Kit de detección de dopamina ielisa Lake

Este Kit es una aplicaciónELISAProductos de detección de residuos de medicamentos desarrollados por tecnología,En comparación con la tecnología de análisis instrumental, puede detectar músculos de manera económica y rápida.organización、En muestras de piensos, orina, etc.deContenido de Ractopamina.

III. tasa de respuesta cruzada

Tasa de reacción cruzada con análogos:

Ractopamina.................. 100%

Salbutamol...........................III.1Porcentaje

Clorhidrato de dobaan........................III.1Porcentaje

Cruntero ........................III.1Porcentaje

IV. composición del kit

Placa estándar enzimática1Bloque,96agujero/.tabla

Líquido estándar5Botellas..1ml/Botellas):

0 ppb,0. 1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb

Marcadores enzimáticos ...........................7mL

Líquido de trabajo de anticuerpos ...........................10 metrosL

Líquido de sustratoA ………………………………………7mL

Líquido de sustratoB.................................7mL

Líquido de terminación................... ...............7mL

10×Detergente concentrado........................40ml

2×ConcentraciónSolución compuesta........................50mL

Manual de instrucciones................... ...............1Copias

V,Equipos y reactivos propios de la unidad de uso

（1(...)Instrumentos

Medidor de etiquetado enzimático de microplaca(450 nm); dispositivo de secado por soplado de nitrógeno;OsciladoresV;centrífuga; pergamino; Balanza electrónica (sensorial)0.01 g).

（2(...)Equipo

Matraz aforado:de 100 ml,500 ml,1000 mL

Un solo caminoMicropipeta:20 μL-.200 μL,100 μL~ 1000 μL

DuodaoMicropipeta:30 μL-.300 μL

（3) reactivos

Metanol, nitrilo, n - hexano, * ácido clorhídrico concentrado, agua desionizada

6. preparación de la solución

El preprocesamiento de la muestra debe prepararse:

Distribución de líquidos1:1M NaOHSolución

Pesaje4.0 g NaOHmásAgua desionizadaDisolución,Volumen fijo ade 100 ml.

Distribución de líquidos2:0.1M HCl

Tomar la cantidad0.83 mLácido clorhídrico concentrado añadido al agua desionizadaVolumen fijo ade 100 ml.

Distribución de líquidos3:25%Metanol

Tomar la cantidad25 mlMetanol, añadido75 mlAgua desionizada, mezclar bien.

Distribución de líquidos4:25%Metanol-0.1MHCLSolución

Tomar la cantidad20 ml 0,1 mácido clorhídricoSoluciónUnirse a80mL 25%MetanolEn la solución y mezclar bien.

Distribución de líquidos5:Solución compuesta de muestra

2×ConcentraciónSolución compuestaAntes de usarlo, presione1:1Dilución1CopiasConcentraciónSolución compuesta de muestra- sí. 1Agua desionizada).

Distribución de líquidos6:Líquido de trabajo de lavado

10×Antes de usar el detergente concentrado, presione1:9Dilución1Concentración de PartesLavadoLíquido - sí. 9Agua desionizada (se puede configurar bajo demanda).

7. métodos de preprocesamiento de muestras

Instrucciones antes del procesamiento de la muestra:

（1) en el experimento se debe utilizar una cabeza de succión desechable y se debe reemplazar la cabeza de succión al absorber diferentes reactivos.

（2) antes del experimento, se debe comprobar si varios aparatos experimentales están limpios y se deben utilizar aparatos experimentales limpios para evitar que la contaminación interfiera con los resultados del experimento.

muestraAntesPasos de procesamiento:

()A(...)grupo Tratamiento de tejido (músculos de pollo, pato y cerdo)/.Hígado, huevos, pescado, camarones, etc.)

Método de tratamiento 1:

1, precisoPesaje2.0 ± 0,02 gHomogeneizaciónMuestra en50 mLEn el tubo centrífuga;

2, unirse0,5 mlRehidratación de la muestra diluida (dispensación)5), oscilación completa2 minutos, unirse8 ml Cianuro, completoOscilación del vórtice3 ~ 5 minutos, temperatura ambiente4000 r/minCentrifugadora10 minutosV;

3、 取2,5 mlLíquido superior aEn otro tubo centrífuga，50 a 60Secado por soplado de nitrógeno a ° c;

4, unirse1 ml El n - hexano disuelve los residuos y luego se agrega1 mlSolución compuesta de muestra (dispensación de líquido)5), completamente mezclado30 s, temperatura ambiente4000 r/minCentrifugadora10 minutosV;

5, eliminar el n - hexano superior y tomar20 μLEl líquido inferior se utiliza para el análisis.

Método de tratamiento 2:

1, precisoPesaje2.0 ± 0,02 gHomogeneizaciónMuestra en50 mLEn el tubo centrífuga;

2, unirse6 ml25%Metanol-0.1MHCLSolución,OscilacionesMezclar bien3 ~ 5 minutos，Temperatura ambiente4000 r/minarribaCentrifugadora10 minutos(nota: si la muestra de tejido tiene un alto contenido de grasa, se puede poner después de la oscilación.85℃ el baño de agua se centrifuga después de 10 minutos);

3,取1 ml de aguaLíquido superior aOtro2 mlEn el tubo centrífuga，unirse20μL 1M* La solución se mezcla bien (se determina después de mezclar bien)El pHValor, aproximadamente7 - 8);

4,4000 r/minCentrifugadora3 ~ 5 minutos; extraer el líquido claro20 μLPara análisis.

