1 Resumen de la tecnología de concentración centrífuga al vacío

El concentrador centrífuga al vacío es un equipo importante para la preparación y el pretratamiento de muestras en laboratorios modernos, que promueve la rápida evaporación del disolvente en las muestras mediante el uso integral de tres medios técnicos: fuerza centrífuga, vacío y calentamiento, logrando así el objetivo de concentración o secado de muestras. Su principio central es: reducir la presión interna del sistema mediante bombeo al vacío, reducir considerablemente el punto de ebullición del disolvente, para que el disolvente pueda hervir y evaporarse a baja temperatura; Al mismo tiempo, la fuerza centrífuga producida por la acción centrífuga puede hacer que la muestra siempre se acumule en el Fondo del tubo centrífuga, evitando efectivamente la explosión, ampollas o contaminación cruzada de la muestra y garantizando la tasa de recuperación de la muestra.

Un sistema completo de concentración centrífuga suele contener el cuerpo principal del concentrador centrífuga de vacío, rotores especiales, trampas frías, bombas de vacío y botellas de condensación. Entre ellos, la función de la trampa fría es crucial, puede capturar eficazmente la mayor parte del vapor de disolvente que puede causar daños a la bomba de vacío y proporcionar una protección efectiva para la bomba de vacío.

Esta tecnología es ampliamente utilizada enADN / ARNLa investigación, la bioquímica, la investigación farmacéutica, las pruebas de seguridad alimentaria y la medicina forense son especialmente adecuadas para el tratamiento de muestras biológicas sensibles al calor. Porque en un ambiente de vacío a baja temperatura, se puede prevenir eficazmente la inactivación y oxidación de las muestras.

2 ADN/ARNSoluciones especiales para la concentración y purificación

En la investigación de biología molecular,ADNyARNLa concentración y purificación esPCRImportantes pasos de preprocesamiento para muchas aplicaciones aguas abajo, como secuenciación y clonación. Aunque el método tradicional de precipitación de etanol es más común, tiene las deficiencias de operación engorrosa, largo tiempo y fácil pérdida de muestras. La tecnología de concentración centrífuga al vacío proporciona una solución más eficiente y confiable para resolver estos problemas.

2.1 Principio de funcionamiento y ventajas

EnADN / ARNDurante el proceso de concentración, el concentrador centrífuga al vacío hace que los disolventes comunes como el etanol y el propanol se evaporen a temperaturas más bajas creando un ambiente de baja presión. La acción de la fuerza centrífuga puede garantizar que las moléculas de ácido nucleico sensibles a la temperatura no destruyan su integridad estructural debido a la ebullición severa; Al mismo tiempo, el ambiente de baja temperatura logrado con la ayuda de trampas frías (la temperatura puede ser tan baja como- 50℃A- 110℃) puede garantizar que la actividad de las biomacromoléculas no se destruya.

En comparación con los métodos tradicionales, la tecnología de concentración centrífuga al vacío se encuentra enADN / ARNTiene ventajas significativas en el tratamiento:

Alto rendimiento: la acción centrífuga puede evitar que las muestras estallen y pierdan, y la tasa de retención de las muestras puede superar95%

Mantener la actividad: el ambiente de vacío a baja temperatura puede prevenir la degradación y inactivación de ácidos nucleicos

Alto rendimiento: se pueden procesar varias muestras a la vez, por ejemplo, algunos modelos se pueden procesar simultáneamente 132 un1,5 / 2 mlMuestras de especificaciones

Fácil de operar: adoptar el control de programas automatizados para reducir los errores de operación humana

Ahorrar tiempo: concentración rápida y reducción sustancial del tiempo de experimentación

2.2 Proceso de operación

Lo siguiente se realiza con un concentrador centrífuga al vacío.ADN / ARNProceso operativo estándar concentrado:

Paso 1: preparación de muestras

Contendrá objetivosADN / ARNLa solución se mezcla uniformemente con el disolvente orgánico añadido, como etanol o alcohol isopropósico, y luego se empaqueta en el tubo centrífuga correspondiente. Es necesario asegurarse de que el volumen de la muestra no exceda la capacidad máxima del tubo centrífuga y que la carga de la muestra sea equilibrada.

Paso 2: inspección del equipo y configuración de parámetros

Comprobar el nivel de aceite y el Estado de la trampa fría de la bomba de vacío

De acuerdo con las características de la muestra y el tipo de disolvente, establezca los parámetros adecuados:

Temperatura: generalmente establecida en30 - 60℃Entre ellos, se debe seleccionar una temperatura más baja al tratar muestras sensibles al calor.

Velocidad: según el tipo de rotor, generalmente en100-2000 rpmAjuste entre

Tiempo: establecido en función del volumen de la muestra y las propiedades del disolvente, generalmente0,5 - 2hora

Grado de vacío: generalmente controlado en10-1000PaDentro del alcance

Paso 3: operación y monitoreo

Después de iniciar el programa, el instrumento se ejecutará automáticamente de acuerdo con los parámetros establecidos.

Monitorear el proceso de concentración en tiempo real a través de la ventana de observación o la función de imagen centrífuga

El sistema coordinará automáticamente las funciones de centrifugación, vacío y calefacción para garantizar que la concentración se lleve a cabo de manera eficiente.

