El núcleo de mantenimiento del fermentador de células animales y vegetales esLimpieza y esterilización, mantenimiento de componentes, calibración de parámetrosEs necesario combinar las particularidades del Cultivo celular (sin paredes celulares, sensible a la fuerza de corte y fácil de contaminar), y el proceso de mantenimiento específico y los puntos clave son los siguientes:
Vaciado de residuos y lavado inicial
Después de la fermentación, primero se vacian los residuos del tanque, el medio de cultivo y los fragmentos celulares.Agua desionizada o purificadaEnjuagar repetidamente la pared interior del tanque, los remos de mezcla, los deflectores, los puertos de muestreo y otras partes para eliminar los residuos visibles a simple vista.
Para los fermentadores de elevación de aire especiales para Células animales (sin remo de agitación, baja fuerza de corte), es necesario centrarse en lavar los microporos del distribuidor de gas - líquido para evitar el bloqueo.
Limpieza química para eliminar manchas obstinadas
Para proteínas, Polisacáridos y otros residuos solubles, se preparanLimpiador alcalino(por ejemplo, 0,5% - 1% de solución naoh), inyectar en el tanque hasta sumergir todas las partes de contacto,Limpieza circular de 30 a 60 minutos; si quedan más residuos, se puede calentar adecuadamente a 40 - 50 ° c (para evitar daños en el sello a altas temperaturas).
Si hay precipitación de calcio y magnesio o residuos de materia inorgánica, use primero.Limpiador ácido(por ejemplo, ácido nítrico diluido del 0,1% - 0,5%) se limpia en circulación durante 20 - 30 minutos, y luego se enjuaga con una gran cantidad de agua purificada hasta la neutralidad (ph 6,5 - 7,5) para evitar que los residuos ácidos y álcalis dañen las células.
Nota: del fermentador de células animales y vegetalesTubo de silicona, Junta de GomaOtros componentes no pueden entrar en contacto con ácidos fuertes y álcalis durante mucho tiempo, y deben extraerse a tiempo para un tratamiento separado después de la limpieza.
Esterilización para eliminar la cría de bacterias diversas
Esterilización en el lugar (sip): se da prioridad a la esterilización por vapor de alta temperatura, con parámetros como121 ° C, 0,1 MPa, 20-30 minutosCubrir todos los componentes que entran en contacto con el medio de cultivo, como tanques, tuberías, válvulas y sondas de sensores; Para los componentes que no son resistentes a altas temperaturas (como electrodos de pH y electrodos de oxígeno disuelto), es necesario desmontarlos y usarlos.Inmersión en etanol al 75% o irradiación ultravioletaEsterilización.
Tratamiento posterior a la esterilización: después de la esterilización, mantenga el tanque seco para evitar que el agua condensada reproduzca bacterias diversas; Si no se utiliza durante mucho tiempo, se puede introducir en el tanque de secado por aire estéril.
Mantenimiento de sellos y conexiones
FermentadorAnillo de sellado de la tapa del tanque, arandela de silicona de la línea, Junta de sellado de la válvulaLas piezas vulnerables deben inspeccionarse una vez al mes y, en caso de envejecimiento, deformación y agrietamiento, deben reemplazarse inmediatamente para evitar fugas de aire y contaminación.
Se recomienda elegir el sello del fermentador de células animalesSilicona de grado médico o caucho flúorDesinfectar regularmente con alcohol médico para evitar que los productos disueltos del material afecten el crecimiento celular.
Mantenimiento del sistema de mezcla y ventilación
Fermentador de agitación mecánica: revisar trimestralmente el rodamiento y el motor de desaceleración del remo de mezcla y agregar aceite lubricante especial; Compruebe si la conexión entre el remo y el eje está suelta para evitar que la fuerza de Corte durante la operación dañe las células.
Sistema de ventilación: desmontar y lavar regularmente el filtro de aire (el material del filtro es en su mayoría politetrafluoroen o celulosa), si el filtro está bloqueado o esterilizado demasiado veces, reemplazarlo a tiempo; Los microporos de la cabeza de aireador del fermentador de aire deben limpiarse con ultrasonido para garantizar una ventilación uniforme.
Calibración de sensores e instrumentos
Electrodos de ph, electrodos de oxígeno disuelto: calibrar una vez al mes, los Electrodos de pH se calibran con un amortiguador estándar (ph 4.0, 7.0, 10.0), y los Electrodos de oxígeno disuelto se calibran con una solución saturada de sulfito de sodio (punto cero de oxígeno) y aire (punto 100% de oxígeno disuelto); Antes y después de su uso, es necesario remojarlo con una solución protectora para evitar que los electrodos se sequen y fallen.
Sensores de temperatura, sensores de presión: calibrar trimestralmente para garantizar que la precisión del control de temperatura esté dentro de ± 0,5 ° C y que la pantalla de presión sea precisa.
Si el fermentador está desactivado durante mucho tiempo (más de un mes), debe completarseLimpieza - esterilización - secadoProceso:
Aplicar una capa de componentes metálicos como la pared interior del tanque y el remo de mezcla.Aceite antioxidante de grado alimenticioPara evitar el óxido;
Después de limpiar y esterilizar los componentes extraíbles (como electrodos, anillos de sellado, filtros), se almacenan sellados en un ambiente seco y libre de polvo.
Desconecte la fuente de alimentación y la fuente de aire del fermentador, cierre todas las válvulas y haga un buen trabajo de protección contra el polvo; Se enciende regularmente (mensualmente) durante 10 - 15 minutos para comprobar si el motor y el sistema de control son normales.
Necesidades de mantenimiento del fermentador de células animales y vegetalesDistinguir materiales: el tanque de vidrio evita colisiones y cambios repentinos en la diferencia de temperatura; El tanque de acero inoxidable no se puede cepillar con bolas de acero para evitar que se produzcan bacterias diversas en la pared interior raspada.
Al limpiar y esterilizar, eviteReactivos corrosivosSensores de contacto y componentes eléctricos; Está estrictamente prohibido usar desinfectantes que contengan cloro en los fermentadores de células animales para evitar que el cloro residual envenene las células.
Establecer una cuenta de mantenimiento para registrar el tiempo de cada limpieza, esterilización, reemplazo de componentes y calibración para facilitar la trazabilidad.