Vuelos ez - eclLíquido quimioluminiscente (clase feig)

Descripción del producto

Ez ecl FlygLa solución de Quimioluminiscencia es una Quimioluminiscencia mejorada de alta sensibilidad en la actualidad.(ECL) HRPSustrato que puede ayudar a los usuarios a lograr la detección de proteínas de bajo nivel de feike durante el análisis de inmunoimpresión(<1×10^-13,-14g)Ahorra extremadamente anticuerpos.West FemoEl sustrato puede ser el uso de la peroxidasa de rábano picante.(HRP)Los experimentos de inmunoimpresión de los complejos de acoplamiento proporcionan señales brillantes y sensibilidad de detección de clase feike. ElECLEl sustrato es compatible con diversas membranas, líquidos de cierre y diluyentes de anticuerpos de amplio alcance para satisfacer las necesidades de las aplicaciones de inmunoimpresión de los usuarios con excelente rendimiento, versatilidad y relación calidad - precio.

West FemoCaracterísticas del sustrato:

·Alta sensibilidad: detección de membranas de nitrocelulosa oPVDFUna banda de proteínas de clase feike en la membrana.

·Duración de la señal larga: en el caso de la optimización de las condiciones, las bandas de impresión incubadas con sustratos pueden seguir exportando6~8 hSeñal óptica detectable.

Concentración de dilución recomendada:

·Concentración de Resistencia: se recomienda1 µg/mlDilución del líquido de almacenamiento1: 5000A1: 100.000Veces

·Concentración de resistencia secundaria: se recomienda1 µg/mlDilución del líquido de almacenamiento1: 100.000A1: 500000Veces

Información de pedido

Componentes del producto

Transporte y conservación

Transporte de hielo Azul.4℃ conservar en seco protegido de la luz, período de validez12Meses.

Modo de empleo

1. Retire la película de impresión y agregue una solución de cierre adecuada para incubar en el invernadero.20 ~ 60 minutos, oscilando al mismo tiempo, para bloquear los sitios de unión a proteínas no específicas en la membrana.

2. Extraer la membrana del líquido cerrado e incubarla en un invernadero con un líquido de trabajo resistente1 hora, oscilaciones simultáneas; O en28Incubar durante la noche sin oscilar.

3. Agregue una cantidad suficiente de amortiguador de lavado a la película para garantizar que el amortiguador cubra completamente la película. Incubación oscilante ≥5 minutos, reemplazar el amortiguador de lavado y repetir el paso4 a 6Veces. Aumentar el volumen del amortiguador de lavado, el número de lavados y el tiempo de lavado ayudan a reducir la señal de fondo.[nota]:① antes de la incubación, la elución corta de la membrana en el amortiguador de lavado mejorará la eficiencia del lavado. ② como se sugirió en el artículo anteriorHRPEs muy importante marcar la segunda antidilución.

4. PonerHRPEl líquido de trabajo de resistencia secundaria marcado y la membrana incuban en el invernadero1 hora, oscilando al mismo tiempo.

5. Repita los pasos3Para eliminar los no combinadosHRPMarca dos resistencias.[nota]:Membrana yHRPDespués de la incubación de la segunda resistencia de la marca, se debe lavar a fondo.

6. PonerASoluciones yBEl líquido se mezcla en proporciones iguales para preparar un líquido de trabajo. Cadacm²Uso de película0.01~0.1 mLLíquido de trabajo, el líquido de trabajo se puede estabilizar en el invernadero8 horas.[nota]:La exposición a la luz solar u otra luz fuerte puede dañar el líquido de trabajo. para obtener * buenos resultados, guarde este líquido de trabajo en la luz de la botella ámbar; La iluminación común del laboratorio no daña el líquido de trabajo.

7. Incubar la película impresa en el líquido de trabajo5 minutos. retire la película de impresión del líquido de trabajo y colócela en una hoja de plástico o papel plástico limpio (película), absorba el exceso de líquido con un papel absorbente de agua y presione cuidadosamente la burbuja entre la marca y el papel plástico.

8. Coloque la película de impresión envuelta en papel plástico (película) en una caja de película con la proteína hacia arriba y apague todas las luces excepto las adecuadas para la exposición de la película, como la luz de Seguridad roja.[nota]:① la película debe mantenerse seca durante la exposición; ② asegúrese de eliminar el exceso de sustrato de la película y el papel plástico * completamente; ③ durante todo el procesamiento de la película, se utilizan guantes.

