La luz polarizada lineal emitida por la fuente de luz del espectrómetro Dicolor circular vibrante es la base. Posteriormente, se descompone en luz polarizada circular izquierda y derecha con la ayuda de elementos ópticos específicos, como una cuarta parte de la placa de onda. La Dirección de polarización de estas dos luces circularmente polarizadas se mueve a lo largo de la circunferencia, pero la dirección de rotación es opuesta. Cuando estos dos haces de luz circularmente polarizada pasan por muestras con quiralidad, su absorción de luz circularmente polarizada izquierda y derecha varía debido a la estructura especial de las moléculas quirales. Esta diferencia de absorción es la fuente de la señal Dicolor circular. El instrumento obtiene información sobre la muestra detectando esta diferencia de absorción. Los detectores en el instrumento captan los cambios de intensidad de la luz después de pasar por la muestra y los convierten en señales eléctricas. Estas señales eléctricas se procesan y analizan una serie de veces para generar un dicromatograma circular. Al interpretar el mapa, se pueden deducir detalles como la estructura secundaria, el proceso de plegado y la interacción de las moléculas en la muestra.
El espectrómetro Dicolor circular vibrante (vcd) es una herramienta importante para estudiar la configuración molecular y la Actividad óptica de las sustancias quirales. Los siguientes son los pasos de su determinación:
1. calibración del instrumento: calibrar el instrumento con una solución estándar para determinar la longitud de onda de absorción y la intensidad de la luz polarizada circular izquierda y derecha. Esto es para garantizar la precisión de las mediciones posteriores.
2. preparación de la muestra: disolver o preparar la muestra a medir en forma de solución para el análisis espectral bicolor circular. La elección del disolvente adecuado es crucial para garantizar que el disolvente no interfiera con la prueba vcd, o que sus efectos puedan eliminarse mediante el procesamiento de datos posteriores. Para las muestras sólidas, se pueden adoptar formas como tabletas de presión, películas sólidas o películas pulverizadas; Si se trata de una muestra de moléculas pequeñas de solución, el camino óptico de la piscina colorimétrica común es de 100 micras, y los disolventes típicos incluyen ccl2, cdcl2, Dmso - d2, etc.
3. determinación de la muestra: inyectar la solución de la muestra preparada en la Cámara de la muestra, y después de activar la fuente de luz, el detector comienza a detectar la diferencia de absorción de la muestra de diferentes luces polarizadas. A una temperatura específica, los datos relevantes se obtienen cambiando el Estado de polarización de la luz. Por ejemplo, para las pruebas sólidas, se debe utilizar un soporte de muestra giratorio para eliminar las señales falsas de VCD causadas por bireflexión, etc.
4. adquisición de datos: registra la señal eléctrica emitida por el detector, obteniendo así el dicromatograma circular de la muestra. El mapa refleja las características de actividad óptica de las muestras a diferentes longitudes de onda.
5. procesamiento y análisis de datos: primero se elimina el ruido de fondo y otros factores de interferencia, y luego se utiliza un software especial para deconvolur la Línea espectral para obtener la intensidad y frecuencia de cada modo de vibración. Finalmente, los resultados se comparan con el modelo teórico para deducir la estructura y la información dinámica de la muestra. Si se determina una muestra con una configuración desconocida, el espectro de prueba de VCD medido por ella se compara con el espectro de cálculo de VCD obtenido por el cálculo cuantitativo de la configuración absoluta preestablecida, y si los dos corresponden, se puede determinar que la configuración desconocida es la configuración preestablecida.