Alcance 1: esta norma estipula las condiciones y métodos de prueba de plancton en salas estériles y áreas limpias de la industria farmacéutica.

Esta norma se aplica a la prueba y verificación ambiental de bacterias planctónicas en salas estériles y áreas limpias de la industria farmacéutica, salas estériles o áreas locales de purificación de aire, incluidas mesas de trabajo limpias.

¿2 estándar de referencia: ¿ GB / T 16293? 2010

Apéndice del Código de gestión de la producción de medicamentos (revisado en 1998).

3 Criterios

Limpieza	Número de microorganismos vivos / m3
Nivel 100	5
Nivel 10.000	100
Nivel 100.000	500

4 métodos de prueba

4.1 Resumen de la metodología

El método utilizado en este espécimen es el método de concentración de conteo. Es decir, mediante la recogida de partículas biológicas suspendidas en el aire en un medio especializado (selección de medios que puedan demostrar que son capaces de apoyar el crecimiento microbiano), se permite que se reproduzcan al recuento de colonias visibles después de varios tiempos y condiciones de crecimiento adecuadas para determinar la concentración microbiana de la Cámara limpia.

4.2 Responsabilidades y capacitación del personal

Los probadores de las Salas estériles deben llevar a cabo esta formación y obtener las calificaciones correspondientes antes de cumplir con sus responsabilidades en las pruebas de las Salas estériles, que incluyen los conocimientos sanitarios involucrados y los conocimientos microbiológicos básicos.

Los probadores de las Salas estériles deben elegir una forma de vestir adecuada a los requisitos de limpieza del aire de las operaciones de producción, y la ropa exterior no se puede llevar a áreas por encima del nivel 100.000.

4.3 instrumentos, ayudas y medios de cultivo

Elija un muestreador adecuado de bacterias planctónicas, incluyendo una bomba de extracción de aire sin aceite, un flujo de aire más bajo y un mayor flujo de muestreo para garantizar que la distribución del agua en la superficie del medio de cultivo se seque.

Esta prueba requiere los siguientes instrumentos, equipos auxiliares y medios de cultivo:

Muestreador de bacterias planctónicas;

B) placas de petri;

C) olla de desinfección a presión;

D) medios de cultivo;

E) incubadora termostática;

4.4 principio del muestreador de bacterias planctónicas

Los muestreadores de bacterias planctónicas generalmente adoptan el mecanismo del método de impacto y se pueden dividir en muestreadores de costura, muestreadores centrífuga o de agujero de aguja. El muestreador de costura inhala el flujo de aire por un ventilador interno, a través de la placa de costura del muestreador, el aire recogido se expulsa y golpea la superficie del medio de cultivo de la placa lenta, y las partículas microbianas vivas adheridas se cultivan para formar colonias. Debido a la alta velocidad de rotación del ventilador interno, el flujo de aire entra y sale de la parte delantera y trasera del muestreador de talento. bajo la acción de la fuerza centrífuga, las partículas microbianas vivas en el aire tienen tiempo suficiente para impactar en la tira de cultivo sólido, y las partículas microbianas vivas adheridas forman colonias después del cultivo. El muestreador de agujeros de aguja es un flujo de aire inhalado a través de una tapa metálica, en la que hay pequeños agujeros especiales densamente mecanizados, que golpean directamente el aire fino recogido a la superficie del medio de cultivo plano a través de un ventilador, y las partículas microbianas de materia viva adheridas se forman colonias después del cultivo y la formación.

4.5 puntos clave de la prueba

4.5.1 los instrumentos de prueba deben verificarse periódicamente de acuerdo con el ciclo de verificación del instrumento. Se utilizarán instrumentos calificados y válidos.

4.5.2 cuando el instrumento de prueba no entre en la zona probada, si es necesario, limpie primero la superficie o prepare y almacene en el interior estéril correspondiente (proteja el instrumento con una cubierta protectora u otra cubierta adecuada).

4.5.3 cuando se utilice papel interior estéril de grado 100, se debe cubrir con una cubierta transparente y sin polvo, y no se puede usar el borrador del lápiz en el interior estéril de grado 100.

4.5.4 al usar el instrumento de prueba, se debe operar estrictamente de acuerdo con las instrucciones.

4.5.4.1 el instrumento se enciende y después de calentarse a la estabilidad, se puede corregir el instrumento de acuerdo con las instrucciones, mientras se verifica el flujo de muestreo y se establece el tiempo de acuerdo con la cantidad de muestreo.

