La inyección de fructosa difosfato de sodio es un medicamento para el tratamiento de la hipofosforilación, que a menudo se utiliza clínicamente como tratamiento adyuvante de la isquemia miocárdica. La hipofosforilación puede aparecer en situaciones agudas como transfusiones de sangre, cirugía bajo circulación extracorpórea y nutrición gastrointestinal, y también está relacionada con algunas enfermedades crónicas como el alcoholismo crónico, la desnutrición crónica, el agotamiento del ácido carbónico en la insuficiencia respiratoria crónica [1]. La inyección de difosfato de sodio de fructosa es ampliamente utilizada en la clínica, pero debido a sus propias características estructurales, la determinación del difosfato de sodio de fructosa se basa principalmente en la espectrometría ultravioleta derivada; Al mismo tiempo, en el proceso de producción de fructosa difosfato de sodio pueden introducirse impurezas, cuyas sustancias relacionadas son fructosa fosfato, glucosa fosfato y fructosa, que son compuestos altamente polares y tienen un contenido muy bajo, que no se pueden detectar en la cromatografía ordinaria de fase inversa y detectores diferenciales. Hay documentos que informan sobre el método de detección posterior a la separación del color de las benzodiaminas por electrografía en papel, así como la detección por TLC * detección [2 - 4], y también hay documentos que utilizan el método enzimático compuesto sólido para determinar el contenido de fructosa difosfato de sodio [5]. Estos métodos no solo son engorrosos de operar, sino que también tienen problemas de repetibilidad y sensibilidad.

Este experimento utiliza el método amperométrico de pulso de cromatografía iónica para separar y determinar el difosfato de sodio de fructosa y tres sustancias relacionadas, con buena separación, alta sensibilidad y operación simple. Se ha establecido un método eficaz para detectar el difosfato de sodio de fructosa y sus sustancias relacionadas.

Instrumento de condiciones de prueba: cromatógrafo ICS - 5000 (thermofisher), con bomba de gradiente de cuatro elementos, detector ed ampere, columna de muestreo automático As - ap: columna de protección carbonpac pa 20 6. 0 micras, 50 x 3 mm, (p / n: 060144) columna de separación carbonpac pa 20 6. 0 micras m, 150 × 3 mm, (p / n: 060142) temperatura de la columna: 30 ℃; Líquido de elución: caudal de elución gradiente NaOH / naoac: 0,4 ml / min; Anillo cuantitativo: 20 μl; método de detección: detección de amperios de integración de pulso (forma de onda de cuatro potenciales)

Después de diluir el múltiplo adecuado de la muestra antes del tratamiento de la muestra, después de filtrar por una película filtrante de nylon de 0,22 micras, el filtrado de extracción y renovación se carga directamente a la máquina para su análisis.

Las muestras reales se analizan para la inyección de difosfato de sodio de fructosa disponible en el mercado, después de la dilución, se filtra por una membrana filtrante de 0,22 micras, se determina de acuerdo con las condiciones cromatográficas seleccionadas, y el método estándar externo es cuantitativo. su espectro se muestra en la figura 2, y los resultados del análisis se muestran en la Tabla 2.

Resultados y discusión de la selección de la columna cromatográfica y la optimización de las condiciones de gradiente de la elución para optimizar la estructura del difosfato de sodio de fructosa que contiene dos grupos de ácido fosfórico, que se pueden separar por cromatografía de intercambio aniónico. Al mismo tiempo, sus sustancias relacionadas son el fosfato de fructosa, el fosfato de glucosa y la fructosa, que contienen grupos hidroxi en estas estructuras y pueden tener señales en el detector de amperios. Para garantizar la racionalidad de la separación y el tiempo de retención de los picos cromatográficos, elegimos la columna de azúcar de carbonpac pa 20 y el método de elución gradiente NaOH / naoac. En la siguiente imagen se muestran los gráficos de varias sustancias en las condiciones cromatográficas anteriores (figura 1).

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