El sistema de imágenes de gel puede realizar un análisis cuantitativo y de concentración preciso del peso molecular a través de la combinación de imágenes ópticas y análisis de software. su proceso central y puntos técnicos son los siguientes:

I. principios y pasos para la cuantificación precisa del peso molecular

Construcción de la curva estándar

El sistema utiliza como referencia las bandas de dmamarker de peso molecular conocido, marca su ubicación a través de software y genera una curva de ajuste de la distancia de migración de peso molecular. Esta curva se basa en la relación lineal entre el peso molecular y la movilidad en la ce, lo que garantiza la precisión del cálculo del peso molecular de bandas desconocidas. Por ejemplo, después de que se marca el peso molecular de la banda Marker en la película de ADN (por ejemplo, 100 bp, 500 bp, 1000 bp), el sistema ajusta automáticamente la curva para el cálculo posterior del peso molecular de la banda desconocida.

Cálculo del peso molecular de la banda desconocida

El gel después de la electrorregulación de la muestra a medir se coloca en un sistema de imagen para estimular la fluorescencia (como el teñido eb) a través de una fuente de luz ultravioleta o visible, y después de que el software captura la imagen, su peso molecular se calcula en función de la posición de migración de la banda desconocida en el gel, combinada con la curva estándar. Este método es más preciso que la estimación a simple vista, y el error se puede controlar dentro de ± 5%.

II. métodos cuantitativos precisos de concentración

Calibración y comparación de densidad

El sistema primero calibra la banda estándar con una concentración conocida (como el contenido de ADN de una banda en una película de adn), y luego hace clic en la banda desconocida a través del software para comparar su diferencia de densidad con la banda estándar y calcular la concentración de la muestra desconocida. Por ejemplo, si la densidad de la banda estándar es de 100 unidades, la concentración correspondiente es de 50 ng / μl y la densidad de la banda desconocida es de 50 unidades, su concentración es de aproximadamente 25 ng / μl.

Relación lineal de densidad óptica

La absorción de luz de la muestra está linealmente relacionada con la concentración o masa. El sistema calcula la concentración de muestras desconocidas midiendo la densidad óptica de la banda (valor gris o intensidad de fluorescencia), combinada con la curva estándar o los datos de la muestra conocidos. Este método es adecuado para la determinación de concentraciones de adn, ARN y geles de proteínas, como el pegamento page.

III. apoyo técnico clave

Optimización del sistema óptico

Se utiliza una fuente de luz de transmisión ultravioleta o una fuente de luz de transmisión de luz blanca para garantizar una distribución uniforme de la luz y reducir el impacto de la densidad óptica desigual en los resultados. Las cámaras digitales o de alta resolución captan imágenes y combinan el diseño de la caja negra para bloquear la interferencia de la fuente de luz externa y mejorar la calidad de la imagen.

Función de análisis de software

El software admite deducciones de fondo, segmentación de tiras, escaneo de densidad y otras operaciones, que pueden generar gráficos de escaneo longitudinal e integrar para lograr una cuantificación precisa. Por ejemplo, en la cuantificación pcr, el software puede calcular el porcentaje relativo de cada banda en el total de la banda, mientras que el escaneo de densidad genera una curva de distribución vertical del valor gris de la banda.

IV. escenarios de aplicación y ventajas

Investigación de biología molecular: determinación precisa del peso molecular y la concentración de ADN / arn, ayudando a la clonación genética y la verificación de secuenciación.

Ingeniería de proteínas: análisis cuantitativo de la proporción de productos de expresión de proteínas y optimización del proceso de fermentación.

Desarrollo farmacéutico: evaluación de la pureza del medicamento a través de la determinación de la concentración para garantizar el control de calidad.

A través de procesos estandarizados y tecnología avanzada, el sistema realiza una doble cuantificación precisa del peso molecular y la concentración, proporcionando un soporte de datos confiable para la investigación en Ciencias de la vida.