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Shanghai Jintong Instrument Co., Ltd
De lo básico a lo avanzado: guía de operación del microscopio invertido Leica
Fecha:2025-07-18Leer:0
Microscopio invertido LeicaCon su configuración flexible de la lente y el diseño de la Plataforma de carga adecuada para una variedad de muestras, se ha convertido en un arma de investigación en los campos del cultivo celular, la Sección de tejidos y la ciencia de materiales. Dominar sus habilidades de operación no solo puede mejorar la eficiencia experimental, sino también prolongar la vida útil del instrumento. Lo siguiente se explica en detalle paso a paso, desde la operación básica hasta las habilidades avanzadas.
I. operaciones básicas: inicio normativo y observación de muestras
1. arranque y preparación ambiental
Después de conectar la fuente de alimentación, encienda el interruptor de alimentación de la máquina principal del microscopio y, después de que el campo de visión de las gafas se encienda, encienda la fuente de luz fluorescente (si necesita observación fluorescente). Nota: la fuente de luz fluorescente debe calentarse durante 5 - 10 minutos para lograr una intensidad de luz estable y evitar interruptores frecuentes para prolongar la vida útil de la bombilla.
Ajuste la base del microscopio a un Estado estable para evitar que las vibraciones afecten la imagen (se recomienda colocarla en una plataforma antisísmica o en una almohadilla de Goma gruesa).
2. colocación y enfoque de la muestra
Coloque la placa de petri, la placa poroso o la placa de vidrio en el Centro de la Mesa de carga para asegurarse de que la muestra se encuentra justo debajo de la lente (la lente del microscopio invertido está hacia arriba y la muestra se coloca desde arriba).
Primero use una lente de baja potencia (como 4x o 10x) para enfocar en bruto: baje lentamente la lente hacia la muestra a través de una Perilla de ajuste en bruto (preste atención a evitar tocar) y luego gire lentamente en sentido inverso hasta que la imagen sea clara. Al cambiar el objetivo de alta potencia (como 20x, 40x), es necesario ajustar la perilla de ajuste fino, porque la distancia de trabajo del objetivo es corta, la operación debe ser más suave.
3. Camino óptico y regulación de imágenes
Ajustar la altura del reflector y el tamaño de la apertura: al observar el espejo de baja potencia, la posición del reflector es baja y la apertura es grande; Cuando el espejo de alta potencia, es necesario aumentar el foco y reducir la apertura para mejorar el contraste.
A través de la observación ocular, ajuste la perilla de enfoque grueso / fino a la imagen más clara para evitar que el enfoque excesivo dañe la lente o la muestra.
2. habilidades avanzadas: expansión funcional e imágenes precisas
1. observación fluorescente y cambio de canal
Si se necesita una imagen fluorescente, primero se confirma que el bloque de filtro ha cambiado a los canales de fluorescencia objetivo (como dapi, fitc, tritc) y se opera a través de la placa giratoria del bloque de filtro en el lado del microscopio.
Ajustar la intensidad de la luminiscencia fluorescente: evitar el apagado fluorescente causado por el exceso de luz, puede aumentar gradualmente la intensidad de la luz a través de la perilla de ajuste de tensión o el control de software (si se conecta a la computadora) hasta que la señal sea clara y el ruido de fondo sea bajo.
2. diferencia de fase con imágenes TIC
Observación de la diferencia de fase: inserte el anillo de diferencia de fase (debe coincidir con el objetivo, como el objetivo de 10x correspondiente al anillo de diferencia de fase de 10x), ajuste la posición de la placa de fase del reflector y mejore el contraste de las muestras no teñidas (como las células vivas).
Observación TIC (contraste de interferencia diferencial): instalación de prismas tic, destacando la estructura fina de la muestra (como el citoesqueleto, el borde de la membrana celular) ajustando el ángulo de polarización del prisma y la perilla de ajuste de la intensidad de la luz.
3. adquisición de imágenes y optimización de parámetros
Si se conecta a una cámara digital, establezca el tiempo de exposición y el valor de ganancia a través de un software como Leica app suite: es necesario acortar el tiempo de exposición (evitar la sobreexposición) bajo un espejo de alta potencia, y la imagen de células vivas puede aumentar adecuadamente la ganancia para aumentar el brillo.
Al tomar fotos multicanal, es necesario tomar imágenes de campo brillante, fluorescencia o diferencia de fase por separado, y superponerlas o compararlas en el software para garantizar que los parámetros sean consistentes (como un campo de visión, el mismo tiempo de exposición).
III. mantenimiento y precauciones
1. limpieza de la lente: utilice papel especial de la lente o sople globos para limpiar el polvo en la superficie de la lente y evitar el contacto directo con la lente; Si está contaminado con líquido, limpie suavemente con etanol anhidro.
2. mantenimiento de la Plataforma de carga: evite que muestras agudas rasquen la superficie de la Plataforma de carga y limpie el medio de cultivo residual o el líquido a tiempo después de su uso.
3. proceso de apagado: apague la fuente de luz fluorescente (debe enfriarse a temperatura ambiente antes de cortar la electricidad), mueva la lente a una posición baja (evite la presión a largo plazo de la lente de alta potencia) y finalmente apague la fuente de alimentación del motor principal.
Microscopio invertido LeicaDesde el enfoque básico hasta la imagen avanzada, cada paso debe tener en cuenta las especificaciones y los detalles. Dominar sus habilidades básicas no solo puede obtener imágenes de alta calidad de manera eficiente, sino también dar pleno juego al rendimiento del instrumento y proporcionar un apoyo confiable para la investigación científica y los experimentos.