Reactivo de transfección 78pei Max 40k

🔍 Resumen del producto

Nombre químico:Polietileno imino lineal, Pei lineal, polietileno imino, lineal, MW 40000， Grado de transfección, pe lineal (peso molecular 40.000)

Número de pedido:78pei40000

Especificaciones:100mg / 500mg / 5g

marcaBIOHUB

CAS:49.553 - 93 - 7

Peso molecular:40.000 (~ 22.000 radicales libres)

Disuelta en:Agua

Indisoluble en:Disolventes orgánicos de uso común (etanol, cetona, tetrahidrofuruokounan)

Apariencia:Sólidos que fluyen libremente de blanco a blanco grisáceo

Tratamiento:Guantes y armarios de ventilación

Almacenamiento:Conservar en seco a temperatura ambiente protegido de la luz

Introducción:

1.Reactivo de transfección 78pei Max 40k（También conocido como Pei 22k en bases libres, es un reactivo de transfección instantánea funcional *, confiable y económico. En la mayoría de los sistemas de expresión hek293 y cho, Pei Max ofrece una alta expresión estable (96 placas de poros a 100l biorreactores). Ahora cada año, más investigadores y empresas utilizan Pei Max para la transfección celular, ya que Pei Max puede esperar a una alta expresión estable y reducir los costos de transfección en un 40% menos que la mayoría de los reactivos de transfección.

2.78pei Max 40k es más fácil de usar que Pei 25k y tiene una mayor eficiencia de transfección que Pei 25k. por lo general, el proceso de transfección Pei 25k generalmente tarda varias horas en completarse, mientras que Pei Max 40k puede completar todo el proceso de transfección en dos horas. Además, Pei 25k contiene un 4 - 11% de propionilo residual, lo que puede obstaculizar la Unión efectiva de la cadena principal del polímero al adn, mientras que el propionilo de Pei Max 40k es fácil de desprenderse, lo que significa que las propiedades de cada lote de productos Pei Max son más estables.

💎 Método de configuración del producto

1. preparación del líquido de almacenamiento (1 mg / ml)

- material: 78pei40000 polvo, agua ultrapura, 1n naoh, película filtrante de 0,1 micras

- pasos:

① tomar 1G de polvo y disolverlo en 900 ml de agua ultrapura, mezclar magnéticamente hasta disolverlo;

② añadir 1n NaOH para ajustar el pH a 6,9 - 7,1 (si se excede el límite, retroceder con 1n hcl);

③ filtración y esterilización con película filtrante de volumen fijo a 1l y 0,1 micras;

④ conservar a 4 ° C después del embalaje, la validez del líquido es de 6 meses y la validez del polvo liofilizado es de 1 año.

2. preparación de líquidos de trabajo

- diluir en una proporción de 1 μg de adn: 1 - 5 μl 78pei40.000 solución de almacenamiento (proporción inicial recomendada de 1: 3);

- diluir el ADN y el PEI con medios libres de suero (como opti - mem) y Dejar reposar a temperatura ambiente durante 10 - 25 minutos para formar un complejo.

📌 Proceso de operación de transfección

(1) transfección de células adherentes

1. vacunación celular: las células se inocularon 24 horas antes de la transfección, con una densidad de confluencia del 70% al 80%, y se reemplazaron por un medio de cultivo que contenía 5% de suero;

2. incubación de compuestos: añadir el complejo ADN - pei a la placa de Petri gota a gota, y incubar durante 4 - 6 horas después de un vórtice suave;

3. cambio de líquido y detección: cambiar el medio de cultivo fresco, la expresión génica se puede detectar después de 7 horas, transmitirse después de 24 horas y agregar medicamentos de detección.

(2) transfección de células suspendidas

1. preparación celular: ajustar la densidad celular a 1 × 10 ⁶ células / ML y cultivar en una mecedora durante 2 - 4 horas;

2. adición de complejos: añadir el complejo ADN - pei directamente al frasco oscilante y cultivar continuamente durante 24 - 72 horas;

3. optimización de amplificación: 24 horas después de la transfección, las células se pueden diluir (1: 2 - 1: 5) para aumentar la producción de proteínas.

⚡Reactivo de transfección 78pei Max 40kPrecauciones clave

1. requisitos de disolución:

- debe disolverse completamente y las partículas no disueltas pueden causar una disminución de la eficiencia de la transfección;

Se recomienda tratar la solución en masa con un tubo centrífuga Nest 5 ml / 14 ML.

2. control del ph:

- el pH debe ajustarse con precisión a 6,9 - 7,1 en la disolución inicial, lo que afecta a la formación de compuestos tanto si es demasiado alto como si es demasiado bajo.

3. Estado celular:

- se recomienda el uso de células de crecimiento logarítmico para evitar daños en la membrana celular por digestión excesiva.

4. control de la toxicidad:

- las células de alta densidad (> 90% de confluencia) deben reducir la dosis de Pei (proporción recomendada de 1: 1).

Para más información sobre el producto, Póngase en contacto con el agente regional de china: Shanghai qifa experimental reactive co., Ltd.

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(nota: el contenido de este artículo se basa en la información pública de la marca y la información convencional de la industria, y prevalecerá el documento de información de la marca).

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