9. PonerXLa película óptica se coloca sobre la película. Recomendación * una exposición60 sDespués de eso, el tiempo de exposición se puede ajustar para lograr * buenos resultados. La reacción de Quimioluminiscencia antes de la incubación del sustrato5 ~ 30 minutosEl período es * Fuerte. Esta reacción puede durar varias horas, pero la intensidad disminuirá con el tiempo, y si hay un sustrato expuesto más tiempo después de la incubación, el tiempo de exposición puede necesitar ser prolongado para obtener una señal más fuerte. Si se utiliza un dispositivo de imagen de almacenamiento fosfórico (por ejemploBio-RadSistema de imágenes moleculares) oCCDLa Cámara puede tardar más tiempo en exponerse.[nota]:Cualquier movimiento entre la película y la película puede crear una señal no específica en la película.

10. Desarrollar la película con un desarrollador y fijador adecuados. Si la señal es demasiado fuerte, acortar el tiempo de exposición o quitar la película impresa y reducir la concentración de anticuerpos para volver a detectar.

Precauciones

1. Este producto se utiliza en la investigación experimental científica y no se puede utilizar en el diagnóstico clínico, el tratamiento y otros campos.

2. Para obtener * buenos resultados, es necesario optimizar todos los componentes del sistema, incluyendo el tamaño de la muestra, las concentraciones de primera y segunda resistencia y el tipo de membrana y reactivo cerrado.

3. El uso de este producto es mejor que el uso de la relación de precipitación y color.HRPLa concentración de anticuerpos necesaria para la detección del sustrato es baja. Para optimizar la concentración de anticuerpos, realice un análisis sistemático de impresión puntual.

4. Ningún reactivo cerrado es * bueno para todos los sistemas, por lo que es necesario encontrar el amortiguador cerrado más adecuado para cada sistema de detección de inmunoimpresión. Es posible que el reactivo de bloqueo produzca una reacción cruzada con el anticuerpo, lo que conduce a la aparición de señales no específicas. El cierre del amortiguador también puede afectar la sensibilidad del sistema. Cuando se cambia de un sustrato a otro, a veces se produce una atenuación de la señal o un aumento del fondo, posiblemente porque el amortiguador cerrado no es adecuado para un nuevo sistema de detección.

5. Uso de avidina/.Al utilizar el sistema de detección de biotina, evite usar la leche como reactivo de cierre, ya que la leche contiene biotinas endógenas no cuantitativas que causan señales de alto fondo.

6. Garantizar el volumen de uso del tampón de lavado, el tampón de cierre, la solución de anticuerpos y el líquido de trabajo del sustrato para garantizar que la película impresa esté cubierta por el líquido durante todo el experimento y evitar que la película se seque. Aumentar el uso de amortiguadores cerrados y amortiguadores de lavado puede reducir las señales no específicas.

7. Para obtener * buenos resultados, use una mecedora en el paso de incubación.

8. PonerTween20(Concentración final0,05 a 0,1%)Añadir un amortiguador cerrado y una solución de anticuerpos diluidos para reducir la señal no específica. Uso de productos de alta calidad, como descontaminantes. Se conserva en ampollas con un bajo contenido de peróxido y otras impurezas.

9. No use Azida de sodio como conservante del amortiguador. Azida de sodio esHRPInhibición.

10. Evite el contacto directo entre las manos y la membrana, y use guantes o pinzas limpias durante el experimento.

11. Todos los equipos deben estar limpios y no contaminados con sustancias exóticas. Los instrumentos metálicos (como las tijeras) no deben tener óxido visible. La Roya puede causar formación de manchas y antecedentes altos.

12. La solución de trabajo del sustrato se puede estabilizar a temperatura ambiente.8 horas. la luz solar o cualquier otra luz fuerte puede dañar el sustrato. para obtener * buenos resultados, el líquido de trabajo del sustrato se conserva en un frasco de ámbar y se evitan fugas torrenciales a largo plazo en cualquier luz fuerte, y las fugas torrenciales a corto plazo en la iluminación convencional del laboratorio no dañan el líquido de trabajo.

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