aguda inducida

Introducción:

Pancreatitis aguda(Pancreatitis aguda, AP)Es una enfermedad abdominal aguda clínicamente común, con causas complejas y una tasa de mortalidad alcanzada.5% a 10%, graveAPLa tasa de mortalidad es tan alta como20% a 30%En la actualidad, la patogénesis aún no se ha expuesto y no hay tratamiento especial. Actualmente vivoAPLos métodos comunes para la fabricación de modelos animales son aproximadamente la ligadura del tubo pancreático, el método de bucle cerrado del duodeno, el método de inyección de punción pancreática y biliar, el método de inyección submembrana del páncreas, el método de inyección pancreática y biliar combinado con el método de inyección intravenosa, el método de inyección intraabdominal de LPS combinado con rana y piel, etc.

Rana de lluvia(Caeruleina)Es una función y composición similar a la colecistokinina(colecistokinina,CCK)Las moléculas reguladoras gástricas que estimulan la secreción excesiva de células acinares pancreáticas dificultan la separación del tripsinógeno y la enzima lisosómica en las células, a través de la catepsina.BLa activación de forma dependiente, la actividad de la tripsina, a su vez, puede causar aún más la activación del enzimogen, causando una serie de daños celulares causados por la actividad de la proteasa. La respuesta inflamatoria causada por la autodigestión del tejido pancreático recluta células inflamatorias, libera factores inflamatorios y provoca aún más una respuesta inflamatoria local e incluso sistémica grave.

Proceso de operación:

1. Selección6Zhou lingxiongEl C57BL/6Ratones, criados enSPFNivel de medio ambiente, mantenimiento12Ciclo oscuro en poco tiempo, temperatura 20℃, humedad40% - 60%Comer y beber libremente.

2. Implementación de la fabricación de modelos

1(...)Pretratamiento de animales

Antes de la fabricación del modelo8El ayuno de los ratones se realiza durante horas (no se puede evitar el agua) para reducir la interferencia del contenido Gastrointestinal en la detección del páncreas.

2(...)Preparación de rana de lluvia

Diluir la rana de lluvia a la concentración de trabajo con solución salina normal.

3Inyección intraabdominal

Presionar100ug/kgDosis por peso corporal1Horas para inyección intraabdominal en ratones1Segunda Rana de lluvia, inyección continua8Veces (múltiples inyecciones de dosis bajas pueden simular la aparición gradual de pancreatitis aguda humana y evitar la muerte aguda causada por una sola dosis alta).

4)Control en blanco

Los ratones del grupo control se inyectaron la misma cantidad de solución salina normal en la cavidad abdominal al mismo tiempo, descartando el efecto de estrés de la operación de inyección en sí.

5) Observación y recogida de muestras después de la fabricación del modelo

Después de la creación del modelo, se observó de cerca el Estado mental, la actividad, la alimentación y el agua potable y los rasgos fecales de los ratones, y se evaluó la respuesta general al estrés. Inyección de rana de lluvia24Horas después, los ratones fueron sacrificados y se tomaron muestras clave:

a.Tejido pancreático

Separar rápidamente el páncreas y fijarlo parcialmente después del pesaje10%Formalina neutra (para secciones patológicas), parcialmente congelada en nitrógeno líquido (para pruebas moleculares).

b.Muestras de sangre

Después de extraer sangre de la órbita, el suero se separó por centrifugación para detectar amilasa, Lipasa y factores inflamatorios.

c.Otras muestras

De acuerdo con las necesidades del estudio, se pueden recoger muestras de colon, heces, etc., para el análisis de asociación.

3.Verificación del modelo:

1)Lesiones histopatológicas del páncreas

a.a través deHELa Tinción observó cambios morfológicos en el páncreas, y el Grupo modelo mostró trastornos estructurales, edema, necrosis de las células acinares pancreáticas e infiltración masiva de células inflamatorias.

b.Páncreas en el Grupo modelo/.El aumento de la relación de peso sugiere hinchazón y daño del páncreas.

2)Aumento de los niveles de enzimas digestivas séricas

La actividad de la amilasa sérica y la Lipasa en el Grupo modelo fue significativamente mayor que en el Grupo de control en blanco, y la diferencia fue estadísticamente significativa.p<0.0001) se confirmó que el daño de las células acinares pancreáticas causó la liberación de enzimas digestivas en la sangre.

3)Liberación de factores proinflamatorios séricos

Factores antiinflamatorios séricos en el Grupo modeloIL-6,TNF -La concentración de alfa aumentó significativamente, lo que indica que la rana de lluvia indujo con éxito la propagación sistémica de la pancreatitis.

Información del producto:

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