Paso 4: recuperación de muestras

Una vez finalizado el procedimiento, el sistema descargará automáticamente la presión y volverá a la presión atmosférica.

Extraer la muestra concentrada, cuando la muestra suele reunirse en la parte inferior del tubo centrífuga

Después de la concentración en suspensión pesada con una cantidad adecuada de tampónADN / ARNPara su uso en experimentos posteriores

Paso 5: mantenimiento y limpieza

Limpiar el disolvente recuperado en la trampa fría

Limpiar y desinfectar el rotor y la cavidad para evitar la contaminación cruzada

2.3 Optimización de parámetros clave

ParaADN / ARNPara obtener los mejores resultados durante el proceso de concentración, es necesario optimizar los siguientes parámetros clave:

Control de temperatura

procesarADNAl tomar la muestra, generalmente se puede elegir una temperatura más alta (por ejemplo 60℃) para lograr una concentración rápida y no afectar la respuesta de secuenciación posterior; Y para los sensiblesARNMuestras, se recomienda temperaturas más bajas..30 - 40℃) para evitar su degradación.

Ajuste del grado de vacío

El vacío adecuado puede acelerar significativamente la tasa de evaporación del disolvente, y generalmente se recomienda controlar el vacío en10-1000PaEntre. Sin embargo, para las muestras propensas a la ampollas, se puede aumentar adecuadamente la presión (es decir, reducir el vacío) para reducir la producción de espuma.

Selección del rotor

Es necesario seleccionar el rotor adecuado de acuerdo con las diferentes necesidades de capacidad de la muestra, como se muestra en la siguiente tabla:

Configuración del tiempo

El tiempo de concentración se ve afectado por varios factores, como el volumen inicial de la muestra, el tipo de disolvente, la temperatura establecida y el vacío. En general,100 μLLa solución acuosa se concentra en10 μLCuando, en 60℃Tratamiento en condiciones30 - 60Min.

3 Características y ventajas de la solución

Esta solución está dirigida aADN / ARNLas necesidades especiales de concentración y purificación proporcionan un plan técnico completamente optimizado, con las siguientes características y ventajas específicas:

3.1 Proteger la integridad de la muestra

Concentración a baja temperatura: evitar la pérdida, desnaturalización o disminución de la actividad de las muestras de ácido nucleico

Prevención de la contaminación cruzada: la acción centrífuga garantiza que las muestras no pierdan, no tengan contaminación cruzada

Prevención de la oxidación: el ambiente al vacío puede prevenir la oxidación de las muestras y mantener la actividad biológica

3.2 Tratamiento eficiente

Evaporación rápida: el punto de ebullición del disolvente disminuye en un ambiente de vacío, combinado con el sistema de calefacción, aumenta considerablemente la tasa de evaporación

Alto rendimiento: soporte para un solo procesamiento de decenas a cientos de muestras, lo que mejora significativamente la eficiencia experimental

Control programático: se pueden almacenar varios grupos de programas, realizar operaciones con un solo clic y simplificar el flujo de trabajo

3.3 Amplia aplicación

El programa no solo se aplica a las rutinasADN / ARNLa concentración también se puede aplicar a los siguientes escenarios:

Preprocesamiento de muestras secuenciadas: para concentraciones bajasADNLas muestras se vuelven a concentrar para mejorar la tasa de éxito de la secuenciación.

Eliminación de residuos de alcohol: eliminación rápidaADNContaminantes alcohólicos en muestras que no afectan a las reacciones de secuenciación posteriores

Concentración y purificación después de la extracción de ácidos nucleicos: reemplazar el método tradicional de precipitación de etanol para mejorar la eficiencia de recuperación y la consistencia de los resultados

4 Resolución de problemas y precauciones

Para garantizar que el concentrador centrífuga de vacío estéADN / ARNMantener el mejor rendimiento durante el proceso de concentración, los siguientes son problemas comunes y soluciones correspondientes, que se pueden consultar:

Además, durante el uso diario, se deben prestar atención a los siguientes asuntos:

Limpiar regularmente la cavidad y el rotor del equipo para evitar la contaminación

Asegúrese de que el tubo de muestra esté bien sellado para evitar fugas

Seleccione la temperatura adecuada de la trampa fría de acuerdo con el tipo de disolvente.

Al manipular muestras de alta concentración de sal, reduzca adecuadamente la temperatura y el vacío para evitar la precipitación.

5 Resumen

El concentrador centrífuga de vacío esADN / ARNLa concentración y purificación proporciona soluciones eficientes, confiables y automatizadas. Al optimizar los tres parámetros clave de centrifugación, vacío y calentamiento, esta tecnología puede completar rápidamente la concentración de ácidos nucleicos bajo la premisa de proteger la actividad biológica de las muestras, mejorando significativamente la eficiencia experimental y la fiabilidad de los resultados. En comparación con los métodos tradicionales, tiene ventajas obvias en términos de recuperación, flujo de procesamiento y facilidad de operación, especialmente adecuado para la investigación de biología molecular moderna y aplicaciones de secuenciación de alto rendimiento que requieren muestras de ácido nucleico de alta calidad.

Con el desarrollo continuo de la tecnología, la función del concentrador centrífuga de vacío se mejorará continuamente, proporcionando un apoyo técnico más fuerte para la investigación en Ciencias de la vida.