La calibración del analizador de nitrógeno total debe seguir la lógica de "preparar primero, luego calibrar y luego verificar". el núcleo es establecer la relación correspondiente entre el valor de respuesta del instrumento y la concentración total de nitrógeno a través de la sustancia estándar para garantizar que los resultados de la prueba sean precisos. Los siguientes son los pasos específicos (tomemos como ejemplo el analizador de nitrógeno total con el principio común de digestión del persulfato de potasio alcalino - espectrometría ultravioleta):

I. preparación antes de la calibración

Preparación de instrumentos y reactivos

Asegúrese de que el instrumento esté en condiciones normales de funcionamiento: encienda el precalentamiento (precalentar durante 30 - 60 minutos de acuerdo con los requisitos de las instrucciones) y verifique si los parámetros clave como la temperatura del módulo de digestión, la intensidad de la fuente de luz del detector ultravioleta y la estanqueidad del sistema de inyección son normales.

Preparación de la solución estándar: diluir paso a paso en una serie estándar de al menos tres puntos de concentración sin amoníaco utilizando una reserva estándar de nitrógeno total reconocida a nivel nacional (como 1000mg / lkno ₃ estándar) (el rango de concentración debe cubrir la concentración esperada de la muestra de detección diaria, como 0,5 mg / l, 2 mg / l, 5 mg / l, 10 mg / l, y el vacío es agua sin amoníaco). La solución estándar debe mezclarse ahora para evitar la contaminación.

Preparación de reactivos auxiliares: preparar soluciones alcalinas de persulfato de potasio, soluciones de ácido clorhídrico (para muestras después de la neutralización y digestión) de acuerdo con los requisitos del instrumento para garantizar que la pureza del reactivo cumpla con los requisitos de análisis (como la pureza superior).

Limpieza de contenedores y sistemas de muestras

El tubo de comparación de color y la botella de muestra para la calibración deben remojarse en ácido clorhídrico, enjuagarse y secarse repetidamente con agua sin amoníaco para evitar la contaminación residual por nitrógeno.

Ejecute el procedimiento de "limpieza de tuberías" del instrumento, enjuague la tubería de entrada de muestra, la tubería de digestión y la piscina de detección con agua sin amoníaco para eliminar los residuos de la prueba anterior.

II. pasos de la operación de calibración

1. calibración en blanco (calibración cero)

Tomando el agua sin amoníaco como muestra en blanco, se introduce de acuerdo con el proceso de "determinación en blanco" del instrumento: se completa la inyección, la digestión a su vez (generalmente 120 - 124 ° C se disipa durante 30 minutos), el enfriamiento, la neutralización y la comparación de color (se mide la absorción a 220 nm y 275 nm de longitud de onda).

El instrumento registrará automáticamente el valor de absorción en blanco y lo utilizará como referencia para deducir la interferencia en blanco de las muestras estándar posteriores y las muestras reales, completando la "calibración cero". Si el valor en blanco es demasiado alto (por ejemplo, la Absorbancia es superior a 0030), es necesario volver a comprobar que no hay pureza de amoníaco, contaminación por reactivos o limpieza de la línea del instrumento.

2. calibración de la curva estándar (paso central)

De acuerdo con el orden de concentración de bajo a alto, se coloca la solución de la serie estándar en la posición de inyección del instrumento a su vez, se inicia el procedimiento de "determinación de la curva estándar", el instrumento disipará automáticamente y comparará el color de cada punto de concentración, y registrará el valor de absorción neta correspondiente (absorción de 220 nm - 2 × 275 nm, eliminando la interferencia de la materia orgánica).

El software incorporado al instrumento generará una curva estándar a través de un ajuste de regresión lineal basado en los datos de "concentración - absorción neta" (se requiere un coeficiente de correlación R m2 ≥ 0999). Si un punto de concentración se desvía demasiado de la curva (por ejemplo, el margen residual es superior al 5%), es necesario reformular la solución estándar de concentración y volver a medirla.

Después de la generación de la curva, el instrumento guardará los parámetros de la curva (pendiente, interceptación), que se llamarán directamente durante las pruebas posteriores para calcular la concentración de la muestra.

3. calibración de un solo punto (calibración auxiliar, adecuada para la verificación rápida diaria)

Cuando el instrumento ha conservado la curva estándar y solo es necesario confirmar la precisión de un rango de concentración, se puede tomar una solución estándar cercana a la concentración esperada de la muestra (por ejemplo, se espera que la muestra sea de 3 mg / l, se selecciona una solución estándar de 2 mg / l o 5 mg / l) para la Determinación de un solo punto.

Comparar el valor de concentración medido por el instrumento con la concentración real de la solución estándar, si el error relativo es ≤ 5%, significa que la curva es efectiva; Si el error excede el rango, es necesario volver a calibrar la curva estándar.

III. verificación después de la calibración

Verificación de muestras de control de calidad

Se selecciona una muestra de control de calidad de nitrógeno total con una concentración conocida (la concentración debe estar dentro del rango de la curva estándar y no se superpone a la concentración de la serie estándar), se determina de acuerdo con el proceso de detección de la muestra y se calcula el error relativo entre el valor determinado y el valor estándar de La muestra de control de calidad. Si el error es ≤ 5%, se demuestra que la calibración está calificada; De lo contrario, es necesario investigar la preparación de la solución estándar, la configuración de los parámetros del instrumento y otros problemas, y recalibrar.

Verificación de muestras paralelas

Se realizaron 2 - 3 determinaciones paralelas del mismo punto de concentración estándar para calcular la desviación estándar relativa (rsd). Si RSD ≤ 3%, significa que el instrumento tiene una buena precisión y los resultados de calibración son confiables.

IV. precauciones de calibración

Frecuencia de calibración: el nuevo instrumento debe calibrarse en toda la gama antes de su primer uso; En el uso diario, se recomienda calibrar la curva estándar cada 7 - 15 días y calibrar en blanco después de cada arranque; Si el instrumento se repara (como cambiar la fuente de luz, el módulo de digestión) o después del cambio del lote de reactivos, es necesario volver a calibrar a fondo.

Trazabilidad de las sustancias de referencia: se debe utilizar una reserva estándar con un "certificado nacional de sustancias de referencia", evitar el uso de líquidos de referencia no trazables autopropuestos y garantizar la normalización de la calibración.

Control ambiental: durante el proceso de calibración, mantenga la temperatura de laboratorio (20 - 25 ° c) y la humedad (40% - 70%) estables para evitar que la luz fuerte y la vibración interfieran con la precisión de detección del instrumento.

Registro y retención: registrar en detalle la fecha de calibración, la información de la solución estándar (número de lote, concentración), los parámetros del instrumento, los datos de la curva estándar, los resultados de verificación de la muestra de control de calidad, etc., y establecer un archivo de calibración para la trazabilidad.