()B(...)Orina, suero

取20 μLMuestra de orina clara o determinación directa del suero (como muestra de orina o turbidez sérica)

Debe pasar por filtración o4000 r/minen15℃Centrifugadora10 minutosHasta la limpieza

brillante) las muestras que no se utilicen por el momento deben congelarse y conservarse.

8. pasos de la prueba de inmunización enzimática

Instrucciones previas a la determinación:

1、 Antes de usarlo, levante todos los reactivos y las microporos necesarias a temperatura ambiente.

2、 Devolver todos los reactivos inmediatamente después de su uso2 a 8 ℃.

3、 No deje que los microporos se sequen durante su uso.

4、 EnELISALa repetibilidad en el análisis depende en gran medida de la consistencia de la placa de lavado, y la operación correcta de lavado esELISADeterminar los puntos principales del procedimiento.

5、 En todos los procesos de incubación a temperatura constante, evite la luz y useTapaLa película de la placa cubre la placa microporosa.

Pasos de determinación:

1,Poner los reactivos necesariosY microporosExtraer del ambiente refrigerado y equilibrar a temperatura ambiente30 mínimoSe debe agitar cada líquido antes de usarlo. Preste atención a que el líquido estándar debe hacerse.2Una prueba paralela.

2,Añadir productos estándar/.Muestras:másEntrarProductos estándar/.muestra20 μL/agujero，unirseEnzimaMarcadores50 μL/Kong, vuelve a unirteLíquido de trabajo de anticuerpos80 μL/agujero，Agitar suavemente y mezclar bien，usarCubiertaLa película está bien cubierta,Temperatura ambiente25℃Reacción de protección contra la luz inferior30 minutos.

3,Lavado de placas:Retire cuidadosamente la película de cubierta y seque el líquido en el agujero.Añadir detergente 250 μL/.Kong, cada vezRemojo15 a 30 s, lavar completamente4 a 5Segunda vez, palmaditas con papel absorbenteSeco.

4,Color:Cada agujero se une primero.Líquido de sustratoA 50 μL, y luego se unen cada unoLíquido de sustratoB 50 μL, suavementeOscilacionesMezclar bien y enTemperatura ambiente25℃abajoReacción de protección contra la luz10~.15 minutos.

5,Determinación:Cada agujero más50 μLLíquido de terminación,Agitar suavemente y mezclar bienEn el medidor de etiquetado enzimático450 nmDeterminación in situODValor (recomendado450 / 630 nmDetección de doble longitud de onda, en5 mínimoLeer los datos internamente).

Nueve,análisis de resultados

Valor medio de la absorción de la solución estándar o muestra medida..B) dividido por el número

Un líquido estándar..0Absorción de (líquido estándar) ()B₀) el valor se multiplica por100%，

Se obtiene el valor de absorción porcentual.

Valor de absorción porcentual..Porcentaje))

Con una concentración estándar10El logaritmo de fondo esXEje, valor de absorción de luz del 100%YEje, dibuja la curva estándar. Reemplazar el valor de absorción de luz del 100% de la muestra en la curva estándar y leer el valor correspondiente de la muestra de la curva estándar como10La potencia, multiplicada por el múltiplo de dilución, es lo que contiene la muestra.RactopaminaCantidad.

El uso del software de análisis profesional del kit para calcular es más conveniente para el análisis preciso y rápido de un gran número de muestras.

Diez,Múltiplo de dilución de la muestra

Tejido animal:2Doble (método cuadrado uno),4Veces (método 2)

Muestras de orina y suero:1Veces

diezuno, sensibilidad, precisión, precisión del kit

Sensibilidad del kit:0. 1ppb

Límite de detección de la muestra:

Muestra de tejido (método 1)..................0.2ppb

Muestras de tejido (método 2)..................0.4 ppb

Muestras de orina y suero.....................0.1ppb

Tasa de recuperación:

organizaciónmuestra .....................75±20Porcentaje

Muestras de orina y suero.....................95±20Porcentaje

precisión: el coeficiente de variación del kit es menor que10%

diezdos. precauciones

1, la temperatura ambiente es inferior a20 ℃O reactivos y muestras no vuelven a la temperatura ambiente（20 a 25 ℃(...)Conducirá a todos los estándaresODEl valor es bajo.

2. Si el agujero de la placa se seca durante el proceso de lavado de la placa, habrá un fenómeno de curva estándar no lineal y mala repetibilidad.，Por lo tanto, el siguiente paso debe hacerse inmediatamente después de que la placa de lavado se seque.

3. no use kits con fechas válidas; Tampoco use ningún reactivo en un kit con fecha de caducidad, el dopaje con un kit con fecha de caducidad causará una disminución de la sensibilidad; No intercambie reactivos que utilicen kits de diferentes números de lote.

4, conservar el kit en2 a 8 ℃, no congele, vuelva a sellar las microporos no utilizadas en bolsas autoaisladasV;Las sustancias de referencia y los colorantes incoloro son sensibles a la luz, por lo que es necesario evitar la exposición directa a la luz.

5, reactivos de colorCualquier color que indique el deterioro del agente de color debe descartarse.Sí.

6、En la adhesiónLíquido de sustratoDespués, el color general15 mínimoEstá bien. Si el color es más claro, se puede prolongar el tiempo de reacción.20 mínimo(o más), pero no más30 mínimoV;Por el contrario, se reduce el tiempo de respuesta.

dieztres, condiciones de almacenamiento y período de conservación

Condiciones de almacenamiento: en2 a 8 ℃Kit de conservación.

Período de conservación: este Kit tiene una validez de12Meses.