4.5.4.2 los puertos de muestreo deben fabricarse con materiales fáciles de desinfectar y con propiedades químicas estables.

4.5.4.3 está estrictamente prohibido filtrar el tubo de muestreo, y la pared interior debe ser lisa.

4.5.4.4 la longitud del tubo de muestreo debe fijarse en función de la altura del punto de medición y minimizar la flexión.

4.6 placas de Petri

4.6.1 generalmente se utilizan placas de petri con especificaciones de Phi 90 mm x 15 mm. Se puede seleccionar la placa de Petri adecuada de acuerdo con el muestreador seleccionado.

4.6.2 tiras de cultivo sólidas utilizadas en muestreadores centrífuga

4.7 medios de cultivo

El medio de cultivo de Agar de caseína de soja (tsa) o el medio de cultivo de Shashi (sda) u otros medios de cultivo reconocidos y verificados por el usuario.

4.8 incubadora termostática

La incubadora termostática debe ser probada regularmente.

4.9 pasos de prueba;

4.9.1 las superficies de los instrumentos y placas de Petri deben desinfectarse estrictamente antes de la prueba.

4.9.1.1 el muestreador se esteriliza con un desinfectante de la habitación desinfectante antes de entrar en la habitación probada y se utiliza para el muestreador de la Sala estéril de grado 100.

Se debe colocar en la habitación medida con antelación.

4.9.1.2 limpiar la superficie exterior de la placa de petri con un desinfectante.

4.9.1.3 antes del muestreo, desinfecte la cubierta superior del muestreador, la placa giratoria y el interior y exterior de la cubierta con un desinfectante, termine el muestreo y rocíe suavemente la pared interior y la placa giratoria de la cubierta con un desinfectante.

4.9.1.4 los puertos de muestreo y los tubos de muestreo deben ser esterilizados a alta temperatura antes de su uso. Si se Desinfecta la pared exterior e interior del tubo de muestreo con un desinfectante, se debe verter y secar el líquido residual en el tubo.

4.9.1.5 los muestreadores deben llevar ropa de trabajo correspondiente a la zona limpia medida, desinfectar las manos con desinfectante o operar con guantes estériles antes de colocar o cambiar la placa de Petri en la Plataforma giratoria.

4.9.1.6 después de la desinfección, el instrumento de muestreo no se coloca en la placa de petri, se abre el muestreador de bacterias planctónicas, se evapora el desinfectante residual en el instrumento durante no menos de 5 minutos, y se revisa el flujo y se ajusta el tiempo de configuración de acuerdo con la cantidad de muestreo.

4.9.1.7 cerrar el muestreador flotante, colocarlo en una placa de Petri y taparlo.

4.9.1.8 después de colocar el puerto de muestreo en el punto de muestreo, abra el muestreador de bacterias planctónicas para el muestreo.

4.10 formación

4.10.1 después de tomar todo el muestreo, la placa de Petri se invirtió en una incubadora termostática para cultivarla.

4.10.2 después de tomar muestras, los cultivos preparados con el medio de cultivo de caseína de soja (tsa) se cultivan en una caja de cultivo de 30 ° C a 35 ° C durante no menos de 2 días; después de tomar muestras, las placas de cultivo preparadas con el medio de cultivo de Shashi (sda) se cultivan en una caja de cultivo de 20 ° C a 25 ° C durante no menos de 5 días.

4.10.3 cada lote de medios de cultivo debe tener un ensayo controlado para comprobar si el cuerpo básico del cultivo está contaminado. Se pueden seleccionar tres placas de Petri por lote para el cultivo controlado.

4.11 recuento de colonias

4.11.1 contar, marcar o puntuar directamente todas las colonias en la placa de Petri a simple vista, y luego comprobar con una lupa de 5 a 10 veces si hay omisiones.

4.11.2 si hay dos o más colonias superpuestas en la placa, todavía se pueden contar con dos o más colonias cuando se puede distinguir.

4.12 precauciones

4.12.1 antes de su uso, se debe comprobar cuidadosamente la calidad de cada placa de petri, y si el medio de cultivo y la placa de Petri están deteriorados, dañados o contaminados, no se pueden usar.

4.12.2 se registran en detalle los medios de cultivo, las condiciones de cultivo y otros parámetros.

4.12.3 debido a la gran variedad de bacterias y las grandes diferencias, generalmente se observa cuidadosamente con luz transmitida en la superficie de la placa de Petri o la superficie real al contar, no se deben omitir las colonias que crecen en el borde de la placa de petri, y se debe distinguir entre las colonias o los precipitados en el medio de cultivo, Y si es necesario, se identifica con un microscopio.

