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Mesa Labs
El sintético de péptidos multicanal ayuda al desarrollo de medicamentos de Alzheimer
Fecha:2025-01-08Leer:2
La proteína beta - amiloide humana 1 - 42 (figura 1) es el componente principal de la placa depositada en el cerebro de los pacientes con enfermedad de Alzheimer (ad). La investigación diaria de patología de la ad, herramientas de diagnóstico y medicamentos potenciales requiere un suministro ininterrumpido de proteína beta - amiloide. Sin embargo, se ha informado de que la proteína beta - amiloide (1 - 42) es difícil de preparar a través de la síntesis tradicional de péptidos sólidos (spps) debido a la Alta hidrofobicidad del extremo C y la aglomeración en la resina causada por la predeposición de la secuencia. Los últimos avances en la síntesis automática de proteína beta - amiloide incluyen calentamiento infrarrojo y nuevas combinaciones de reactivos de acoplamiento, que pueden sintetizar mejor péptidos hidrofóbicos difíciles en menos tiempo de circulación. Este artículo está en Symphony®El aparato de síntesis de péptidos del canal x 24 exploró la eficiencia de síntesis de la proteína beta - amiloide bajo diferentes métodos de síntesis en paralelo.
Usar rink amide chemmatrix ™ (0,47 mmol / g) y R tenagel ™ Resina (0,19 mmol / g), purepep ™ Reactivos: hdma / oximapure ™ O hdmc / oximapure y dipea y aminoácidos fmoc preinstalados (1: 1: 1: 2), en Symphony®En el aparato de síntesis de x, el péptido se sintetiza en condiciones de exceso de 10 veces y escala de 50 micromoles. Se probaron dos métodos sintéticos:
Método a:Desprotección 2 x 3 min, acoplamiento 2 x 5 min, 25 ° c.
Método b:Desprotección 2 x 30 s, 90 ° c, acoplamiento 2 x 1 min, 90 ° c, calentamiento infrarrojo.
El sintético de péptidos X sinfónicos tiene una función flexible y puede probar cinco condiciones independientes de síntesis de proteína beta - amiloide al mismo tiempo. Hdma (tabla 1) y hdmc (tabla 2) se combinan cada uno con el reactivo oximapure para sintetizar la proteína beta - amiloide por el método más lento a, utilizando la resina rink chemmmatrix o R tenagel, y la pureza del producto bruto resultante es similar. La pureza más alta proviene de la combinación del reactivo hdma / oximapure y la resina rink amide chemmatrix (figura 2).
Después de aumentar la temperatura (90 ° c) y acelerar la reacción (método b), el reactivo hdma / oximapure / dipea se combinó con la resina rink amide chemmatrix con una pureza bruta del 33,9%. La pureza sintética del método de aceleración + alta temperatura + hdma es similar al método lento (tabla 1).
Cuadro 1.La proteína beta - amiloide se sintetiza de acuerdo con el método a con reactivos hdma / oximapure / dipea, y la pureza y el rendimiento de los productos crudos obtenidos.
Cuadro 2.La proteína beta - amiloide se sintetiza de acuerdo con el método a con reactivos hdmc / oximapure / dipea, y la pureza y el rendimiento de los productos crudos obtenidos.
12 - ß - proteína amiloide – 4940
mínimo
1
Con el sintético de péptidos X symphony, se pueden evaluar 24 condiciones de síntesis simultáneamente a las 24 horas (temperatura ambiente) o a las 17 horas (90 ° c), y se puede completar el corte automático de cadenas de péptidos en el instrumento.
2
Se evaluaron seis condiciones sintéticas diferentes (temperatura, resina y combinación de reactivos de acoplamiento), y se determinaron inicialmente las mejores condiciones sintéticas para la pureza y rendimiento de los péptidos hidrofóbicos.
3
La proteína beta - amiloide (1 - 42) - nh se sintetizó con éxito en el sintético de péptidos x Symphony mediante un método rápido y un calentamiento infrarrojo (90 ° c) utilizando un nuevo reactivo de péptidos hdma.2
4
Sobre esta base, se puede optimizar aún más la síntesis de péptidos hidrofóbicos de cadena larga, como la proteína beta - amiloide, incluyendo acortar el tiempo de acoplamiento y cambiar a una nueva combinación de reactivos de acoplamiento.
