El principio del kit de Elisa (inmunoanálisis enzimático) se basa principalmente en la Unión específica del antígeno al anticuerpo y la catálisis de la enzima, que hace que el sustrato se coloree a través de reacciones químicas, y luego se realiza un análisis cualitativo o cuantitativo en función de la profundidad del color. Los siguientes son varios tipos comunes de principios de kits elisa:
Método de sándwich de doble anticuerpo
Principio: utilizando dos anticuerpos contra diferentes determinantes de antígenos, uno se envuelve primero en la superficie de un portador sólido, como un microporos de poliestireno, para capturar antígenos, conocido como anticuerpos capturados. Después de agregar la muestra a detectar, el antígeno en la muestra se unirá específicamente al anticuerpo capturado en el vector de fase sólida. A continuación se añade otro anticuerpo marcado con enzima que puede unirse a otro Epítopo diferente del antígeno que se ha unido al anticuerpo capturado para formar un complejo inmunológico de "anticuerpos - antígenos - anticuerpos marcados con enzima". Finalmente, se añade el sustrato de la enzima, que cataliza la reacción química del sustrato para producir cambios de color, y la profundidad del color es proporcional al contenido de antígenos en la muestra.
ámbito de aplicación: se utiliza comúnmente para detectar antígenos macromoleculares, como proteínas, péptidos, etc., y es ampliamente utilizado para detectar antígenos patógenos, marcadores tumorales, etc.

Método indirecto
Principio: primero se envuelve el paquete de antígenos en un portador de fase sólida, y luego se añade la muestra que contiene anticuerpos a detectar, y los anticuerpos en la muestra se unen específicamente al antígeno en el portador de fase sólida. Después de lavar y eliminar la sustancia no unida, se añade el anticuerpo secundario de la inmunoglobulina humana o animal marcada por la enzima, que se une a anticuerpos específicos que se han unido al antígeno para formar un complejo de "antígeno - anticuerpo - anticuerpo estándar enzimático". Después de agregar el sustrato, el sustrato catalítico enzimático se colorea, y la profundidad del color está relacionada con el contenido de anticuerpos en la muestra.
ámbito de aplicación: se utiliza principalmente para detectar varios anticuerpos, como la detección de anticuerpos patógenos en el suero humano para determinar si se han infectado los patógenos correspondientes, o la detección de Autoanticuerpos para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes.
Ley de competencia
Principio: los antígenos específicos y los anticuerpos de la muestra a detectar se añaden simultáneamente a los portadores sólidos envueltos en anticuerpos, y los anticuerpos de la muestra y los antígenos marcados con enzimas compiten por unirse a los anticuerpos en los portadores sólidos. Si el contenido de anticuerpos en la muestra es alto, la probabilidad de unión a anticuerpos sólidos es mayor y la probabilidad de unión a antígenos marcados con enzimas es menor; Por el contrario, si el contenido de anticuerpos en la muestra es bajo, hay más posibilidades de que el antígeno marcado por la enzima se adhiera a los anticuerpos sólidos. Después de agregar el sustrato después del lavado, cuanto más se une el antígeno estándar enzimático al anticuerpo sólido, más oscuro es el sustrato enzimático, y el contenido de anticuerpos en la muestra es inversamente proporcional a la profundidad del color.
ámbito de aplicación: adecuado para la detección de antígenos de moléculas pequeñas o haptens, como la detección de residuos de medicamentos, hormonas, etc., también se puede utilizar para detectar muestras con títulos de anticuerpos más Bajos.
Ley de competencia de antígenos
Principio: primero se envuelve el paquete de anticuerpos específicos en el portador de fase sólida, se agrega la muestra a detectar y una cierta cantidad de antígenos marcados con enzima, y los antígenos en la muestra y los antígenos marcados con enzima compiten para unirse a los anticuerpos en el portador de fase sólida. Después del lavado, se añade un sustrato para la reacción de color. cuanto mayor sea el contenido de antígenos en la muestra, menor será el antígeno estándar enzimático unido a anticuerpos sólidos y el color será más claro, es decir, el contenido de antígenos en la muestra será inversamente proporcional a la profundidad del color.
ámbito de aplicación: se utiliza comúnmente para detectar antígenos de moléculas pequeñas, como residuos de plaguicidas, residuos de medicamentos veterinarios, etc.