5 Reglas de prueba

5.1 condiciones de ensayo

Antes de la prueba, es necesario realizar una prueba previa de los parámetros relacionados con la Sala estéril, que probará las condiciones ambientales de las partículas suspendidas, por ejemplo: esta prueba previa puede incluir:

A) pruebas de temperatura y humedad relativa. La temperatura y la humedad relativa de la Sala estéril deben ser adecuadas a sus requisitos de producción y proceso.

Debe (cuando no hay requisitos especiales, es apropiado controlar la temperatura entre 18 ° C y 26 ° c, y la humedad relativa entre 45% y 65%). Al mismo tiempo lleno

Alcance del uso de instrumentos de prueba completos;

B) prueba de la prueba del volumen de aire o la velocidad del viento de entrega en interiores, o prueba de la diferencia de presión;

C) prueba de fugas del filtro

5.1 Estado de la prueba

Tanto los Estados estáticos como los dinámicos se pueden probar.

En las pruebas estáticas, no debe haber más de dos probadores en interiores.

Antes de la prueba de plancton, se determina que la Sala estéril (área) depende del usuario para decidir si se necesita desinfección previa.

Las pruebas de plancton deben indicar el Estado utilizado en las pruebas y el número de probadores en interiores.

5.3 tiempo de prueba

5.3.1 en el caso de las pruebas vacías o estáticas a, para las Salas estériles de flujo unidireccional, las pruebas deben comenzar no menos de 10 minutos después del tiempo normal de funcionamiento del sistema de aire acondicionado purificador. Para las Salas estériles de flujo no unidireccional, la prueba debe comenzar no menos de 30 minutos después del tiempo normal de funcionamiento del sistema de purificación. En la prueba b estática, la limpieza del flujo unidireccional es (área), y la prueba debe comenzar después de que el operador de producción evacue el sitio y pase por 10 minutos de autolimpieza; Para las Salas estériles no unidireccionales, las pruebas deben comenzar después de que los operadores de producción evacuen el lugar y pasen 20 minutos de autopurificación.

5.3.2 en el momento de la prueba dinámica, se debe registrar la hora de inicio de la producción y la hora de la prueba.

5.4. cálculo de la concentración de plancton

5.4.1 número de puntos de muestreo y su disposición

5.4.1.1 número de puntos de muestreo menos

La ubicación del punto de muestreo de plancton se puede consultar con GB / t16292 - 2010.

A) la ubicación del punto de medición en el área de Trabajo está a unos 0,8 a 1,5 m del suelo (ligeramente por encima de la superficie de trabajo).

B) la posición del punto de medición de la salida de aire sale de la superficie de suministro de aire a unos 30 cm.

C) se pueden agregar puntos de medición en el equipo clave o en el alcance de las actividades de trabajo clave.

5.4.2 pequeñas cantidades de muestreo

La cantidad de pequeñas muestras de bacterias planctónicas por vez se muestra en la tabla 1.

Cuadro 1 pequeñas cantidades de muestreo

Limpio	Cantidad de muestreo L / vez
Nivel 100	1000
Nivel 10.000	500
Nivel 100.000	100
Nivel 300000	100

5.4.3 número de muestras

Cada punto de muestreo generalmente toma muestras una vez.

5.4.4 precauciones de muestreo

5.4.4.1 para la Sala estéril de flujo unidireccional o la salida de aire, la salida de muestreo del muestreador debe estar en la dirección correcta del flujo de aire; Para la Sala estéril de flujo no unidireccional, la boca de muestreo está hacia arriba.

5.4.4.2 al organizar los puntos de muestreo, se debe tratar de evitar al menos la salida de aire de retorno con partículas de polvo más concentradas.

5.4.4.3 al tomar muestras, los probadores deben pararse en el lado del viento bajo de la boca de muestreo y moverse lo menos posible.

5.4.4.4 tomar todas las medidas para evitar la contaminación del proceso de muestreo y otras posibles contaminaciones de las muestras.

5.4.4.5 cuando se utilizan para la inspección, para evitar los efectos del proceso de transporte o manipulación de la placa de petri, se debe realizar una prueba de control negativo al mismo tiempo, tomando una placa de Petri de control cada vez o en cada área, operando de la misma manera que la placa de petri, pero no exponiendo la placa de petri, y Luego ponerla en la Caja de petri con la placa de Petri muestreada (tsa o sda), y el resultado debe crecer estérilmente.

