Los factores que afectan el rendimiento de la columna son:I. factores físicos:
(1) pureza del silicona: pureza del silicona y concentración de iones metálicos residuales, las impurezas del silicona afectarán la forma del pico del compuesto, el alto contenido metálico en la superficie del silicona afectará la forma del pico del compuesto alcalino, fácil de arrastrar la cola.
(2) la longitud y el diámetro interior de la cama rellena del tamaño de la columna, aumentar la longitud de la columna, puede mejorar la eficiencia de la columna hasta cierto punto, pero también aumentará la presión y hará que el pico se ensanche; El diámetro de la columna ancha aumenta la carga de la muestra, pero también aumenta la difusión lateral, lo que también conduce a la ampliación del pico. El diámetro estrecho de la columna puede ahorrar disolventes y reducir la difusión lateral, pero la presión es alta y los requisitos para el sistema son altos.
(3) la forma de las partículas y el tamaño de las partículas esféricas tienen una alta eficiencia de columna, una buena reproducibilidad, una estructura de cama de columna uniforme, una estructura de cama de columna irregular desigual, una velocidad de línea de fase de flujo desigual y una fácil ampliación de la banda espectral; El diámetro promedio de las partículas, cuanto menor sea el tamaño de las partículas, mayor será la eficiencia de la columna y mayor será la presión de la columna. Cuanto más amplia sea la distribución del tamaño de las partículas, menor será la eficiencia de la columna y mayor será la presión.
(4) superficie de partículas: la suma de la superficie exterior de las partículas y la superficie del agujero interior, representada en m2 / g, una superficie relativamente alta tiene una fuerte capacidad de retención para la muestra, una mayor capacidad de columna y separación. La superficie baja puede alcanzar el Estado de equilibrio más rápido y es más adecuada para el procedimiento de elución de gradiente.
¿(5) tamaño del agujero: ¿ el tamaño promedio del agujero o cavidad de las partículas, el rango es de 80 a 300? Las partículas de relleno de gran tamaño de Poro pueden prolongar el tiempo de retención de solutos macromoleculares en la superficie del relleno y mejorar la separación, por lo que los rellenos de gran tamaño de Poro son adecuados para separar compuestos macromoleculares o moléculas con grandes volúmenes hidrodinámicos.
2. factores químicos:
(1) tipo de unión y fase de unión: las moléculas de fase de Unión están conectadas a un solo punto de la matriz como Unión individual. este método de Unión puede aumentar la tasa de transferencia de masa y acortar el tiempo de equilibrio de la columna; La Unión de polímeros es una molécula de fase unida que está conectada a varios puntos de la matriz. este método de Unión puede aumentar la estabilidad de la columna cromatográfica y aumentar la carga de muestras. Las diferentes fases de unión afectarán directamente el comportamiento de retención del compuesto.
(2) cobertura de carbono: la alta cobertura de carbono puede mejorar la resolución y la reproducibilidad, pero el tiempo de análisis es largo.
(3) extremo de sellado: hay algunos grupos hidroxi de silicio residuales sin extremo sellado en el relleno de fase de Unión de silicona. como se muestra en la imagen, el extremo de sellado puede reducir la reacción entre el componente a medir y el Grupo hidroxi de silicio ácido residual en la superficie del silicona y mejorar la retención y el pico, lo que Es particularmente importante para los compuestos alcalinos. Diferentes técnicas de sellado también afectarán directamente la eficiencia de la columna cromatográfica.