Cromatógrafo Líquido de laboratorioLa calibración metrológica es un proceso que involucra múltiples aspectos, y los siguientes son los pasos y precauciones detallados:

I. condiciones ambientales

Antes de realizar la calibración metrológica del cromatógrafo líquido, se garantizará que las condiciones ambientales cumplan los siguientes requisitos:

La temperatura ambiente debe mantenerse en (15 a 30) ℃, y el cambio de temperatura durante el proceso de calibración no debe exceder de 3 ℃ (para el detector de índice de refracción diferencial, el cambio de temperatura ambiente no debe exceder de 2 ℃).

La humedad relativa interior debe mantenerse en (20 a 85%).

No se deben almacenar artículos inflamables, explosivos y altamente corrosivos en la habitación.

No hay vibraciones mecánicas obvias e interferencia electromagnética, y la ventilación es buena.

II. sustancias de referencia y equipos de calibración

Se utilizarán materiales de referencia certificados por el Estado y se garantizará que el equipo de calibración esté calificado para la verificación metrológica. Las sustancias de referencia comunes incluyen:

Material de referencia de la solución de naftaleno - metanol, con un valor fijo de 1,00 × 10 '- 4G / ml, con una incertidumbre extendida inferior al 4%.

El material de referencia de la solución de metanol de colesterol, con un valor estándar de 200 μg / ml, tiene una incertidumbre extendida inferior al 2,0%.

Otros materiales de referencia seleccionados de acuerdo con las necesidades de calibración específicas.

El equipo de calibración puede incluir un pipeta, un cilindro aforo, un termómetro, etc.

III. pasos de calibración

1. calibración del sistema de infusión

Resistencia a la presión de la bomba: conecte todas las partes del instrumento, tome metanol (o agua pura) como fase móvil y establezca el caudal en 0,2 ml / min. Inicie el instrumento y mantenga la presión estable durante 10 minutos para comprobar si hay fugas en cada interfaz de tubería. Retire la columna y bloquee el extremo de salida de la bomba para que la presión alcance el 90% del valor máximo permitido, mantenga durante 5 minutos y confirme que no hay fugas.

Error de configuración del caudal de la bomba y estabilidad del caudal: establecer el caudal según sea necesario, activar el instrumento y esperar a que la presión se estabilice, recoger la fase móvil en la salida de la fase móvil con un matraz aforo limpio, cronometrar y pesar, y calcular el caudal medido. Repetir la calibración 3 veces para garantizar la precisión.

Error de gradiente: establecer un procedimiento de elución de gradiente para dibujar y calcular la curva de cambio de gradiente con el disolvente a (como el agua) y el disolvente b (como la solución acuosa que contiene 0,1% de cetona).

2. corrección de errores y estabilidad del punto de ajuste de temperatura de la Caja de columnas

Coloque la sonda del termómetro digital en la misma posición que la columna en el termostato de la columna.

Elija establecer la temperatura (por ejemplo, 35 ° C y 45 ° c), registre la lectura después de que la temperatura se estabilice y registre cada 10 minutos, un total de 7 veces.

Calcular la diferencia entre el valor promedio y el valor establecido como el error del valor establecido de la temperatura de la columna, y la diferencia entre el valor máximo y el valor mínimo de las siete lecturas como la estabilidad de la temperatura de la columna.

3. calibración del detector

Tomando como ejemplo el detector de luz visible ultravioleta y el detector de matriz de diodos, se conectan todas las partes del instrumento y se seleccionan columnas cromatográficas y fases móviles adecuadas.

Establecer los parámetros de medición correspondientes, como la longitud de onda, la sensibilidad, etc.

Después de la estabilización de la línea de base, se inyecta un cierto volumen de solución de sustancia estándar (como una solución de naftaleno - metanol de 1,0 × 10 '- 4G / ml), y se determina y registra continuamente el tiempo de retención y el área del pico del pico cromatográfico.

4. calibración de precisión del volumen de muestra (si es aplicable)

Se puede realizar mediante el método de calibración estándar, el método de pesaje, el método de calibración cuantitativa del anillo o el método de comparación con el muestreador estándar.

Método de calibración estándar: utilice una solución estándar de concentración conocida para inyectar muestras varias veces, registre el valor de respuesta del pico de cromatografía y calcule la precisión del volumen de inyección.

Método de pesaje: calcular el volumen real de disolvente absorbido mediante pesaje y compararlo con el volumen establecido.

Método de calibración del anillo cuantitativo: compruebe la precisión del volumen del anillo cuantitativo y juzgue observando la forma del pico cromatográfico y el valor de respuesta.

Método de comparación con el muestreador estándar: utilice el muestreador estándar para el análisis comparativo, calcule la desviación del volumen de muestreo y ajuste.

IV. registros e informes de calibración

Durante el proceso de calibración se registrarán en detalle los datos y observaciones.

Una vez finalizada la calibración, se preparará un informe de calibración, que incluirá la fecha de calibración, las condiciones ambientales, el equipo de calibración, los pasos de calibración, el registro de datos y los resultados del análisis.

El informe de calibración será revisado y firmado por un profesional para su confirmación.

V. precauciones

Durante el proceso de calibración, se deben cumplir estrictamente los protocolos de operación y las normas de Seguridad.

Al usar sustancias de referencia, se debe garantizar que estén dentro de su vida útil y conservadas adecuadamente.

El equipo de calibración debe mantenerse y verificarse periódicamente para garantizar su precisión.

La calibración metrológica del Cromatógrafo Líquido de laboratorio es un proceso complejo y fino que requiere que los profesionales sigan estrictamente los protocolos de operación para garantizar la precisión y fiabilidad del instrumento.