El método de análisis del espectrómetro de masas de alta resolución de segunda mano gira principalmente en torno a sus funciones básicas, incluyendo la preparación de muestras, el funcionamiento del instrumento, la adquisición y el procesamiento de datos, y debe optimizarse en combinación con sus características de alta resolución. los siguientes son métodos de análisis específicos:
I. preparación de muestras
Adaptación del Estado de la muestra: elija el método de tratamiento adecuado en función de si la muestra es sólida, líquida o gaseosa. Por ejemplo, si la pureza de las muestras líquidas es baja, las impurezas deben eliminarse mediante filtración, extracción, concentración, etc.; Si la muestra sólida es estable en calor, se puede triturar en polvo y disolverse, y los sólidos no solubles pueden necesitar derivación o utilizar la tecnología de inyección directa de sólidos; Las muestras de gas generalmente se inyectan directamente a través de válvulas de muestreo de gas o se enriquecen a través de dispositivos de adsorción y desorción.
Selección de disolventes: elija disolventes compatibles con fuentes de iones, como los disolventes polares comúnmente utilizados en fuentes esi y los disolventes no polares comúnmente utilizados en fuentes eI para evitar que los disolventes reaccionen con muestras o produzcan iones perturbadores.
Tratamiento de muestras biológicas: para muestras biológicas (como sangre y orina), es necesario eliminar interferencias macromoleculares como proteínas, como el método de precipitación y la filtración centrífuga.
II. funcionamiento de los instrumentos
Arranque y precalentamiento: arranque en el orden de las instrucciones del instrumento, generalmente primero abra la bomba de vacío, la fuente de alimentación, luego abra el software de la máquina principal y la estación de trabajo para garantizar que el sistema de vacío alcance el vacío de trabajo, la fuente de iones, el analizador de masa y otros componentes sean estables, el tiempo de precalentamiento suele ser de 30 minutos a 2 horas.
Configuración de los parámetros de la fuente de ionización:
Selección de métodos de ionización: selección de métodos de ionización según el tipo de muestra, como ei, esi, maldi, etc.
Ajuste de parámetros: establecer la temperatura de la fuente de iones, el voltaje de ionización, la velocidad del flujo de aire (como el gas de vaina de esi, el gas auxiliar), etc. Por ejemplo, la fuente eI establece la energía electrónica (generalmente 70ev), la temperatura de la fuente de iones (150 - 300 grados celsius); La fuente esi establece el voltaje de pulverización (3 - 5kv), la temperatura del Capitolio (200 - 350 ℃), la presión del gas de atomización.
Configuración de los parámetros del analizador de calidad:
Rango de escaneo: establece el rango de escaneo (rango M / z, como 50 - 1000).
Velocidad y resolución de escaneo: según la demanda, la caracterización requiere alta resolución y la cuantificación requiere escaneo rápido. El espectrómetro de masas de alta resolución puede proporcionar picos M / Z de hasta 4 - 5 decimales, lo que ayuda a identificar compuestos con mayor certeza y confianza.
Configuración de los parámetros del equipo de combinación: si se combina con la espectrometría de masas (como GC - MS / LC - ms), es necesario establecer simultáneamente las condiciones de la espectrometría de masas (como la temperatura de la columna, el caudal y la proporción de fase móvil) para garantizar que la separación de la espectrometría de masas coincida con la detección de la espectrometría de masas.
III. adquisición y procesamiento de datos
Método de inyección:
Inyección de cromatografía: las muestras se separan primero por cromatografía de gases (gc) o Cromatografía líquida (lc), y luego entran en la espectrometría de masas a través de la interfaz, adecuada para mezclas complejas (como alimentos, muestras ambientales).
Inyección automática de muestra: las muestras por lotes se pueden introducir sucesivamente a través de un muestreador automático, lo que mejora la eficiencia y reduce el error humano.
Adquisición de datos: iniciar la función de "adquisición" del software de la estación de trabajo, el instrumento escanea automáticamente los iones de la muestra en relación calidad - carga y genera un espectrómetro de masas en tiempo real (el eje transversal es M / Z y el eje longitudinal es la intensidad de los iones). Para el análisis cuantitativo, primero es necesario recoger la señal de espectrometría de masas del estándar, establecer la curva estándar (relación entre la intensidad de los iones y la concentración), y luego analizar muestras desconocidas.
Procesamiento de datos:
Análisis cualitativo: determinar el tipo de compuesto comparando las bibliotecas espectrales estándar (como las bibliotecas nist) con picos iónicos característicos (como los picos de iones moleculares y los picos de iones fragmentados); La espectrometría de masas de alta resolución puede dar directamente un peso molecular preciso y ayudar a la identificación estructural.
Análisis cuantitativo: seleccionar los iones característicos del compuesto objetivo (como el par de iones madre - hijo, adecuado para la espectrometría de masas tripolar) y calcular la concentración de la muestra de acuerdo con la curva estándar.
Verificación de resultados: exportar los resultados del análisis (como espectrometría de masas, informe de concentración) y verificar los resultados (como descartar falsos positivos y confirmar la pureza del pico).
IV. consideraciones especiales para los espectrómetros de masas de alta resolución
Optimización de resolución: la ventaja central del espectrómetro de masas de alta resolución radica en su alta resolución, por lo que esta característica debe aprovecharse al máximo durante el análisis. Por ejemplo, al distinguir compuestos de masa similar, el espectrómetro de masas de alta resolución puede proporcionar mediciones de masa más precisas, identificando así con precisión los compuestos.
Sensibilidad y relación señal - ruido: los espectrómetros de masas de alta resolución suelen tener una alta sensibilidad, pero todavía hay que prestar atención a la relación señal - ruido al analizar muestras de baja concentración. La relación señal - ruido se puede mejorar optimizando los parámetros del instrumento (como la temperatura de la fuente de iones, el voltaje de ionización, etc.) y el procesamiento de la muestra (como concentración, purificación, etc.).
Mantenimiento y calibración: los espectrómetros de masas de alta resolución de segunda mano pueden tener problemas de disminución del rendimiento debido al largo tiempo de uso, por lo que deben mantenerse y calibrarse regularmente. Por ejemplo, limpiar el sistema de inyección de muestras, reemplazar los componentes envejecidos, calibrar la precisión de la relación calidad - carga, etc.