Detección de placa poroso de alto rendimiento de la fuerza de contracción celular

Antecedentes:

Las células tienen la capacidad de producir fuerza, y las células usan la fuerza física para realizar funciones importantes - cuando esta fuerza se destruye, se acorta y se alarga al realizar funciones importantes, y la enfermedad sigue. Tradicionalmente era difícil medir tales fuerzas, pero los siguientes dos nuevos métodos ahora permiten medir simultáneamente las fuerzas producidas por las células de miles de células.

Esquema de prueba:

I. detección de alto rendimiento de la contracción celularPlacas porosas - placas porosas 24, 96, 384:

Figura 1: esquema:

1.1) prueba de contracción celular 24 placas de Poros

1,2)Prueba de contracción celular placa de 96 agujeros

1.3) prueba de contracción celular 384 placas de Poros

La placa poroso, que puede detectar la fuerza de contracción celular de alto rendimiento, es* microporos con patrones fluorescentes incrustados en el Fondo de la película blanda,Con más de 100.000 patrones de proteínas pegajosas en forma de X o + distribuidos uniformemente por encima, las células se depositan y se adhieren a ellas,La X en la placa incrustada es elástica,Por lo tanto, cada vez que las células se contraen, se contraen.Las x tienen marcadores moleculares que permiten emitir fluorescencia, lo que permite visualizar y cuantificar formas reducidas.

Se pueden visualizar y cuantificar, por lo que los investigadores pueden asociar la deformación de X o cruz con una cierta cantidad de fuerza en una sola célula o en miles de células. La técnica también proporcionó a los investigadores la capacidad de ver la respuesta de calcio de una sola célula y su relación con la intensidad de la célula.

La tecnología también se puede utilizar para el descubrimiento de medicamentos. Los investigadores pueden probar diferentes moléculas terapéuticas de manera rápida y fácil para saber cómo afectan la fuerza celular y si pueden corregir cualquier problema potencial de fuerza.

Con rigidez controlableLa película elástica de grados incorpora un adhesivo diseñado por el usuario y un patrón de fluorescencia, formando una matriz muy densa pero uniforme (> 120 micras por metro cuadrado). Las células individuales de 100.000 fuentes de pacientes (obtenidas en el tejido humano del origen de la enfermedad) se posicionan y se adhieren de forma independiente al microtipo (una célula por microtipo), al que aplican tracción y cambian significativamente su forma, lo que permite una evaluación intuitiva y basada en imágenes de la contracción celular a través del rendimiento de *.

1) micro - patrón de la superficie retráctil elástica fluorescente
- con rigidez controlableLa película elástica de grados incorpora un adhesivo diseñado por el usuario y un patrón de fluorescencia, formando una matriz muy densa pero uniforme (> 120 micras por metro cuadrado). Las células individuales de 100.000 fuentes de pacientes (obtenidas en el tejido humano del origen de la enfermedad) se posicionan y se adhieren de forma independiente al microtipo (una célula por microtipo), al que aplican tracción y cambian significativamente su forma, lo que permite una evaluación intuitiva y basada en imágenes de la contracción celular a través del rendimiento de *.

2) visualización dinámica de la contracción unicelular controlada basada en imágenes
- por ejemplo, el patrón microscópico de cada célula adherida dentro de la placa de 384 agujeros se monitorea de forma independiente con una fina resolución temporal durante un tiempo prolongado para observar directamente todo el rango del comportamiento de contracción, desde la contracción tensional hasta la contracción inducida o relajación, y la ventana de Acción de cualquier efecto. Se seleccionó un patrón en forma de "x" para reducir el área de contacto celular - Basal y, al mismo tiempo, ampliar el área de difusión celular, generando así fuerzas amplificadas y concentradas en diferentes posiciones. Debido a que cada microtipo está separado mecánicamente de otros microtipo, las células adheridas no transmiten la tensión a los microtipos adyacentes, lo que garantiza una evaluación confiable de la fuerza de contracción de cada célula individual en el grupo.

3) automatización de la contracción unicelular y análisis intuitivo de imágenes
La detección basada en este método produce señales de contracción intuitivas y claras, proporcionando análisis de imagen directos para obtener datos cuantitativos y confiables de cada célula del Grupo de imágenes.

Se pueden obtener simultáneamente los datos de contracción de * de una sola célula con más de 1.000 patrones uniformes y se integran perfectamente con los formatos de placa de 96 - y 384 agujeros para facilitar el cribado masivo de fármacos

II. introducción al microscopio de tracción celular y a la matriz de micropolares

Figura 4: microscopio de tracción celular

Figura 5: matriz de microcolumnas celulares,Se puede personalizar la rigidez, el tamaño, la forma y el espaciamiento.

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