La Caja de cultivo de tres gases celulares proporciona un entorno de cultivo in vitro cercano a las condiciones fisiológicas del cuerpo para las células adherentes y las células madre regulando con precisión las concentraciones de co, o y N. Su uso correcto está directamente relacionado con la fiabilidad de los datos experimentales y la tasa de éxito del cultivo celular, y se expone sistemáticamente desde el proceso de operación hasta el mantenimiento:
I. preparación antes de su uso
1. verificación ambiental
Asegúrese de que el equipo se coloca en la encimera horizontal, dejando un espacio de disipación de calor de ≥ 30 cm alrededor, lejos de la fuente de calor y la luz solar directa;
Comprobar si el voltaje de la fuente de alimentación coincide con el valor marcado en la placa de identificación del equipo, y el cable de tierra debe estar conectado de manera confiable;
Antes de activarla, se realiza una prueba de funcionamiento sin carga para verificar la estabilidad del sistema de control de temperatura (configuración de 37 ° c) y el sistema de control co2.
2. pretratamiento de la cabina
Después de la suspensión prolongada del nuevo equipo, es necesario limpiar la pared interior y el soporte de la bandeja con un 75% de etanol, y esterilizar ultravioleta durante 30 minutos;
Ambiente de gas preequilibrio: después de cerrar la puerta de la caja, se introduce una mezcla de gas (como 95% de aire + 5% de co2), que funciona durante 2 horas para estabilizar la presión interna del aire.
II. configuración de los parámetros básicos
1. gestión de la temperatura y la humedad
Configuración de la temperatura: la mayoría de las células de mamíferos son adecuadas para 37 ± 0,5 ° c, y la temperatura real se registra cada hora después del arranque;
Control de humedad: mantenga una humedad saturada del 95% ± 3%, agregue agua estéril al disco húmedo todos los días para evitar gotas de agua condensada.
III. normas de funcionamiento
1. colocación y extracción de muestras
La acción rápida de abrir y cerrar la puerta puede causar un cambio repentino de presión en la caja, y el acceso debe completarse en 1 minuto;
Los frascos / placas de Petri deben distribuirse uniformemente en las bandejas para evitar bloquear la salida de aire de circulación;
Los operadores usan guantes estériles y las herramientas son esterilizadas por la llama exterior de la lámpara de alcohol.
2. seguimiento diario
Revise diariamente los parámetros en tiempo real en la pantalla, centrándose en la observación:
- consistencia de las lecturas de los sensores CO2 con las ventanas de detección infrarroja;
- si la curva de fluctuación de la temperatura supera los ± 0,3 ° c;
- la línea de nivel del agua del tanque de agua, complementando oportunamente el agua para inyección esterilizada.
IV. mantenimiento y mantenimiento
1. mantenimiento cíclico
Semanalmente: limpiar la suciedad en las grietas del sello de la puerta y probar la función de alarma (cortar la fuente de alimentación para simular fallas);
Mensual: calibrar el sensor infrarrojo CO2 y reemplazar el filtro HEPA de la entrada de aire;
Trimestralmente: vaciar el tanque de agua del Humidificador y desinfectar toda la cabina con una solución de hipoclorito de sodio al 1%.
2. tratamiento de emergencia
Al activar la alarma de sobretemperatura, Corte inmediatamente la fuente de alimentación principal y abra la válvula de descarga para reducir la presión de la caja;
Detener el experimento cuando se produce la contaminación y realizar la fumigación y desinfección con formaldehído después de retirar todos los artículos.
V. precauciones clave
Está prohibido cambiar las puertas de las cajas con frecuencia, y se recomienda observar ≤ 3 veces al día;
No se pueden apilar sacudidoras de varias capas o equipos pesados para no afectar la distribución del flujo de aire;
Vaciar el tanque de agua cuando no esté en uso durante mucho tiempo, establecer la humedad en el 0% y operar con electricidad durante una hora al mes para evitar la humedad.
El manejo refinado de la Caja de cultivo de tres gases celulares requiere tener en cuenta las características del equipo y las necesidades biológicas. A través de procesos operativos estandarizados, monitoreo estricto de parámetros y mantenimiento regular, se puede mejorar significativamente la calidad del Cultivo celular y proporcionar una plataforma experimental estable para la detección de medicamentos, ingeniería de tejidos y otras investigaciones.