Como herramienta de análisis central de los laboratorios modernos, el analizador enzimático multifuncional ha logrado un análisis cuantitativo y cualitativo preciso de biomoléculas, actividades celulares y sustancias químicas mediante la integración de una variedad de tecnologías de detección óptica. Su principio técnico central se basa en la Ley Lambert - Bier y el mecanismo de transferencia de energía de resonancia de fluorescencia, combinado con el diseño de ruta óptica de alta precisión y el módulo de detección multimodo, y se construye un sistema de detección de escena completa que cubre la absorción ultravioleta - visible, la fluorescencia, la Quimioluminiscencia y la fluorescencia resuelta En el tiempo.

Principios tecnológicos básicos

Detección de absorción de luz: utilizando una lámpara de xenón o una fuente de luz led, se forma una luz monocromática de longitud de onda específica después de la División de luz por un monocromador, penetrando en muestras en una placa microporosa. La intensidad de la luz transmitida se detecta a través de fotodiodos y la concentración de la muestra se calcula en combinación con la Ley Lambert - Beer (a = Epsilon c1), que es adecuada para el análisis cuantitativo de ácidos nucleicos y proteínas.

Detección de fluorescencia: utilizando la tecnología de División de luz de rejilla de excitación, se detecta la intensidad de fluorescencia emitida de marcadores de fluorescencia de excitación de luz de longitud de onda específica (como fitc, gfp). La innovación central radica en el diseño del Camino óptico de cuatro rejillas, que admite el ajuste independiente de la longitud de onda de excitación / emisión, con un desplazamiento mínimo de Stoke de 18 nm, que puede separar eficazmente el ruido de fondo.

Detección de quimioluminiscencia: una señal óptica basada en una reacción enzimática o química, sin necesidad de una fuente de luz de excitación externa. La reacción luminosa brillante / flash se detecta a través de un tubo Fotomultiplicador de nivel de conteo de fotones de corriente oscura (pmt), con un rango dinámico ≥ 7 órdenes de magnitud, que es adecuado para escenarios de análisis ultramicro, como la detección ATP y el análisis genético de doble informe.

Innovación del modo de detección

Fluorescencia resuelta en el tiempo (trf): utilizando elementos de lantánidos (como UE y terbio) como marcadores, utilizando sus características de vida útil de fluorescencia de milisegundos, eliminando la interferencia de fondo a través de la detección de retraso en el tiempo, aumentando la relación señal - ruido en más de 10 veces, es ampliamente utilizado en la detección hormonal y el análisis de marcadores de hepatitis viral.

Transferencia de energía de resonancia de fluorescencia (fret): detección de transferencia de energía a través de cambios en el espaciamiento molecular de fluorescencia donante - receptor, combinada con la tecnología TRF para formar el modo RT - fret, después de la estimulación del donante, el receptor emite fluorescencia de longitud de onda larga, adecuada para el estudio de la interacción proteína y la Unión de ligandos receptores.

Integración de imágenes celulares: fusión innovadora de la carretera de luz de iluminación oblicua y la tecnología de imágenes cld, a través de la fuente de Luz LED y el enfoque automático láser, se realiza el recuento de células sin etiqueta y el análisis morfológico de células marcadas por fluorescencia. En comparación con los marcadores enzimáticos tradicionales, la dimensión de los datos se extiende al área de la muestra, la cobertura de poros y otros parámetros para apoyar las necesidades de selección de alta connotación.

Dirección de los avances tecnológicos

En la actualidad, la investigación y el desarrollo se centran en la selección automática de rango dinámico, el módulo de detección de células vivas de control multigaseoso y los algoritmos de análisis de datos impulsados por ia. Por ejemplo, la optimización inteligente de los parámetros de detección se realiza a través del software skanit, que puede cambiar automáticamente la ganancia PMT de acuerdo con la intensidad de la señal en el agujero, asegurando que el valor de CVS de detección entre lotes es inferior al 1%. En el futuro, con la fusión del etiquetado de puntos cuánticos y la tecnología de resonancia de plasma superficial, se espera que el medidor de enzima multifuncional logre la detección de nivel molecular único y proporcione un soporte técnico más fuerte para la medicina de precisión y la biología sintética.