Células de embrioma de ratón atdc5 - Luc marcadas con Luciferasa

Características:

Seguridad: todas las células transferidas por tumores y virus se consideran potencialmente dañinas para la biología y deben operar en una plataforma de bioseguridad secundaria, y preste atención a la protección. todos los residuos líquidos y utensilios que han estado en contacto con esta célula deben ser esterilizados a alta presión antes de ser desechados. Después de recibir la célula, bajo un espejo invertido*Lo bueno es que4XObjetivo(...)Observar el crecimiento de toda la célula.

(1) si la célula no está llena, use75%Rociar con alcohol toda la botella para desinfectarla y ponerla en la Mesa de superbacterias, operar estrictamente estérilmente, abrir la botella de cultivo celular, aspirar el medio de cultivo y cambiarla.10 mlContinuar el cultivo después del medio de cultivo fresco.(dos(...)Si la célula está llena, se puede cultivar de generación en generación. Los pasos específicos son los siguientes:

1. Abandonar el medio de cultivo y usarPBS(sin Calcio,Iones de magnesio) lavado1 - 2Veces.

2. más1 mlLíquido digestivo..0,25% tripsina-0,53 mM EDTA) en el frasco de cultivo y verterlo sobre37Incubadora1 - 3Precalentar durante minutos y luego voltear el frasco de cultivo10 - 30Segundos después, se observa la digestión celular bajo un microscopio invertido, si la mayoría de las células se redondean, se devuelve rápidamente a la Mesa de operaciones, se golpea ligeramente el frasco de cultivo y se añade una pequeña cantidad de * medio de cultivo para terminar la digestión.

3. Presionar6-8 ml/Añadir * medio de cultivo al frasco, mezclar suavemente y aspirar la mitad y distribuirlo en un nuevo frasco de cultivo. Si no se especifica, después de recibir la célula*La segunda transmisión es generalmente una transmisión y dos.

Precauciones:

1, observar que las células están en un espejo de baja potencia..4O5XObjetivo(...)De lo contrario, no se puede juzgar con precisión la densidad de transmisión de las células. Vea la morfología de la célula en10XO20XBajo la lente.

2. el medio de transporte en el frasco no se puede reutilizar,Por favor, cambie por un nuevo medio de cultivo con doble resistencia, después de que la célula se congele,No se puede agregar ningún antibiótico al medio de cultivo.

3Algunas células no se adhieren firmemente a la pared, si se encuentra que las células adheridas se desprenden, se pueden vacunar en una botella nueva después de soplar por centrifugación.

4Después de recibir la célula, si encuentra que el frasco de cultivo está roto, hay derrames de líquido y la célula está contaminada, por favor póngase en contacto con nosotros a tiempo.