I. rendimiento del propio instrumento: "hardware básico" de precisión

Los componentes centrales y el diseño del instrumento determinan directamente el límite inferior de la medición y son los factores fundamentales que afectan la precisión, incluidos principalmente los siguientes aspectos:

El principio central del medidor de clorofila de precisión del sistema óptico es la "diferencia de absorción / transmisión de luz de longitud de onda específica" (la clorofila absorbe fuertemente la luz roja de 660 nm y la absorción débil de la luz infrarroja cercana de 940 nm. la desviación del sistema óptico conduce directamente a la distorsión de los datos a través de La relación entre los dos:

Estabilidad de la fuente de luz: si la intensidad luminosa de la fuente de Luz LED (660 NM / 940 nm) es inestable (como el envejecimiento y las fluctuaciones de voltaje), causará diferentes referencias de señal óptica entre las dos mediciones, y habrá un problema de "grandes diferencias entre las múltiples mediciones de la misma muestra";

Pureza del filtro: si el filtro no puede filtrar con precisión la luz Miscelánea (por ejemplo, mezclar luz de otras longitudes de onda), interferirá con la señal óptica de la longitud de onda objetivo, lo que provocará una desviación en el cálculo del valor de absorción (por ejemplo, si la luz Miscelánea se mezcla en el canal de 660 nm, sobreestimará la absorción de clorofila, lo que hará que el resultado sea demasiado grande);

Sensibilidad del detector: si el Fotodetector (como el fotodetector) tiene una sensibilidad baja o una "corriente oscura" (corriente débil sin luz), no puede capturar con precisión la señal de luz transmitida débil, especialmente para muestras con un contenido extremadamente bajo de clorofila (como las hojas amarillentas), el error se amplificará significativamente.

El instrumento de Estado de calibración debe establecer una referencia de medición a través de una "placa de calibración estándar" (muestra simulada con contenido de clorofila conocido), si la calibración no es oportuna o el método de calibración es incorrecto, causará un desplazamiento general de los datos:

Calibración irregular: atenuación de la fuente de luz después del uso a largo plazo, envejecimiento del detector, puede hacer que las mediciones sean sistemáticas altas o bajas (como las muestras originales de contenido de clorofila 50spad, que pueden mostrarse como 45 o 55 después de no calibrarse);

Error en la operación de calibración: si hay manchas en la superficie de la placa de calibración y la ventana de medición no se ajusta completamente, se producirá un error en la referencia de calibración, y todas las mediciones posteriores de la muestra se verán afectadas.

Defectos en el diseño estructural

Sellado de la ventana de medición: si la ventana (generalmente vidrio de cuarzo) no está en contacto cercano con la muestra, hará que la luz ambiente (como la luz natural, la luz) entre en el área de medición, interfiriendo con la señal de luz (por ejemplo, la entrada de luz fuerte hará que la señal de luz transmitida sea demasiado grande y el contenido de clorofila calculado sea bajo);

Consistencia de la presión de agarre de la muestra: algunos instrumentos se miden a través de la hoja de agarre. si la presión de agarre es desigual (como el envejecimiento del resorte), el espesor de la hoja se comprime en diferentes grados: el espesor de la hoja afecta la transmisibilidad de la luz (la hoja gruesa transmite menos luz), y la inconsistencia de la presión hará que la señal de luz transmitida de la "muestra del mismo espesor" sea muy diferente, lo que a su vez aumentará el error.

II. Estado de la muestra: "fuente variable" de precisión

Las características propias de las muestras vegetales pueden causar "diferencias no relacionadas con la clorofila" en las señales ópticas, interfiriendo con los resultados de las mediciones, incluyendo principalmente:

Características físicas de las hojas

Espesor y uniformidad: El medidor de clorofila por defecto "espesor uniforme de la hoja, sin impurezas", si la hoja tiene espesor desigual (por ejemplo, borde delgado de la hoja, espesor central), pliegues o agujeros de gusano, puede causar anomalías de transmisión local de luz (por ejemplo, penetración directa de luz en el agujero de gusano, valor de absorción de 0, por lo que el valor de medición de este punto es mucho menor que el real);

Adherencia superficial: el polvo, el rocío y los residuos de pesticidas en la superficie de las hojas reflejan o absorben parte de la señal óptica (por ejemplo, el polvo refleja luz roja, lo que hace que el detector reciba menos luz transmitida y juzgue erróneamente un alto contenido de clorofila), especialmente cuando las muestras no limpiadas después de la medición en el campo, el error es más evidente.

