La enfermedad del agua, en cuanto a los pedreros, también es la tendencia "-" arte de la guerra de Sun Tzu ". Dijo que mientras la velocidad sea lo suficientemente rápida, la piedra puede flotar en el agua. El mes pasado hablamos de reducir la tasa de calentamiento del recocido.Retraso en la optimización del procedimiento de reacción PCR) para optimizar los resultados de la pcr, hoy cambie de dirección y hable sobre cómo comprimir la duración de la reacción pcr.

Antes de hablar sobre la duración de la compresión, es necesario controlar la temperatura del tubo de ensayo / módulo; Introducción a varios conceptos de modo ordinario / rápido. A continuación, tome baiheng q9606 como ejemplo para ilustrar.

Figura 1

Control de temperatura del módulo:Al reaccionar al aumento y la disminución de la temperatura, prevalecerá la temperatura en tiempo real del módulo.

Control de temperatura del tubo de ensayo:Al aumentar o disminuir la temperatura de reacción, se basa en la temperatura en tiempo real del reactivo en el tubo de reacción.

Figura 2

Figura 3

Después de completar la edición experimental, haga clic en el botón de ejecución para aparecer un cuadro de recordatorio (como se muestra en la figura 2) y elija el modo rápido o el modo ordinario.

Tomemos como ejemplo el programa de la figura 3 para ilustrar:

Modo rápido:La velocidad de subida y bajada de la temperatura del instrumento es de 8 ° C / s, marcando el experimento completo de operación de la velocidad de subida y bajada de la temperatura.

Modo ordinario:La tasa de temperatura de subida y bajada del instrumento es de 4 ℃ / s, marcando el experimento de operación de media frente de la tasa de temperatura de subida y bajada.

Diferentes escenarios de aplicación seleccionan diferentes combinaciones de patrones de reacción, y a continuación se comparte cómo depurar el programa de reacción del reactivo rápido.

En primer lugar, la configuración de funcionamiento del instrumento selecciona la combinación de modo rápido + control de temperatura del módulo para comprimir el tiempo de reacción. En segundo lugar, bajo la premisa de que la duración total no cambia, la duración de la desnaturalización y la extensión del recocido de los segmentos circulares se distribuye razonablemente. Finalmente, el ajuste se realiza sobre la base de la selección secundaria de los procedimientos de reacción disponibles, acortando una vez más la duración de la etapa de reacción o alargando adecuadamente la duración de la etapa de reacción para lograr el efecto de reacción cuando la duración total lo permita.

Debido a que las enzimas amplificadas utilizadas en los reactivos rápidos tienen una velocidad de extensión más rápida que las enzimas utilizadas en los reactivos ordinarios, se puede realizar una compresión sustancial al establecer el tiempo de reacción de la extensión de recocido. Se debe tener en cuenta al comprimir la duración de la reacción de desnaturalización, ya que se selecciona el control de temperatura del módulo, si la duración de la desnaturalización es demasiado corta, la temperatura real del reactivo será inferior a 95 ° c o la duración de mantenimiento de 95 ° C será insuficiente, lo que causará una solución insuficiente de la doble cadena de la plantilla y afectará a la acumulación de señales, por lo que la duración de la fase de reacción de desnaturalización no debe ser excesiva.

La serie baiheng q9600 está disponibleMáximo 8 ° C / sLa velocidad de subida y bajada de la temperatura, y tiene la función de gradiente de diferencia de temperatura igual (como se muestra en la figura 4), que satisface el desarrollo y la detección de reactivos convencionales, pero también proporciona una buena plataforma de respuesta para reactivos rápidos.

Figura 4