El sistema experimental de hipoxia animal es una herramienta importante para estudiar los mecanismos fisiopatológicos en entornos anóxicos, y su uso estandarizado afecta directamente la fiabilidad de los datos experimentales y el bienestar animal. A continuación, se ordenan los puntos clave de uso desde cuatro aspectos: preparación del equipo, control de parámetros, gestión de procesos y seguridad.

I. preparación y adaptación previa al experimento

1. verificación de la estanqueidad de la cabina

- prueba de presión negativa antes de su uso: arranque la bomba de vacío después de cerrar todos los canales, y la presión en la cabina debe bajar por debajo de - 50 kPa y mantenerse estable durante 3 minutos, lo que indica que no hay puntos de fuga.

Comprobar si los anillos de sellado de las ventanas de observación y las válvulas de entrada y salida de gas están envejecidos y reemplazar los sellos de caucho flúor si es necesario.

2. domesticación adaptativa de los animales

Los animales recién llegados deben adaptarse al menos 48 horas en un ambiente de aire normal y comer y beber libremente;

- ajustar el tamaño de la Plataforma de carga en función de las características de la especie (por ejemplo, no más de 5 jaulas por jaula para ratones y jaulas de ventilación independientes para ratas);

Las cepas especiales deben confirmar experimentalmente la tasa metabólica basal para evitar ocultar el efecto real de hipoxia debido a la respuesta al estrés.

3. preestablecimiento de la proporción de gas

- utilizar un medidor de flujo de masa para controlar con precisión la proporción de mezcla n¿ o¿ o¿ y los gradientes comunes se establecen en oxígeno constante (21% o¿ o¿ oxígeno moderado (10% - 15%) y oxígeno severo (menosdel 6%);

- equipado con absorbentes de CO2 (soda lime) y dispositivos de absorción de amoníaco para mantener una concentración de gases nocivos en la cabina inferior al 0,01%.

II. gestión de procesos y adquisición de datos

1. observación simultánea del comportamiento

Instalar cámaras de alta definición combinadas con sistemas de identificación ai para contar automáticamente indicadores como la actividad y la frecuencia de succión;

- registrar los cambios de peso al abrir la Caja y reemplazar el cojín regularmente todos los días, y controlar el tiempo de operación en 5 minutos.

2. adquisición de señales fisiológicas

El chip de telemetría implantable puede obtener datos de frecuencia cardíaca y saturación de oxígeno en sangre en tiempo real;

La recolección de sangre de la vena caudal debe seguir estrictamente el "principio de los tres iguales": el mismo momento, las extremidades del mismo lado y el mismo operador.

3. configuración del plan de emergencia

- reservar cilindros de oxígeno portátiles (el caudal se puede ajustar a 0,5l / min) y colocar los medicamentos de emergencia al alcance de la cabina;

- establecer un umbral de doble alarma: se abre automáticamente la puerta de descarga de presión cuando o 8% o la presión en la cabina cambia repentinamente > 5kpa / min.

III. Ética y control de calidad

1. aplicación del principio 3R

- determinar el tamaño mínimo efectivo de la muestra mediante experimentos previos, utilizando grupos aleatorios estratificados;

Desarrollar un programa gradual de reducción de oxígeno (una reducción diaria del 2% al 3% de oš) para reducir la respuesta de estrés agudo;

Establecer criterios de valoración humanitaria: terminar el experimento inmediatamente después de la aparición de convulsiones persistentes y la desaparición del reflejo corneal.

2. establecer especificaciones en comparación

- Añadir un grupo intermitente de hipoxia (como hipoxia de 4 horas al día + reoxigenación de 20 horas), además del Grupo de control de oxígeno;

El Grupo de control y el grupo experimental tienen el mismo lote de origen animal en el mismo período, y el entorno de cría es el mismo.

3. ciclo de mantenimiento del equipo

- calibrar mensualmente los sensores de oxígeno (calibrados con gas estándar);

Limpiar trimestralmente la acumulación de polvo en el interior de la cabina y reemplazar el filtro de admisión;

La revisión anual se centra en la inspección del tiempo de respuesta de la válvula electromagnética y la estructura mecánica de la puerta sellada.