5.5 registros

El informe de prueba debe incluir lo siguiente:

A) el nombre y la dirección del testador, la fecha de la prueba;

B) base de la prueba

C) la ubicación plana de la Sala estéril de prueba (marque la ubicación plana de la zona adyacente si es necesario);

D) descripción del instrumento de prueba y su método de prueba: incluye las condiciones del entorno de prueba, el número de puntos de muestreo y el plano de disposición, el número de pruebas, el flujo de muestreo o los posibles cambios en el método de prueba, el certificado de verificación del instrumento de prueba, etc.; Si se trata de una prueba dinámica, también se registrará el número y la ubicación de los operadores en el lugar, el equipo y la cantidad y ubicación de los operadores en el lugar;

E) resultados: incluidos todos los cálculos estadísticos.

5.6 cálculo de los resultados

5.6.1 el número de colonias de cada placa de Petri se obtiene mediante el método de recuento.

5.6.2 el cálculo de la concentración media de bacterias planctónicas en cada punto de medición se muestra en la fórmula (1).

¿Concentración media (individual / m3) = número de colonias / cantidad de muestreo???????? (1)

Ejemplo 1: si el número de muestras en un punto de medición es de 400l y el número de colonias es de 1, entonces:

Concentración media = 1 / 0,4 = 2,5 / m3

Ejemplo 2: si el número de muestras en un punto de medición es de 2M3 y el número de colonias es de 3, entonces:

Concentración media = 3 / 2 = 1,5 / m3

5.7 Evaluación de los resultados

5.7.1 la concentración media de bacterias planctónicas en cada punto de medición debe estar por debajo de los límites de concentración de bacterias en los criterios de evaluación seleccionados.

5.7.2 en el ensayo estático, si la concentración media de bacterias planctónicas en un punto de medición excede el estándar de evaluación, se debe volver a muestrear dos veces, y los resultados de ambas pruebas están calificados para considerarse que se cumplen.

5.8 vigilancia diaria

Para el monitoreo de bacterias planctónicas, es apropiado establecer un flujo de aire con límites de corrección y alerta que sea paralelo y aerodinámico en una sola dirección y perpendicular a la dirección del flujo de aire para garantizar que la concentración microbiana en la Cámara estéril esté controlada. Se debe examinar periódicamente la carga microbiana y la eficacia de los desinfectantes, no para el análisis de tendencias. Este método se puede utilizar tanto para el monitoreo estático como dinámico.

Para la frecuencia de muestreo de plancton, se debe considerar que debe modificarse si se producen las siguientes situaciones, y también se debe determinar la frecuencia de detección de otros artículos al evaluar las siguientes situaciones:

- - exceso continuo de corrección y límites de alerta;

- - el tiempo de cierre es más largo de lo esperado;

- - durante la producción, el sistema de purificación de aire realiza cualquier mantenimiento importante;

- - a menudo se hacen registros para proyectar datos tendenciosos;

- - cambios en los protocolos de desinfección;

- - contaminación biológica, etc.;

- - cuando el equipo de producción tiene un mantenimiento importante o un aumento del equipo;

Cuando hay cambios importantes en la distribución regional de la estructura de la Sala estéril.

Zhejiang sujing Purification Equipment co., Ltd.Situado en la ciudad de daoxiu, Distrito de shangyu, ciudad de shaoxing, Provincia de zhejiang, es un fabricante en la industria de equipos de purificación en el este de china. De acuerdo con la norma iso14644 - 1, la norma nacional gb50073 - 2001 y los requisitos de la norma nacional gmp, se pueden diseñar, construir, probar y servicios técnicos de ingeniería de sistemas de purificación de aire para microelectrónica, biomedicina, quirófanos hospitalarios, cables de fibra óptica, alimentos y bebidas, instrumentos de precisión, semiconductores y aplicaciones de nuevos materiales.
La compañía se dedica principalmente a la serie de mesas de trabajo de purificación, la serie de duchas de aire, la serie de gabinetes de ventilación y la serie de gabinetes de bioseguridad.Ampliamente utilizado en medicina y salud, electrónica, farmacéutica, biología, alimentos, Agricultura y silvicultura, ganadería y veterinaria, inspección y cuarentena, aeroespacial, fabricación de automóviles, instrumentos de precisión, universidades e instituciones de investigación científica, goza de una alta reputación en el mercado y el sudeste asiático.
Zhejiang sujing Purification Equipment co., Ltd. sirve de todo corazón a los consumidores y distribuidores y tomará los productos; Servicio humanizado; Barato; ¡¡ bienvenido sinceramente a unirse!