El método central del Cultivo celular de microgravedad para evitar la aglomeración celular

1. optimizar la densidad de vacunación: controlar la concentración celular inicial en 1 × 10 ⁴ a 5 × 10 ⁵ células / ML (ajustada por tipo celular) para evitar aglomeraciones naturales causadas por concentraciones excesivas.

2. elija el medio de adaptación: agregue una cantidad adecuada de antiaglomerantes (como 0,1% a 0,5% de metilcelulosa, pralan polisacárido) o use un medio bajo / libre de suero para reducir la adherencia mediada por proteínas.

3. fortalecer el equilibrio dinámico del sistema de cultivo: utilizar la función de control de velocidad precisa de Beijing keyu Xingye tdccs - 3d para mantener una rotación suave de 5 a 20 rpm y dispersar las células a través de la fuerza de corte de fluidos; Cambiar regularmente el medio de cultivo de 1 / 3 para eliminar los residuos metabólicos y los factores inductores de la aglomeración.

4. células y contenedores pretratados: digerir suavemente la masa celular con Tripsina antes de la vacunación para garantizar el Estado de suspensión unicelular; La pared interior del frasco de cultivo se trata hidrofílicamente o se recubre (como la polylisina), lo que reduce la probabilidad de aglomeración de células adheridas a la pared.

5. regulación precisa del entorno de cultivo: mantener un pH de 7,2 a 7,4 y una temperatura de 37 ° C ± 0,5 ° C para evitar la acumulación de estrés celular causada por fluctuaciones ambientales; Algunas células pueden agregar EDTA (0,02%) para ayudar a la dispersión.