Interferón - gamma de ratón recombinante (ifn - gamma)

Antecedentes del producto:

CitocinasIFNGamma protege a las células de la infección viral y pertenece a la familia de interferones. Un gran número de estudios han demostrado que,IFNGamma secreción de tipo celular desencadenada por antígenos, incluyendoTCélulas, infantilesCD4+ TCélulas, macrófagos, células dendríticas yBCélulas.gamma de IFNDesempeña un papel importante en la activación de los macrófagos contra una variedad de dianas microbianas y es una molécula multiefecto relacionada con los mecanismos antiproliferativos, apoptóticos y antitumorales. Debido a que esta citoquina de efecto se considera el principal factor de efecto de la inmunidad, se ha utilizado para tratar múltiples enfermedades.

Características del producto:

Más sencillo: no se necesita una reacción de antígenos y anticuerpos, el método de detección basado en reacciones químicas de moléculas pequeñas es simple y eficiente, y la reacción tarda solo unos minutos.

Más sensible: no se necesitan anticuerpos, los tintes de detección son solo 1 / 500 de los anticuerpos brdu, que se propagan fácilmente, incluso las células proliferantes individuales se pueden detectar con precisión.

Más rápido: sin pasar la noche, se ahorran pasos complejos y engorrosos en la respuesta de antígenos y anticuerpos, y solo se necesitan 2,5 horas para completar todo el ciclo de detección.

Más preciso: no se necesita desnaturalización del ADN (ácido, pirólisis, enzima, etc.), lo que puede evitar eficazmente el daño de la muestra causado por la desnaturalización y garantizar que el borde del núcleo sea claro y completo.

Más compatible: casi sin daño a la muestra, más fácil de marcar al mismo tiempo que múltiples anticuerpos o proteínas fluorescentes, capaz de detectar simultáneamente otras características de la célula

Pasos experimentales:

1. Cultivo celular

(con la placa de 6 agujeros como referencia, otros agujeros de cultivo se pueden ajustar adecuadamente de acuerdo con las necesidades del experimento.) las células 1x10 Mu 5 - 3x10 Mu 6 por agujero se inoculan en la placa de 6 agujeros y se cultivan hasta la etapa normal de crecimiento.

Nota: la cantidad de vacunación celular se puede ajustar de acuerdo con el tamaño de la célula, la tasa de crecimiento y el ciclo de tratamiento experimental.

2. intervención o tratamiento celular

(opcional) las células pueden ser tratadas con medicamentos u otras intervenciones de estímulo según las necesidades del experimento.

3. cultivo de cocultura celular

De acuerdo con los resultados del experimento previo, la solución se diluye proporcionalmente con un medio de cultivo celular o se añade proporcionalmente una solución adecuada al medio de cultivo de placa de poros para incubar con las células, mientras que se establece un grupo sin adición como grupo de control negativo. Cada agujero se añade al medio de cultivo diluido preparado para incubar durante 2H y eliminar el medio de cultivo antiguo.

Precauciones:

1. debido al uso de una placa de 96 agujeros para la prueba, si su célula quiere mantenerse durante 48 horas o más, se recomienda no escatimar los agujeros laterales circundantes de la placa de 96 - agujeros, que no se pueden usar, y se recomienda agregar un PBS esterilizado para saturar la humedad de los 64 agujeros intermedios. Debido a que el agua de los poros laterales se evapora rápidamente durante el cultivo celular, el medio de cultivo y los medicamentos en su interior se concentran, y el Estado de la célula es complejo.

2. el disolvente se solidificará a baja temperatura. antes de usarlo, póngalo a temperatura ambiente o déjelo en un baño de agua a 20 - 25 ° C durante un momento hasta que se disuelva por completo.

3. por lo general, la protección contra la luz a 4ºC es efectiva durante dos semanas, se conserva a - 20 grados durante mucho tiempo, evita la congelación y el deshielo repetidos, se empaqueta en pequeñas dosis y se envuelve en bolsas de protección contra la luz o papel negro y papel de aluminio para evitar la descomposición, especialmente cuando se convierte en verde grisáceo.

4. la disolución de formazan se puede incubar en un baño de agua a 37 ° C para facilitar la disolución cuando se congela o produce precipitación, y debe usarse después de que se disuelva todo y se mezcle bien.

5. al incubar, debe protegerse de la luz.

6. es cancerígeno, tenga cuidado al usarlo y tenga las condiciones para llevar ese tipo de guantes de película transparente. Los preparados deben ser estériles y sensibles a las bacterias.

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