2 x Mezcla Taq PCR Plus

Descripción del producto

2 x Mezcla Taq PCR Plus síPCRPremezcla de reacción, que contieneTaq ADN polimerasa,dNTP, amortiguador de reacción,cargando tinteOtros ingredientes, cuando se usa, solo hay que tomar la cantidad adecuada de este producto, añadir plantilla y primer, y añadirddH2OComplementar el volumen para que la concentración del sistema de reacción sea 1× se puede hacerPCRReacción.PCRProducto3 "Sobresale la banda finalALa base, después de la purificación, se puede utilizar directamenteEl T/AClonación.

Este producto utiliza un sistema enzimático compuesto, es decirADN de TaqPolimerasa y3 "5 "La sinergia de la proteína activa de la enzima de extracción puede lograr una amplificación de alto rendimiento bajo un sistema de amortiguación de reacción optimizado, que puede amplificar ≤7 kbdeADNFragmentos y compatibles30%-70% GCPlantilla de contenido. En comparación con la tradiciónTaqEnzima..WT-Taq), su tasa de extensión aumenta2 - 4Veces, acortando significativamente el ciclo de reacción.

Este producto contiene dos tintes,PCRNo es necesario agregar más después de completar la reacciónamortiguador de cargaSe puede realizar directamente la digestión, y durante la digestión aparecerán dos bandas indicadoras, azul y rojo. El tinte no afectaPCREficiencia de amplificación, pero para la necesidad dePCRLos experimentos en los que los productos se someten a análisis ópticos como la absorción y la fluorescencia se recomiendan antes del análisis.PCREl producto se purifica o se utiliza sin colorantesPCRPremezcla.

Información de pedido

Transporte y conservación

Transporte de hielo Azul.-20Grados Celsius conservación, período de validez24Meses.

Modo de empleo

1. convencionalPCRSistema de reacción (operación sobre hielo)

(1) La concentración final recomendada del primer es0,2 a 0,4μMCuando el efecto no es bueno, se puede estar en0,1 a 1μMAjustar dentro del rango de concentración;

(2) Diferentes plantillas * Las concentraciones de buenas reacciones son diferentes para 50 μLEl sistema es un ejemplo: la plantilla es el GenomaADNCuando, el uso generalmente recomendado es10~200 ng; cuando la plantilla es un plasmídeo o un virusADNCuando, el uso generalmente recomendado es10 pg ~ 5 ng. cuando la cantidad de plantilla es excesiva, es fácil causar amplificación no específica.

2. Método de tres pasosPCRProcedimiento de reacción

3. Método de dos pasosPCRProcedimiento de reacción

(3) Esta condición de predisposición es adecuada para la gran mayoría de las reacciones de amplificación, para algunas plantillas complejas, como: líquido bacteriano, colonias (especialmente levadura).PCRAmplificación, el tiempo de predisposición se puede prolongar adecuadamente hasta10 minutosPara mejorar el efecto de predisposición;

(4) La temperatura de recocido depende del primerTmConfiguración de valor. Si es necesario, se recomienda buscar la temperatura adecuada para combinar el primer con la plantilla estableciendo un gradiente de temperatura. Además, la temperatura de recocido determina directamente la especificidad de la amplificación, si se encuentra que la especificidad de la amplificación es pobre, la temperatura de recocido se puede aumentar adecuadamente.

(5) En cuanto a la tasa de extensión, cuando la longitud del fragmento de destino no supera3 kbCuando se recomienda usar15 sec/ kb; cuando la longitud del fragmento de destino es mayor que3 kbCuando se recomienda usar30 segundos/kb. La tasa de extensión está relacionada con la complejidad de la plantilla, y si la tasa de producción es baja, el tiempo de extensión se puede aumentar adecuadamente.

Precauciones

1. Este producto se utiliza en la investigación experimental científica y no se puede utilizar en el diagnóstico clínico, el tratamiento y otros campos.

2. En este producto2 x Mezcla Taq PCR PlusEs necesario derretir * Después de todo el uso para evitar concentraciones desiguales de iones.

3. Se recomienda preparar todos los componentes de reacción sobre hielo y finalmente agregar2 x Mezcla Taq PCR Plus.

4. El uso de plantillas genómicas para la amplificación de fragmentos más largos requiere una purificación de alta calidad.ADNPlantilla que se puede mejorarPCRTasa de éxito.

5. Los productos amplificados de este producto se pueden utilizar paraEl T/AClonación. Debido a que este producto contieneCarga del tinte,PCREl producto debe ser cortado y recuperado antes de que pueda eliminarse completamente.Carga del tinte.

6. Se recomienda utilizar el método de teñido por burbuja para teñir después de la galvanoplastia. el método de teñido por pegamento puede causar la dispersión de la banda de indicación roja, lo que no es propicio para la indicación de la banda y no tiene ningún efecto en la banda de indicación Azul. Banda Azul enTAE del 1%La tasa de migración en el amortiguador es aproximadamente igual a1500 bp, banda roja enTAE del 1%La tasa de migración en el amortiguador es aproximadamente igual a100 pb.

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