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Mesa Labs
Uso de gyrolab para lograr una determinación precisa del antígeno libre en el 100% del suero
Fecha:2025-11-05Leer:2
Gregor jordan, de roche, y otros han desarrollado un método de inmunoanálisis para detectar antígenos libres en suero completo basado en la Plataforma gyrolab, que tiene como objetivo resolver los siguientes desafíos en el análisis de sustancias libres:
La dilución de la muestra conduce a la disociación del complejo antígeno - anticuerpo,Sobreestimación de la concentración de antígenos libres
La semivida del complejo de anticuerpos - antígenos es corta (menosde 100 segundos), y los métodos tradicionales de LBA no pueden capturar con precisión.
Cuando existen anticuerpos terapéuticos, es difícil distinguir entre antígenos libres y Unidos.
El método adopta el principio del análisis inmunológico de puente, y los pasos específicos son los siguientes:
1
El paquete de anticuerpos de captura marcado se coloca en la columna de afinidad de la estreptomicina.
2
unirseMuestras de suero no diluidasQue une antígenos libres a anticuerpos capturados
3
unirseAnticuerpos de detección marcadosUnión a otro Epítopo del antígeno
4
Señal de detección, antígeno libre cuantitativo
Requisitos clave del método
Captura de anticuerpos y detección de epítopos de antígenos identificados por anticuerposNo se superponen
Anticuerpos capturados y anticuerpos terapéuticosEl mismo Epítopo del antígeno de unión competitiva
El tiempo de incubación es extremadamente corto (preferido < 2 segundos)
No es necesario diluir la muestra para evitar la disociación de los compuestos
Propósito de la investigación
Evaluar la "eficiencia de eliminación" de los anticuerpos contra ccl2, es decir, si los anticuerpos se unen efectivamente y eliminan ccl2 libre.
研究método
Plataformas y métodos
Diseño experimental
Curva de calibración y control de calidad
Rango de calibración: 2430 pg / ML → 10 pg / ML
Muestra de control de calidad:
Alto control de calidad: 1820 pg / ml
Control de calidad medio: 230 pg/ml
Bajo control de calidad: 30 pg / ml
Criterios de aceptación:
± 20% de desviación, CV < 15%
Grupo de intervención farmacológica
Cnto0888: anticuerpos anticoccl2 monoespecíficos (control)
Cklo2 - sg1095: anticuerpos anticoccl2 bispecíficos (grupo experimental)
Configuración de concentración:
Dosis bajas: 7,5 ng / ML o 15 ng / ML
Dosis altas: 10 μg / ML
Resultados y discusión
Cnto0888 elimina casi por completo el ccl2 libre a altas concentraciones
La eficiencia de eliminación de cklo2 - sg1095 es ligeramente menor, pero sigue siendo significativamente mejor.Grupo en blanco
La doble resistencia a dosis bajas todavía tiene una capacidad de eliminación moderada, lo que sugiere su dependencia de la dosis.
Propósito de la investigación
En muestras de suero no diluidas, se determina de manera rápida y precisa la concentración del complemento libre C5 para evaluar la eficacia in vivo de medicamentos anticuerpos antico5 (como eculizumab, crokalimab).
研究método
Plataformas y métodos
Experimentoresultado
Rango lineal de la curva estándar: 0,55 – 3000ng / ML
LOQ：0.5 ng/mL， Suficiente para detectar menos del 0,1% de C5 libre(total de personas C5 ¿ 400 nm)
Resumen
Ventajas técnicas metodológicas
Algunos modos de flujo sin incubación en la Plataforma gyrolab,Reducir en gran medida la Unión no específica en la matriz y reducir efectivamente la interferencia de la matrizQue se puede apoyar en el análisis de objetos libresPrueba de suero completo, yReducir la disociación de complejos de anticuerpos - antígenos por incubaciónPara que el análisis de los objetos libres sea más preciso y eficiente.
Referencias:
[1] Método para determinar el antígeno libre de un anticuerpo en una muestra, Gregor Jordan, Martin Schaefer, Maria Viert; Pub No. US2023/0393125 A1.