Botella de medio de cultivoLa apertura es el primer eslabón de los experimentos microbianos y el cultivo celular, y su estandarización operativa determina directamente la tasa de éxito de los experimentos posteriores: el funcionamiento inadecuado puede causar contaminación del medio de cultivo, falla de la composición e incluso riesgos para la seguridad de los experimentadores. Los principios básicos deben seguir de cerca el "control estéril" y la "seguridad operativa", y establecer un proceso estandarizado completo desde la preparación hasta el final.

La preparación previa es la base de la garantía estéril. Es necesario confirmar el entorno experimental antes de la operación: el Gabinete de bioseguridad o la Mesa de trabajo ultralimpia deben abrirse con antelación para la desinfección ultravioleta durante 30 minutos, y la ventilación debe realizarse después de 20 minutos; Los experimentadores deben usar guantes estériles y ropa experimental, y si se trata de cultivo de microorganismos fuertes, también deben usar máscaras y gafas protectoras. Al mismo tiempo, verifique el Estado de la botella del medio de cultivo: observe si el cuerpo de la botella está roto, si la película de sellado está intacta, si la etiqueta marca claramente el tipo de medio de cultivo, la fecha de esterilización y la fecha de caducidad, si excede la fecha de caducidad o si el medio de cultivo está turbio, la precipitación es anormal, etc., no es necesario abrirlo.

La operación de apertura se realiza con precisión en tres pasos. El primer paso es la desinfección de la superficie, colocando la botella de medio de cultivo en el Centro de la Mesa de trabajo, utilizando una gasa estéril sumergida en alcohol médico al 75%, limpiando la superficie del cuerpo de la botella y la tapa de la botella en espiral con la boca de la botella como centro, centrándose en la desinfección de la conexión entre la tapa de la botella y el cuerpo de la botella, evitando la introducción de polvo o microorganismos con la operación. Después de la desinfección, espere a que el alcohol se volatilice por completo para evitar que los residuos de alcohol se mezclen en el medio de cultivo para afectar el crecimiento celular o microbiano.

El segundo paso es abrir la tapa de la botella, manteniendo la postura de "inclinar la boca hacia abajo" durante todo el proceso para evitar que los contaminantes en el aire caigan cuando la boca de la botella está hacia arriba. Sostener la parte media e inferior del cuerpo de la botella en una mano y pellizcar el borde de la tapa con el pulgar y el dedo índice en la otra mano, girar lentamente en sentido contrario a las agujas del reloj, girar hasta que la tapa de la botella se afloje, no quitar todo, mantener el Estado de conexión de 1 - 2 vueltas de hilo, liberar lentamente la presión que puede producirse en la botella - especialmente la botella de medio de cultivo después de la esterilización a alta presión, puede formar presión negativa en el interior después de la esterilización a alta temperatura, y la apertura repentina puede conducir fácilmente a la rápida entrada de aire exterior.

El tercer paso es conectar la desinfección secundaria de la boca de la botella con la operación. después de quitar completamente la tapa de la botella, inmediatamente tome una nueva gasa estéril con pinzas estériles para sumergirse en alcohol, limpie rápidamente el interior de la boca de la botella y los hilos, y luego coloque la tapa de la botella boca boca boca boca boca boca boca boca boca abajo en el área de operación estéril (la tapa de la botella está boca hacia arriba para evitar la contaminación por contacto). Después de abrir la botella de medio de cultivo, es necesario realizar la operación de embalaje o vacunación lo antes posible. si no se utiliza temporalmente, es necesario envolver la boca de la botella con una película de sellado estéril y colocarla en un refrigerador a 4 ° C para refrigerarla. el tiempo de refrigeración no excederá de 24 horas. es necesario repetir los pasos de desinfección de la boca de la botella antes de reutilizarla.

El cierre de la operación es tan crítico como el manejo de anomalías. Después de su usoBotella de medio de cultivoSi contiene el medio de cultivo restante, debe agregar un desinfectante que contenga cloro para esterilizarlo antes de descartarlo; Si se volca accidentalmente la botella de medio de cultivo no abierta durante la operación, es necesario cubrir la zona contaminada con algodón desinfectante, Rociar el desinfectante y dejarla reposar durante 30 minutos antes de limpiarla. Al mismo tiempo, se establecen registros de operación para marcar el tiempo de apertura, el usuario y el Estado del medio de cultivo, proporcionando una base para la trazabilidad experimental.

La "apertura correcta" del frasco de Medio no es una simple apertura física, sino una operación concreta del concepto estéril. Cada detalle, desde la desinfección ambiental hasta la protección de la boca de la botella, es una línea de defensa importante para garantizar la precisión y seguridad de los experimentos, especialmente en áreas de alta precisión como la terapia celular y la farmacia microbiana, el proceso de apertura estandarizado es la premisa básica para resultados experimentales confiables.