Kit de detección de ácido nucleico del virus del herpes equino tipo 1 (ehv - 1)

[nombre del producto]Virus del herpes equino1Tipo..EHV-1Kit de detección de ácidos nucleicos

[especificaciones de embalaje]50t / Caja

[método del producto]Fluorescencia en tiempo realMétodo PCR

Virus del herpes equino1Tipo..EHV-1Kit de detección de ácidos nucleicos

Líquido de reacción RT - pcr, líquido enzimático mixto, control positivo, control negativo.

[condiciones de almacenamiento y período de validez]

Evitar la luzConservar por debajo de - 20 ℃, evitar la congelación y descongelación repetidas, y la validez es de 12 meses.

Serie abi, serie bio - rad, serie Agilent Stratagene mx, Roche lightcycler r480, cepheid smartcycler, serie rotor - gene, serie Hangzhou bori y otros PCR cuantitativos fluorescentes en tiempo real multicanal.

[método de inspección]

Preparación de reactivos (área de preparación de reactivos)

（1) retire el kit del refrigerador, retire el kit necesario para el experimento del kit, derrita completamente y mezcle y centrifuga instantáneamente para eliminar el líquido adherido a la pared del tubo.

（2) contabilizar el número de reacciones necesarias para el experimento (n) y calcular la cantidad de varios reactivos necesarios para el experimento de acuerdo con el sistema de reacción mostrado en la siguiente tabla.

N = número de controles negativos (1t) + número de controles positivos (1t) + reserva de error (1t) + número de muestras

（3) añadir los reactivos anteriores en un tubo centrífuga estéril y centrifugar instantáneamente después de mezclar completamente. Los reactivos se dividen en tubos de reacción PCR de acuerdo con la cantidad de 20 μl / tubo.

（4) después de cubrir la tapa del tubo de reacción pcr, el tubo de reacción PCR se transfiere a la zona de procesamiento de muestras. Los reactivos restantes se devuelven al refrigerador por debajo de - 20 ° C y se congelan.

2. preparación de la muestra (área de procesamiento de la muestra)

usarLos kits de extracción de ADN de las empresas qiagen y Roche extraen adn, y las operaciones específicas se operan de acuerdo con las instrucciones de sus kits.

3. añadir muestras

Preparado en lo anteriorSe añaden 5 μl de ADN y 25 μl de volumen final de las muestras procesadas a medir en el tubo de muestra de reacción pcr, respectivamente, y se tapa la tapa de reacción PCR y se mezcla para centrifugar instantáneamente a baja velocidad y transferirla al instrumento pcr. El control negativo y el cuidado positivo se añaden al control negativo o al control positivo traído por el kit de 5 μl cada uno, con un volumen final de 25 μl por tubo, y se centrifuga instantáneamente a baja velocidad después de cubrir la tapa de reacción PCR y mezclar bien, y se transfiere al instrumento pcr.

PCR (zona de amplificación pcr)

（1) tomar el tubo de reacción PCR preparado en el área de procesamiento de muestras, colocarlo en la posición correspondiente de la ranura de muestra del PCR cuantitativo fluorescente en tiempo real y registrar el orden de colocación.

（2) establezca los parámetros relacionados con la amplificación de ácido nucleico del instrumento en la siguiente tabla para la amplificación pcr.

Nota:El PCR fluorescente de la serie Abi no selecciona la corrección de rox cuando se establece, y el Grupo de enfriamiento se establece para seleccionar ninguno.

[valor de referencia (rango de referencia)]

1. determinación de la validez del kit:

（1) control positivo: hay una curva de amplificación típica en forma de s o un valor de CT ≤ 35.

（2) control negativo: valor CT superior a 38 o sin valor ct, la línea es recta o ligeramente oblicua, y no hay período de crecimiento exponencial.

2. determinación de los resultados de los especímenes:

（1) positivo: el valor CT del resultado de la prueba de la muestra es ≤ 35 o tiene un período de crecimiento exponencial obvio.

（2) sospechoso: el valor CT de los resultados de la prueba de la muestra está dentro del rango de 35 a 38. En este momento, las muestras deben someterse a pruebas repetidas, si el valor CT de los resultados experimentales repetidos todavía está dentro del rango de 35 a 38, y hay un período de crecimiento exponencial obvio, se determina que es positivo, de lo contrario es negativo.

（3) negativo: el valor CT del resultado de la prueba de la muestra es superior a 38 o no hay valor Ct.

[limitaciones del método de inspección]

Cuando la concentración de ácido nucleico detectado en la muestra detectada es inferior a la más alta de este kitEl límite de detección di Dhi puede producir resultados falsos negativos.

Este Kit es solo para el examen preliminar de la muestra, y para los resultados positivos de este kit, el método de cultivo debe utilizarse más para el diagnóstico.

[precauciones]

Los laboratorios que utilicen este Kit deben gestionarse estrictamente de conformidad con las normas de gestión de los laboratorios de pruebas de amplificación genética pertinentes promulgadas por las partes estatales pertinentes;

Para evitarDegradación del arn, el proceso de procesamiento de la muestra debe funcionar a 0 - 4 ° C y se debe probar en la máquina inmediatamente después de completar el experimento; Los consumibles de los utensilios utilizados en el proceso de tratamiento de la muestra deben ser tratados sin ribozima;

Los artículos de cada área son especiales y no se pueden cruzar para evitar la contaminación; Inmediatamente después de la prueba, la Mesa de trabajo debe limpiarse;

Al absorber el líquido de reacción, se deben tratar de evitar burbujas de aire; arribaAntes del pcr, se debe prestar atención a comprobar si cada tubo de reacción está bien cubierto para evitar resultados inexactos causados por la evaporación del líquido;

Todos los reactivos del kit deben derretirse y mezclarse completamente a temperatura ambiente antes de su uso, y deben centrifugarse instantáneamente;

Los controles negativos y positivos en el kit deben transferirse completamente a la zona de preparación de la muestra antes de su primer uso y almacenarse por separado;

Para evitar interferencias fluorescentes, se debe evitar el contacto directo con las manos desnudas.Tubo de reacción PCR y se debe evitar cualquier marca en el tubo de reacción pcr;

La cabeza de succión utilizada durante la prueba debe golpearse directamente en shengyou.En el tanque de residuos con ácido hipocloroso al 10%, el tubo de reacción PCR al final de la prueba no debe abrirse la tapa y desecharse después de la esterilización con otros artículos desechados; Las mesas de trabajo y diversos suministros experimentales deben desinfectarse regularmente con un 10% de ácido hipocloroso, un 75% de alcohol o lámparas ultravioleta;

9. los parámetros relacionados con la amplificación del instrumento se establecerán de acuerdo con los requisitos pertinentes de estas instrucciones; Los reactivos de diferentes lotes no se pueden mezclar; Y se utiliza durante el período de validez.