Microscopio confocal de luz blancaSe trata de un equipo microscópico de alta precisión que combina la tecnología de imágenes de enfoque común con la iluminación de luz blanca, que puede realizar imágenes tridimensionales de alta resolución y alto contraste de la muestra. su principio central de trabajo gira en torno al diseño del Camino óptico de enfoque común y la imagen multibanda de la fuente de luz blanca, que es la siguiente:
I. fundamentos de la estructura básica
Microscopio confocal de luz blancaLos componentes centrales incluyen módulos de fuente de luz blanca (generalmente lámparas halógenos, fuentes de luz compuestas led), grupos de apertura de agujeros de aguja, espejos de escaneo, lentes objetivo, sistemas de División de luz y detectores de imágenes, de los cuales la apertura de agujeros de aguja es un componente clave para lograr imágenes de enfoque común.
2. proceso de transmisión e imagen de la ruta óptica
La fuente de luz emite una luz mixta de espectro continuo con una fuente de luz blanca colimada, que se procesa con una lente colimada para formar un haz de luz paralelo, y luego cambia la dirección del Camino óptico a través de un espectrómetro (semitransparente y semiespejo) para guiar el objetivo.
Después de que el haz paralelo de irradiación de la muestra y excitación de la señal se enfoca a través del objetivo, se forma un pequeño punto de luz que se proyecta sobre la superficie de la muestra. Diferentes partes de la muestra reflejan, dispersan o absorben la luz de diferentes bandas de la luz blanca, en la que las señales de luz reflejadas / dispersas regresan a lo largo del camino de luz original y vuelven a pasar por el objetivo para entrar en el sistema de División de luz.
El papel de selección del agujero de la aguja de enfoque común es el eslabón central de la tecnología de enfoque común:
La señal óptica devuelta del plano focal de la muestra, reflejada por el espectrómetro, puede entrar con precisión en el detector posterior a través del agujero de la aguja de enfoque común;
Por su parte, la luz dispersa fuera del plano focal (señal en la zona no enfocada), que no puede pasar por el agujero de la aguja debido a la divergencia del camino óptico, será interceptada por el deflector del agujero de la aguja y no podrá participar en la imagen.
Este proceso realiza el efecto de "corte óptico" y elimina la interferencia de fondo del plano no focal.
La División de la luz de la señal y la detección de la señal de luz blanca a través del agujero de la aguja entrarán en el módulo de División de la luz, que divide la luz blanca por longitud de onda a través de filtros o rejillas (como canales rojos, verdes, azules en la banda de luz visible), y las señales de luz de diferentes bandas son recibidas y convertidas en señales eléctricas por los detectores correspondientes, respectivamente.
La reconstrucción de la imagen y la presentación del espejo de escaneo controlarán el punto de enfoque para hacer un escaneo bidimensional punto por punto y línea por línea en la superficie de la muestra, el detector recogerá simultáneamente la señal de cada punto de escaneo, y luego el sistema informático convertirá la señal eléctrica en píxeles y la empalmará en imágenes bidimensionales; Si se escanea capa por capa a lo largo del eje Z (dirección de profundidad de la muestra), también se puede lograr la reconstrucción estructural tridimensional de la muestra a través de la superposición de imágenes bidimensionales de varias capas.
3. características técnicas del enfoque común de la luz blanca
En comparación con el microscopio de enfoque común láser, el enfoque común de luz blanca no requiere múltiples fuentes de luz láser, puede lograr imágenes multibanda a través de una sola fuente de luz, reduciendo el costo del equipo y la complejidad del camino óptico;
Basado en las características espectrales amplias de la luz blanca, se puede obtener información óptica de las muestras en diferentes bandas de luz visible al mismo tiempo, lo que es más adecuado para la observación de imágenes de pigmentos naturales y muestras sin etiqueta;
El mecanismo de selección del agujero de la aguja de enfoque común hace que su resolución y contraste de imagen sean mucho más altos que el de un microscopio de luz blanca ordinario, y puede lograr una tomografía computarizada tridimensional no destructiva.