El proceso de uso de la liofilización de laboratorio es un proceso de operación sistemático, y la siguiente es una descripción detallada del proceso de uso:

I. preparación previa y pretratamiento de muestras

1. evaluación de la adaptabilidad de la muestra

- selección de muestras con un contenido de agua superior al 70% y sensibles al calor o fáciles de oxidar (como preparaciones enzimáticas, bacterias, materiales medicinales, etc.) para evitar el liofilización directo de muestras altas en azúcar / proteínas (es necesario añadir agentes protectores como la Trehalosa para evitar el colapso estructural).

- controlar el grosor de la muestra ≤ 10 mm al empaquetar (la muestra líquida no supera 1 / 3 de la profundidad del recipiente) y pavimentar uniformemente con una bandeja poco profunda o una botella de Xilin para evitar que la apilamiento afecte la eficiencia de la transferencia de calor.

2. esterilización y limpieza de contenedores

- todos los contenedores que entren en contacto con las muestras deben secarse después de la esterilización a alta temperatura y alta presión, y la operación aséptica debe completarse en el Gabinete de bioseguridad (...).

Inspección del equipo: confirme que la temperatura de la trampa fría ha caído por debajo de - 50 ℃, el nivel de aceite de la bomba de vacío se encuentra en 1 / 2 a 2 / 3 de la ventana, y el anillo de sellado está intacto y sin daños.

II. fase de precongelación: control clave de la formación de cristales de hielo

1. selección del método de precongelación

- modelo de precongelación incorporado: coloque la muestra en la bandeja de trampa fría, inicie el modo de precongelación y establezca la temperatura por debajo del punto Eutéctico de la muestra de 5 a 10 grados celsius.

- preexcavación externa: refrigerador criogénico (- 80 ° c) o preexcavación de nitrógeno líquido durante 2 a 4 horas hasta que el Centro de la muestra se congele (golpeando el recipiente para hacer un sonido nítido).

2. medidas de prevención de la integración

La falta de precongelación puede causar que las muestras se derritan y burbujeen durante la fase de secado, y es necesario monitorear la temperatura de la superficie del material a través de un termómetro infrarrojo para garantizar que la profundidad de congelación cumpla con los estándares.

3. liofilización al vacío: control preciso por etapas

1. secado por sublimación (secado primario)

- arrancar la bomba de vacío, bombear el vacío a 10 a 50 pa, calentarse lentamente a - 20 a - 10 ℃ (por debajo del punto eutéctico), y continuar durante 2 a 24 horas (ajustado de acuerdo con el grosor de la muestra). En esta etapa, se elimina más del 90% del agua libre y se observa que la capa de Escarcha de la trampa fría ya no se engrosa, es decir, el punto final.

2. secado analítico (secado secundario)

- calentar gradualmente a 0 a 30 ° c (proteínas ≤ 25 ° c), mantener un vacío de 5 a 10 pa y promover la desorción del agua unida. El punto final se juzga mediante el método de pesaje: la diferencia de pesaje entre dos pesas consecutivas es inferior al 0,1%.

IV. normas para finalizar el secado y el muestreo

1. romper el vacío y el sellado

Después de cerrar la bomba de vacío, introduzca lentamente nitrógeno para restaurar la presión atmosférica, retire rápidamente la muestra y Selle (tapón de presión de la botella de Xilin o embalaje al vacío de la bolsa de papel de aluminio) y almacénela a 4 ° c o - 20 ° c.

2. restauración y limpieza del equipo

Después de descongelar y drenar el agua, limpie la trampa fría y el estante con un 75% de alcohol, verifique la calidad del aceite de la bomba de vacío (reemplazarlo cuando esté turbio) y registre los parámetros de funcionamiento.

El uso de liofilizadores de laboratorio es una combinación de "predicción científica + control de precisión". Seguir estrictamente el proceso estandarizado puede mejorar significativamente la tasa de retención de la actividad de la muestra (más del 92%), al tiempo que reduce el riesgo de fallas del equipo.