Estado fisiológico de las hojas

Distribución desigual de la clorofila: el contenido de clorofila cerca de la vena media de las hojas de algunas plantas (como el maíz) es superior al borde, y si la vena media no se evita al medir o la posición de cada medición es diferente, puede conducir a "grandes diferencias en la medición múltiple de la misma hoja";

Frescura de la muestra: si las hojas después de la recolección se colocan durante demasiado tiempo (por ejemplo, más de 30 minutos), pueden causar cambios en la estructura celular debido a la pérdida de agua, afectando la transmisión de la luz (por ejemplo, las hojas se acurrucan para aumentar la dispersión de la luz), mientras que la clorofila puede degradarse ligeramente, lo que resulta En mediciones inferiores a las del Estado vivo real.

La estructura de las hojas (por ejemplo, el espesor de la cutícula, la composición de los pigmentos) de las diferentes variedades vegetales es diferente de la etapa de crecimiento: por ejemplo, el espesor de la cutícula de las plantas suculentas absorbe parte adicional de la luz roja, y si el instrumento no ajusta los parámetros para esta variedad (por ejemplo, corrige el coeficiente de absorción de luz de la cutícula), puede conducir a un alto valor de medición sistemático; Además, las hojas jóvenes de la misma planta tienen una composición diferente de los pigmentos de las hojas antiguas (las hojas antiguas pueden contener un aumento de la proporción de carotenoides), que absorben una pequeña cantidad de luz de 660 nm, lo que interfiere con el cálculo de la clorofila.

III. método de operación: "factores de control humanos" de precisión

El funcionamiento correcto es la clave para evitar "errores no sistémicos", y los efectos de los errores operativos comunes en la precisión incluyen:

La selección inadecuada de la posición de medición no sigue el principio de "evitar la vena central y seleccionar una zona uniforme en el Centro de la hoja": por ejemplo, alinear la sonda con la vena central de la hoja (la vena central no tiene clorofila, contiene principalmente celulosa, transmita la luz), lo que puede hacer que la medición sea mucho menor de lo Real (por ejemplo, 50 Spad reales, la medición puede ser solo 20); O una gran diferencia en la posición de cada medición (como el Centro de una medición y el borde de una medición), lo que resulta en una mala precisión de medición repetida.

Colocación de la muestra y modo de presión de la sonda

La muestra no cubre completamente la ventana de medición: si el área de la hoja es pequeña (como las hojas de las plántulas) y la ventana no está completamente bloqueada, causará la entrada de luz ambiente, lo que hará que la señal de luz transmitida sea grande y el valor de cálculo de clorofila sea bajo;

La presión de la sonda es desigual: un instrumento de compresión manual parcial, si se presiona demasiado ligero (la ventana no está en contacto cercano con la hoja, fugas de luz) o demasiado pesado (la hoja está aplastada, el líquido celular se filtra, cambia la transmisión de la luz), puede causar señales de luz anormales.

Errores en el registro y procesamiento de datos

No se realiza una medición repetida: una sola medición es vulnerable a factores accidentales (como pequeños agujeros de gusano en un punto de la hoja), si no se realiza "tres mediciones repetidas de la misma muestra para obtener un promedio" de acuerdo con el estándar, causará un gran error de aleatoriedad de los datos;

No se descartan valores anormales: por ejemplo, tres mediciones son 48, 50, 22 (22 es un valor anormal, porque la medición se alinea erróneamente con la vena central), si se toma directamente el promedio (40), se desviará significativamente del valor real (alrededor de 49).