Las tabletas de prueba de número total de colonias (o papel bacteriano) son una herramienta de detección microbiana utilizada para detectar el número de bacterias en muestras como agua, alimentos, medicamentos y aire. Este método se utiliza a menudo para juzgar la contaminación bacteriana en las muestras de manera rápida y sencilla. Al observar el crecimiento de las colonias en el papel, se puede evaluar preliminarmente el contenido microbiano en la muestra. Los siguientes son los pasos de Observación de los resultados de la prueba microbiológica de la tableta de prueba del número total de colonias:
1. preparativos
Preparación de la muestra: preparar la muestra a detectar de acuerdo con el tipo de muestra probada (como agua, aire, alimentos, etc.), siguiendo los pasos de operación prescritos.
Operación estéril: durante la operación, asegúrese de que todas las herramientas, contenedores y el medio ambiente sean estériles para evitar el impacto de la contaminación externa en los resultados de las pruebas.
Preparación de la película de prueba: asegúrese de que la película de prueba del número total de colonias esté dentro del período de validez y se almacene de acuerdo con las instrucciones. Compruebe si la película de prueba está seca y libre de daños.
2. pasos de operación
Vacunación de la muestra: inocular la muestra uniformemente en la película de prueba de acuerdo con los requisitos de la prueba (como dilución, tamaño de muestra, etc.). Al vacunarse, asegúrese de que las manos u otras herramientas del operador no estén contaminadas y evite la contaminación cruzada.
Cultivo: poner las tabletas de prueba vacunadas en condiciones de cultivo adecuadas (generalmente una incubadora a temperatura constante de 37 ° c). De acuerdo con los requisitos experimentales, generalmente se necesitan 24 - 48 horas de cultivo, dependiendo del tipo de muestra y la tasa de crecimiento de la bacteria.
Observación: después del cultivo, se observa si hay crecimiento de colonias en el papel. Las colonias suelen ser pequeños puntos redondos de color blanco o claro, y el tamaño, la morfología y el color varían según el tipo de bacteria.
3. observar el tipo y el número de colonias
Número de colonias:
Recuento de colonias: cada colonia visible representa una bacteria. De acuerdo con los resultados del cultivo, se calcula la cantidad de bacterias en cada muestra unitaria (generalmente representada por el número de colonias por mililitro o gramo de muestra).
Determinación del valor estándar: juzgar si las muestras de prueba cumplen con los requisitos de higiene, seguridad o calidad de acuerdo con las normas nacionales o las normas de la industria. En general, el valor estándar del número total de colonias variará según el tipo de muestra.
Morfología de la colonia:
La morfología de las colonias es diferente: las colonias en las tabletas de detección pueden presentar diferentes colores, formas y tamaños, lo que puede proporcionar pistas para la identificación microbiana posterior.
Características comunes de las colonias:
Circular: común en la mayoría de las bacterias.
Forma irregular: puede ser algún tipo especial de bacteria.
Borde claro y inexistente: las colonias con bordes claros suelen ser cultivos puros, mientras que los bordes poco claros pueden indicar que la flora es más compleja.
Cambios de color: algunas bacterias pueden secretar pigmentos durante el cultivo, lo que provoca cambios en el color de las colonias. Por ejemplo, Staphylococcus aureus produce colonias aureus, lo que indica su crecimiento.
5. determinación de los criterios de recuento de colonias
Según los diferentes tipos de muestras (como agua potable, alimentos, medicamentos, etc.), hay diferentes requisitos estándar. Por ejemplo:
Agua potable: el estándar común es que el número total de colonias por mililitro de agua no debe exceder de 500.
Alimentos: el estándar para el número total de colonias en los alimentos puede ser más estricto, generalmente controlado dentro de un cierto rango de cantidades (por ejemplo, el número total de colonias en cada gramo de alimentos no debe exceder de 10000).
Determinación del exceso de estándar: si el número de colonias de los resultados de la prueba supera el valor estándar, significa que la contaminación bacteriana en la muestra es grave y puede haber riesgos potenciales de Seguridad alimentaria, problemas de higiene u otros problemas de calidad.
6. análisis de los resultados
Número bajo de colonias: si el número de colonias es pequeño o no crece, significa que el contenido microbiano en la muestra es bajo y cumple con los estándares de higiene.
Alto número de colonias: si se detectan más colonias, indica que la muestra puede tener problemas de contaminación. Es necesario analizar más a fondo las posibles fuentes de contaminación y adoptar las medidas sanitarias correspondientes.
Colonias de diversidad: si se observan diferentes formas de colonias, puede indicar que hay muchas bacterias diferentes en la muestra, que deben identificarse a través de nuevas pruebas bioquímicas, pruebas moleculares y otros medios.
7. preguntas frecuentes y resolución de problemas
No hay crecimiento de colonias: si no hay colonias en la película de prueba, puede ser causado por la cantidad insuficiente de vacunación, el tiempo de cultivo insuficiente, el manejo inadecuado de la muestra, etc. Se puede aumentar la cantidad de vacunación o prolongar el tiempo de cultivo.
Demasiadas colonias: si aparecen demasiadas colonias, pueden deberse a la contaminación excesiva de las muestras y la vacunación desigual en la superficie de las tabletas de prueba. En este momento, la prueba se puede volver a realizar diluyendo la muestra.
8. precauciones
Los resultados son solo para referencia: la película de prueba del número total de colonias es una herramienta de detección y no puede representar completamente el tipo y la cantidad de todos los microorganismos en la muestra. Para analizar más a fondo los tipos y características de los microorganismos de la muestra, puede ser necesario realizar una identificación microbiana más detallada.
Factores ambientales: la forma en que se procesan las muestras, la temperatura ambiente, la humedad y otros factores pueden afectar el crecimiento de las colonias, por lo que es necesario tratar de mantener la consistencia de las condiciones experimentales durante la operación.
Al observar el crecimiento de las colonias en el papel bacteriano, se puede juzgar preliminarmente la contaminación microbiana en la muestra y ayudar a los detectores a evaluar la calidad y seguridad de la muestra.