Como componente central del cromatógrafo, los detalles de uso de la columna están directamente relacionados con la precisión, reproducibilidad y vida útil de la columna de los resultados del análisis. El siguiente es un análisis exhaustivo de los detalles clave del uso:
Instalación y activación inicial
1. inspección de la adaptabilidad del sistema: antes de la instalación, es necesario inspeccionar exhaustivamente la estanqueidad y limpieza del sistema de gas o líquido del instrumento. La cromatografía de gases debe centrarse en la pureza del gas portador y la seguridad de la ventilación; La cromatografía líquida, por su parte, debe confirmar la compatibilidad de la fase móvil con el disolvente de conservación en la columna y, si es necesario, convertirlo a través del disolvente de Transición.
2. tratamiento final: los dos extremos de la columna cromatográfica deben ser cortados planos y equipados con una almohadilla de sellado adecuada para garantizar que no haya burras y estén bien sellados, evitando volúmenes muertos o fugas. Al insertar la entrada de la muestra y el detector, se deben seguir estrictamente los requisitos de profundidad para evitar la pérdida de eficiencia de la columna.
3. envejecimiento y equilibrio: las nuevas columnas deben envejecer para eliminar las impurezas residuales. La cromatografía de gases debe calentarse por secciones hasta la temperatura máxima de tolerancia y monitorear la estabilidad de la línea de base; La cromatografía líquida, por su parte, logra la saturación de adsorción a través de múltiples procedimientos de análisis completos, especialmente para los compuestos macromoleculares que requieren un largo tiempo de Envejecimiento.
Control de las condiciones de funcionamiento
1. manejo de temperatura y presión: evite fluctuaciones drásticas de temperatura y presión para evitar daños en la estructura de la cama de columna. La Cromatografía líquida también debe prestar atención al límite superior de temperatura de las columnas de matriz de silicona.
2. uso de fase móvil y sal tampón: el flujo corresponde a la fijación para evitar disolventes altamente corrosivos. Se debe filtrar completamente al usar sal tampón y enjuagarla después para evitar que la precipitación y la cristalización bloqueen el relleno. El cambio de la proporción de disolvente en la cromatografía de fase inversa debe ser gradual para evitar el colapso de la fase de unión.
3. preprocesamiento de muestras: todas las muestras deben ser filtradas o centrifugadas para eliminar partículas y se debe dar prioridad a la extracción en fase sólida y otros métodos para purificar sustratos complejos. La adición de columnas protectoras antes de la inyección puede interceptar eficazmente partículas y contaminantes químicos.
Mantenimiento y conservación
1. limpieza y regeneración periódicas: después de un uso a largo plazo, se puede lavar y regenerar con un fuerte disolvente, pero se debe prestar atención al control de dirección y velocidad de flujo. Si se produce un aumento de la presión de la columna o una forma de pico anormal, se puede tratar de podar el relleno de la cabeza de la columna para restaurar el rendimiento.
2. estrategia de conservación: se recomienda utilizar la fase móvil actual (sin sal tampón) para la conservación a corto plazo; Para la conservación a largo plazo, se seleccionan metanol puro o nitrilo, y tipos especiales como columnas de intercambio de iones pueden agregar agentes antibacterianos. Al conservarlo, debe sellarse y etiquetarse la información del disolvente para evitar la luz y el secado.
Manejo de escenarios especiales
1. remedio de desalación de sal tampón: cuando se produce la precipitación, se puede lavar en sentido inverso con una solución mixta de metanol / agua, combinada con el calentamiento para acelerar la disolución.
2. control del rango de ph: las columnas de cromatografía de matriz de silicona deben controlar estrictamente el pH de la fase móvil, y en condiciones especiales se puede seleccionar silicona híbrida o tomar medidas de protección precolumna.
El uso de la columna debe atravesar estrictas especificaciones de operación y estrategias de mantenimiento. Desde la instalación hasta el análisis diario, el control detallado de cada enlace afectará la eficiencia y la vida útil de la columna.