I,Dispersador de luz láser multiángulo WyattPreparación antes de la prueba

Preparación del disolvente

Sistema de fase acuática: use agua ultrapura o prepare una solución salina (aproximadamente 1l), agregue un 0,02% de antimicrobiano Nan y filtre con una membrana filtrante de 0,22 micras.

Sistema de fase orgánica: se utiliza un disolvente de grado clar, que también se filtra con una membrana filtrante de 0,22 micras (los reactivos importados se tratan de acuerdo con la situación real).

Preparación de muestras

Concentración preparada de acuerdo con el rango de peso molecular (anillo cuantitativo 100 μl):

Peso molecular a 1000kda: 0,5 - 1mg / ML

Peso molecular a 100 kda: 1 - 2 mg / ML

Peso molecular a 10 kda: 3 - 5 mg / ML

Peso molecular a 5kda: 5 - 10 mg / ML

Las muestras deben filtrarse con una membrana filtrante de 0,22 micras o 0,45 micras, o eliminar las impurezas mediante un tratamiento centrífuga y prepararse con una fase móvil en la medida de lo posible.

Inspección de instrumentos

Confirme que la conexión del cable de alimentación, el interruptor de alimentación y el interruptor (adecuado para la conexión de señal del cable de red) están abiertos.

II. arranque y equilibrio del instrumento

Orden de encendido

Abra la bomba, la Caja de temperatura de la columna (temperatura establecida), el sistema de inyección (muestreador manual / automático), el detector diferencial o ultravioleta, el detector de viscosidad, la fuente de alimentación del detector de dispersión de luz láser de múltiples ángulos y la computadora a su vez.

Lavado y equilibrio del sistema

Abra la bomba, enjuague el sistema con agua ultrapura durante unos 5 minutos (bomba purge) y cierre la válvula purge.

Utilizar el último sistema de lavado de fase móvil preparado (el sistema orgánico utiliza directamente la fase móvil).

Ajustar el caudal a 0,1 ml / MIN (si se accede al detector de viscosidad, hay que esperar a que entre en la interfaz de trabajo antes de encender la bomba, y IP & DP está en estado de purge on).

Si la columna GPC / SEC no está conectada al sistema, el caudal se puede ajustar directamente a 0,1 - 1,0 ml / MIN (cuando el detector sin viscosidad, la válvula purge del detector diferencial debe estar en el Estado "purge on").

Si la columna GPC / SEC está conectada al sistema, es necesario aumentar la velocidad de flujo en 0,1 ml / MIN cada 1 - 2 minutos y ajustar la velocidad de flujo a 0,4 - 0,5 ml / MIN para equilibrar completamente el sistema.

Tiempo de equilibrio: se recomienda lavar y equilibrar el sistema de fase acuática con un día de antelación y comenzar la prueba al día siguiente; El tiempo de equilibrio del sistema de fase orgánica es generalmente de 3 - 12 horas.

3. operación de prueba y adquisición de datos

Equilibrio del sistema y estabilidad de la línea de base

Después de que el sistema esté completamente equilibrado, ajuste gradualmente la velocidad de flujo a la velocidad de flujo de prueba.

Ajuste la válvula de purge del detector diferencial al Estado "purge off" y vuelva a cero (cero) después de que la señal se estabilice.

El método de operación del visómetro (visco star) se muestra en el anexo y se espera que la línea de base se estabilice.

Llama a la plantilla de prueba

Llame a la plantilla de prueba correspondiente en el software Astra (se recomienda usar la plantilla / método creado por el ingeniero de instalación).

Inyección de una sola aguja: archivo → nuevo → experiencia desde la plantilla / método → my plantillas / métodos, seleccione la plantilla de prueba correspondiente.

Inyección del muestreador automático: archivo → nuevo → muestra establecida plantilla / secuencia blanca → my plantillas / método, seleccione la plantilla de prueba correspondiente.

Muestreo y adquisición de datos

Cambiar la válvula de inyección de "carga" al Estado de "proyecto" y inyectar la muestra a través del sistema de inyección.

El software Astra comienza automáticamente a recopilar datos, y después de completar la adquisición de datos, el software se detiene de acuerdo con el tiempo establecido o se detiene manualmente (experiencia → stop).

Conservación de datos

Después de completar la adquisición de datos, haga clic en archivo → guardar como..., nombre el archivo y guarde.

4,Dispersador de luz láser multiángulo WyattProcesamiento de datos y visualización de informes

Proceso de procesamiento de datos

Ajuste de la línea de base: haga doble clic en la base, marque ls 11 (ángulo de 90 °), ajuste el punto final de la línea de base, garantice el nivel de la línea de base y haga clic en ok / apply para guardar.

Pico fijo: mueva el ratón al punto de partida del pico, Presione el botón izquierdo y arrastre al punto de aterrizaje del pico, suelte el botón izquierdo para definir el área del pico, ajuste el borde del área del pico ligeramente y haga clic en ok / apply para guardarlo.

Entrada y normalización de valores de DN / dc: introduzca valores de DN / DC y elija normal (si las muestras estándar de menos de 50 KDA utilizadas en la plantilla, como BSA y dextran, se han normalizado bajo este sistema, no es necesario repetir la operación).

Ver informe: después de completar los pasos anteriores, consulte el informe para obtener los resultados de la prueba.

Corrección del instrumento (realizada regularmente)

Corrección del volumen de retraso: corregir el volumen de la tubería entre los detectores para garantizar la alineación de la posición de la punta del pico, generalmente realizada por el ingeniero de instalación, y los resultados se guardan en la plantilla de software astra.

Corrección de la señal de ángulo de 90 ° (corrección de tolueno): obtiene el coeficiente de corrección del valor de intensidad de la luz dispersa de ángulo de 90 ° y el valor de voltaje, y se recomienda una vez al año o cada seis meses.

Corrección de normalización de dieciocho ángulos: calibrar los otros 17 detectores con un ángulo de 90 ° como referencia y corregirlos con un estándar RG < 10 nm (como el dextran de glucosa derecha de 30 KDA o la BSA de seroalbúmina bovina).